动物源性细菌.docx

第 15 章 动物源性细菌动物源性细菌是人畜共患病的病原菌，即由一种病原菌同时可引起动物和人类的 某些传染病，称为人畜(兽)共患病，其中绝大多数是以动物作为传染源的称为动物源 性疾病(zoonosis)由于人类直接接触病畜或其污染物及媒介动物叮咬等途径感染而 致病，这些病主要发生在畜牧区或自然疫源地动物源性细菌主要有布鲁菌、鼠疫耶 氏菌和炭疽芽胞杆菌第一节 布鲁菌属布鲁菌属(Brucella)细菌是一类人畜共患传染病的病原菌，有4个生物种、13个 生物型，因最早由美国医师 David Bruce 首先分离出，故得名本属使人致病的有牛 布鲁菌(B.abortus又称流产布鲁菌)、羊布鲁杆菌(B.melitensis)、猪布鲁杆菌 (B.suis)和犬布鲁杆菌(B.canis)，在我国流行占绝对优势的是羊布鲁菌病，其次 为牛布鲁菌病一、 生物学性状形态与染色 革兰阴性小球杆菌或短杆菌大小为0.4~0.8pm X0.5~l.5pm无 芽胞，无鞭毛，光滑型菌有微荚膜革兰染色经常着色不佳，故复染时间应适当延长 至 3min 左右培养特性 需氧菌，牛布鲁菌在初分离时需5%~10%C02营养要求较高，在普通培养基上生长缓慢，如加入血清或肝侵液，或加硫胺、烟酸和生长素等可促进生长。

最适生长温度为35~37°C，最适pH为6.6~6.8经37°C培养48h可长出微小、透明、 无色的光滑型(S)菌落，经人工传代培养后可转变成粗糙型(R)菌落两种菌落可 用吖啶黄玻片凝聚试验鉴别，S型在1:1000的吖啶黄中呈均匀混浊，而R型菌出现凝 块布鲁菌在血琼脂平板上不溶血，在液体培养基中可形成轻度混浊并有沉淀生化反应 大多能分解尿素和产生根据产生H2S的多少和在含碱性染料培养基中的生长情况，可鉴别羊、牛、猪等三种布鲁菌表 15 － 1 )抗原构造与分型 布鲁菌含有两种抗原物质，即A抗原和M抗原两种抗原在不 同的布鲁菌中含量不同，牛布鲁菌含A (abortus)抗原多，故又称牛布鲁菌抗原；羊 布鲁菌含M(melitensis)抗原多故又称羊布鲁菌抗原两种抗原量的比例不同可对菌 种进行区别，如牛布鲁菌A:M = 20:l，而羊布鲁菌A:M=l:20,猪布鲁菌A:M=2:1用A 与M因子血清进行凝集试验可鉴别三种布鲁菌（表15 —1）表 15－1 主要布氏杆鲁的特性与鉴别菌种CO2Hu女脲酶试验HS2产生含染料培养基中生长凝集试验复红（1： 50000）硫堇（1： 20000)抗A因子抗M因子羊布鲁菌—不定—＋＋—＋牛布鲁菌＋＋＋＋—＋—猪布鲁菌—＋+/-—＋＋＋抵抗力 抵抗力较强，在土壤、毛皮、病畜的脏器和分泌物、肉和乳制品中可生 存数周至数月。

但在湿热60°C、20min,日光直接照射下20min可死亡；对常用消毒剂 均较敏感，如 3%来苏作用数分钟可杀死对常用的广谱抗生素也较敏感二 、 致病性与免疫性致病物质 布鲁菌的主要致病物质是内毒素荚膜与侵袭酶（透明质酸酶、过氧 化氢酶等）增强了该菌的侵袭力，使细菌能通过完整皮肤、粘膜进入宿主体内，并在 机体脏器内大量繁殖和快速扩散入血流所致疾病 布鲁菌感染家畜引起母畜流产，病原体可随流产的胎畜和羊水大量排 出；病畜还可表现为睾丸炎、附睾炎、乳腺炎、子宫炎等，隐性感染的动物也可经乳 汁、粪、尿等长期排菌，人类对布鲁菌易感，主要通过接触病畜及其分泌物或接触被 污染的畜产品，经皮肤、粘膜、眼结膜、消化道、呼吸道等不同途径感染布鲁菌侵入机体经1~6周的潜伏期，此期细菌被中性粒细胞和巨噬细胞吞噬，成 为胞内寄生菌，随淋巴流达局部淋巴结生长繁殖形成感染灶当细菌繁殖达一定数量， 突破淋巴结而侵入血流，出现菌血症由于内毒素的作用致患者发热，随后细菌进入 肝、脾、骨髓和淋巴结等脏器细胞，发热也渐消退细菌在细胞内繁殖到一定程度可 再度入血，又出现菌血症而致体温升高如此反复形成的菌血症，使患者的热型呈波 浪式，临床上称为波浪热。

感染易转为慢性，在全身各处引起迁徙性病变，伴随发热、 关节痛和全身乏力等症状，体征有肝、脾肿大人类感染布鲁菌不引起流产，原因可能是易感动物的生殖器官和胎膜上含有大量 赤藓醇，刺激细菌生长而引起流产，而人类胎盘中不含有赤藓醇，故不会引起流产 另外，布鲁菌的致病与本菌引起的W型超敏反应有关；还有菌体抗原成分与相应抗体 形成的免疫复合物，可导致急性炎症和坏死，病灶中有大量中性粒细胞浸润，可能是 一种III型超敏反应（Arthus反应）免疫性 机体感染布鲁菌后可产生免疫力，且各菌种和生物型之间有交叉免疫 一般认为此免疫力是有菌免疫，即当机体内有布鲁菌存在时，对再次感染则有较强免 疫力但近来认为随着病程的延续，机体免疫力不断增强，病菌不断被消灭，最终可 变为无菌免疫由于布鲁菌为细胞内寄生，故其免疫以细胞免疫为主病后机体产IgM 和IgG型抗体，可发挥免疫调理作用此外，细胞免疫和W型超敏反应所导致的免疫 保护及病理损害，在慢性与反复发作的病程中往往交织存在三 、 微生物学检查标本 血液是最常用的标本，急性期血培养阳性率高达 70%骨髓在急性期、亚 急性期病人均可分离阳性病畜的子宫分泌物、羊水，流产动物的肝、脾、骨髓等也 可作为分离培养的标本。

分离培养与鉴定 将标本接种于双相肝浸液培养基（液相为肝浸液的琼脂斜面） 置37°C、5%~ 10%C0孵箱中培养菌落大多在4~7d形成，若30d时仍无菌生长可报告2为阴性若有菌生长，可根据涂片染色镜检，CO的要求，HS产生，染料抑菌试验，玻2 2片凝集等确定型别血清学试验1•凝集试验：发病1~7d后血清中开始出出现IgM抗体，将患者血清作倍比稀释， 标准菌量为1X109个/ml，进行玻片凝集试验，1:200有诊断意义但当效价$1:100 时应重复进行试管凝集试验，需要在37C水浴16~20d后观察结果，以1:200~1:400血 清凝集者为阳性用胶乳凝集试验可在6min内判定结果，方法简易可靠2. 抗球蛋白试验（Coomb试验）：布鲁菌感染患者常出现不完全抗体，需用Coomb 试验才能检出在病程中凝集效价出现增长者有诊断意义3. 补体结合试验：一般发病3周后出现IgG抗体，由于此抗体能维持较长时间， 故对诊断慢性布鲁菌病意义较大此试验特异性高，试验结果以1:10为阳性皮肤试验 取布鲁菌素（brucellin）或布鲁菌蛋白提取物0.1ml作皮内注射, 24~48d后观察结果.局部红肿浸润直径l~2cm者为弱阳性，＞2~3cm为阳性，＞3~6cm为 强阳性。

若红肿在4~6d内消退者为假阳性皮试阳性可诊断慢性或曾患过布鲁菌病四 防治原则控制和消灭家畜布鲁菌病，切断传播途径和免疫接种是三项主要的预防措施免 疫接种以畜群为主，疫区人群也应接种减毒活疫苗（104M株疫苗皮上划痕接种），有效 期约一年急性病人用抗生素治疗，慢性者除继续用抗生素治疗外，应采用综合疗法 以增强机体免疫力，也可用特异性疫苗进行脱敏治疗第二节 耶尔森菌属耶尔森菌属（Yersinia）细菌属于肠杆菌科，是一类革兰阴性小杆菌包括11个 菌种，其中鼠疫耶氏菌、小肠结肠炎耶氏菌与假结核耶氏菌等三种肯定是人类致病菌 本属细菌通常先引起啮齿动物、家畜和鸟类等动物感染，人类通过接触动物、被节肢 动物叮咬或食入污染食物等途径感染一 鼠疫耶氏菌鼠疫耶氏菌（Y.pestis）俗称鼠疫杆菌，是鼠疫的病原菌鼠疫是一种自然疫源 性的烈性传染病，历史上曾发生过三次世界性大流行人类鼠疫是被疫鼠的鼠蚤叮咬 而受染， 1989~1998年世界各地报告鼠疫病例共5440余例，死亡681人，病死率11% 因此，鼠疫依然威胁着人类一）生物学性状形态与染色 为形两端浓染的卵圆短杆菌大小为0.5~0.8 Xl~2 m。

一般单个散 在，偶尔成双或呈短链有荚膜，无鞭毛，无芽胞革兰染色阴性从死于鼠疫的尸 体或动物新鲜内脏制备的印片或涂片，形态典型，有时可见到吞噬细胞内外均有本菌 但在化脓或溃疡性病灶及腐败材料中可见菌体膨大成球形，且着色不佳如在陈旧培 养物或生长在含高盐（30g/L NaCl）的培养基上则呈多形态性，有球形、杆形、棒形 和哑铃状等，亦可见到着色极浅的细菌轮廓，称菌影（ghos t）培养特性 兼性厌氧，最适生长温度为27~30°C，最适pH为6.9~7.2在普通培 养基上能生长，但生长缓慢在含血液或组织液的培养基上生长，24~48h可形成柔软、 粘稠的粗糙型菌落在肉汤培养基中开始呈混浊，24h后表现为沉淀生长，48h后逐渐 形成菌膜，稍加摇动菌膜呈“钟乳石”状下沉，此特征有一定鉴别意义抗原结构 鼠疫耶氏菌的抗原结构复杂，至少有18种抗原，重要的有Fl、V-W、 外膜蛋白和MT等四种抗原（图15 —1）图 15 — 11. F1 （fraction 1）抗原 是鼠疫耶氏菌的荚膜抗原，于37°C时产生，具有抗 吞噬和活化补体的作用 F1 的抗原性强，特异性高，其相应抗体具有免疫保护作用 但F1抗原是一种不耐热的糖蛋白，100°C15min即失去抗原性。

2. V和W抗原 系毒力质粒DNA编码W抗原位于菌体表面，是一种脂蛋白；V 抗原存在于细胞质中，为可溶性蛋白两种抗原总是一起产生，与细菌毒力有关，使 细菌具有形成肉芽肿损伤和在细胞内存活的能力，且有免疫抑制作用3. 外膜蛋白（Yersinia out er membrane pro teins,Yop） 其编码基因与 V-W 基因存在于同一质粒上，在37C和含Ca＜件下能产生数种外膜蛋白，这些蛋白能使细 菌在突破宿主的防御机制，导致机体发病等方面具有重要作用4•鼠毒素（murine toxin,MT） 为可溶性蛋白，是一种外毒素，对鼠类有剧烈 毒性，1遽即可使鼠致死，它可阻断动物B肾上腺能神经和引起心脏损害，但对人的损 伤作用尚不清楚 MT 具有良好的抗原性，用0.2%甲醛处理可使其脱毒制成类毒素，用 于免疫动物制备抗毒素5•内毒素 其性质与肠道杆菌内毒素相似，可致机体发热，产生休克和DIC等 抵抗力 对理化因素抵抗力较弱湿热70~80C10min或100C1min死亡，5%来 苏或5%石炭酸20min内可将痰液中病菌杀死，但在自然环境中的痰液中能存活36d， 在蚤粪和土壤中能存活 1 年左右。

变异性 鼠疫耶氏菌通过自发或诱发性突变、转座子移位及基因转移等机制发生 变异，其生化特性、毒力、耐药性和抗原构造等均可出现变异菌株与多数肠道菌光 滑（S）型菌落致病性强的特征不同，野生菌株的菌落呈粗糙（R）型经人工传代培 养后菌落逐渐变为 S 型，其毒力也随之减弱二）致病性与免疫性致病物质 鼠毒素主要对鼠类致病，具外毒素性质，但只有当细菌自溶裂解后才 释放鼠疫耶氏菌的毒力很强，少数几个细菌即可使人致病，其致病性主要与 F1 抗原、 V-W抗原、外膜抗原及内毒素等相关所致疾病 鼠疫是自然疫源性传染病，一般先在鼠类间发病和流行，通过鼠蚤的 叮咬而传染人类，尤其当大批病鼠死亡后，失去宿主的鼠蚤转向人群人患鼠疫后， 又可通过人蚤或呼吸道等途径在人群间流行临床常见有腺型、肺型和败血症型鼠疫鼠疫耶氏菌侵入人体，被吞噬细胞吞噬后能在细胞内生长繁殖，并沿淋巴流到达 局部淋巴结，引起严重的淋巴结炎犯及的淋巴结多在腹股沟，一般为单侧，并引起 肿胀、出血和坏死，称为腺鼠疫如吸入染菌的尘埃则引起原发性肺鼠疫，也可由腺 型或败血症型鼠疫蔓延而致继发性肺鼠疫病人高热寒战，咳嗽、胸痛、喀。