血液产品使用基础手册.docx

血液成份制备第一节 成份输血概述成份输血是用物理或化学方法把全血分离制备成多种较浓和较纯制品以供临床输用血液成份包含血细胞成份和血浆成份等血细胞成份有红细胞、白细胞、血小板；血浆成份有白蛋白、免疫球蛋白和其它凝血因子本章关键叙述用物理方法依据血细胞在血液中比重不一样制备多种血液成份，包含红细胞、白细胞、血小板、血浆和冷沉淀等类制品伴随科学发展和技术进步，血液成份制备方法现在可分为两种，一个为手工制备；另一个是用血细胞分离机从单一献血者采集高度浓缩某种成份，而将其它成份回输给献血者成份输血之所以能快速发展，在于较全血输注有很多优越性第一，诊疗效果显著成份输血标准是确定患者缺什么成份补充什么成份，将全血中某种成份分离、纯化得到高浓度、便于保留和运输血液制品，把多个献血者同一个血液成份混合成为有效诊疗剂量，给缺乏这种血液成份患者输注，能够得到很好诊疗效果红细胞制剂种类及制备红细胞是血液关键成份之一，含相关键运输氧气和二氧化碳生理功效临床上需要输血患者大约80%以上需补充红细胞红细胞制品种类很多，中国外常见制品包含悬浮红细胞、浓缩红细胞、悬浮少白细胞红细胞、浓缩少白细胞红细胞、洗涤红细胞、年轻红细胞、冷冻解冻去甘油红细胞等。

分离多种不一样血液成份依据全血中红细胞、血小板和血浆比重不一样（分别为1.08~1.09、1.03~1.04和1.027），利用重力离心法分离血液成份，多采取大容量冷冻离心机把全血采集于塑料袋中，于离心筒内用柔软塑料片平衡离心筒，对称位放于离心机内，依据所需分离成份选择不一样离心力经过相对离心力(g)和离心机半径(cm)(从离心机中轴点到离心筒内底部距离)换算出每分钟离心转数离心机每分钟转数，离心时间直接影响多种成份分离效果，必需定时给校正 一、悬浮红细胞悬浮红细胞是现在中国外临床应用最广泛一个红细胞制品，用离心方法分离出全血中大部分（90%）血浆后，加入多种晶体盐红细胞保留液现在中国大部分血袋厂关键生产ACD-B、CPD、CPDA-1等全血保养液，依据全血保养液种类给出红细胞添加液种类有MAP 、SAGM、CPD-1、AS-1、AS-3、AS-5MAP红细胞添加液对应全血抗凝剂为ACD-B；SAGM红细胞添加液对应全血抗凝剂为CPD制备方法采集血液容器为塑料袋，中国每次采血1U（200ml全血）或2U（400ml全血），通常采集于三联袋或四联袋中，主袋内灌注抗凝剂枸橼酸盐-葡萄糖（ACD）或枸橼酸盐-磷酸盐-葡萄糖（CPD），末袋内灌注红细胞保留液MAP 、SAGM。

采血后多联袋在大容量冷冻离心机内离心，离心力通常为3600×g温度控制在4±2℃，离心10分钟轻轻取出离心后血袋悬挂分离支架上或放于分浆夹内，将上层不含血细胞血浆分入空转移袋内，注意不可把血细胞分入血浆内把多联袋末代中保留液加入主袋浓缩红细胞内，使红细胞和保留液充足混匀，血细胞比容为0.5～0.65 用高效热合机切断塑料袋间连接，封闭红细胞悬液袋上全部管道，制成悬浮红细胞以上操作通常在环境洁净房间内即可进行，因为多联袋为密闭无菌、无热源系统悬浮红细胞特点这种类型红细胞是含有全血中全部红细胞、一定量白细胞、血小板、少许血浆和保留液混悬液，含有补充红细胞作用保留于4±2℃，在含有腺嘌呤保留液中保留红细胞保留期为35天，另外因该制品含有一定量白细胞，长久输用患者有可能发生非溶血性发烧反应二、浓缩红细胞浓缩红细胞能够在全血有效保留期内任何时间分离出部分血浆制备而成，通常推荐用三联袋采集全血制备浓缩红细胞制备方法用三联袋采集1U或2U全血于主袋内将全血在4±2℃离心，离心力3600×g，离心10分钟，沉淀红细胞取出离心后全血，将部分血浆分入空转移袋用热合机切断塑料袋间连接管，制备成浓缩红细胞二）、浓缩红细胞特点浓缩红细胞含有全血中全部红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆，其血细胞比容为70%±5%，浓缩红细胞于4±2℃保留，保留期和全血相同，其它特点和悬浮红细胞相同。

三、悬浮少白细胞红细胞有反复输血史或妊娠史患者，再次输血时，有会出现严重非溶血性发烧反应（NHFTR）经研究证实，大多数患者因输血或受孕，体内产生白细胞抗体，这些抗体大部分属于人类白细胞抗原（HLA）系统特同种抗体，当再度输入含有白细胞全血或其它血液成份时，有可能产生免疫性发烧输血反应多种血液成份中含白细胞数量不一样，减除全血或血液制品中白细胞是安全输血一个方法，由此产生了多个制备少白细胞制品方法，以下介绍减除红细胞中白细胞方法悬浮少白细胞红细胞制备方法从全血中减除白细胞方法很多，其效果依据方法不一样而异，但现在应用任何一个方法全部不可能把白细胞全部去除掉，通常认为减除后白细胞至5×108/L，可避免因白细胞抗体所致NHFTR白细胞降至5×106/L能够预防HLA抗体所致同种免疫和白细胞携带病毒相关疾病传输现在全国各血站多使用滤器过滤法制备悬浮少白细胞红细胞1、将检验无破漏、识别条码齐全四联袋轻轻混匀，然后挂到滤白低温工作柜内，检验、关闭滤器旁路夹，打开折通管，让血液缓缓经过白细胞过滤器，流入转移袋内2、 注意观察，调整滴速，采血当日过滤时间为15-30分钟/400ml，采血后次日过滤时间为7-12分钟/400ml，过快轻易出现白细胞去除效果欠佳和溶血现象发生。

3、过滤完成后，将转移袋气体经过旁路排回原血袋，关闭旁路夹子，促进过滤器内储存血液充足流出4、 将流空原血袋热合后废弃，流入转移袋血液即为少白细胞全血 将少白细胞全血三联袋选择离心条件，对血液进行离心5、取出离心后少白全血，将血浆全部分入空转移袋，把红细胞保留液添加到浓缩少白细胞红细胞内，用热合机热合切断塑料袋间连接管，即为悬浮少白细胞红细胞二）悬浮少白细胞红细胞特点现在各血站使用滤器含有较高减除白细胞效果，白细胞去除率＞99%，红细胞回收率＞90%，通常可使白细胞降至1.0×106/L～1.0×105/L这种制品能够避免NHFTR及HLA同种免疫发生，是最为有效方法因为血液在采集后2～6℃冷藏保留二十四小时后，部分白细胞已失去活性裂解和死亡，假如二十四小时后再行滤出，那么白细胞基质和传输疾病病毒已无法滤出，难以避免传输疾病和输血不良反应发生，早滤除不仅除掉白细胞抗原，还能够避免白细胞保留期间产生代谢产物堆积，比如：IL- 1α、IL-1β、IL-6、TNF-α等白细胞介素对血制品污染，所以白细胞滤除最好时机是采血后、保留前，滤除率要＞99.9%四 洗涤红细胞 通常见生理盐水反复洗涤，不仅降低白细胞和血小板，而且使血浆蛋白含量下降，是一个减除白细胞和血浆蛋白良好方法。

(一)制备方法 1.封闭式四联盐水袋洗涤法 四联盐水袋为3个容积为350～400ml单袋用塑料管道相连密闭无菌、无热原系统每袋内装有200ml注射用生理盐水4个袋子之间用塑料夹子夹住，相互不相连1)保留期内悬浮少白红细胞、悬浮红细胞、浓缩红细胞、浓缩少白红细胞、去白全血或全血均能够用作洗涤红细胞原料细胞，通常要求全血分出血浆，其它血液成份直接添加盐水即可2)将四联袋盐水袋和红细胞袋用无菌接管机连接，把袋内200ml盐水加入红细胞袋内，充足混匀3)平衡后，对称放入离心机内，在4 ℃±2℃ 以2900×g离心力离心5分钟4)离心后将装有血液血袋悬挂于支架上或分浆夹上，把上清和白膜分入空袋内热合切断和废液相连塑料管，弃去废液袋5)反复（2）（3）（4）步骤，依次洗涤红细胞3次6) 洗涤完成加入盐水充足混匀，1单位成品净重125g±10% 2单位成品净重250g±10%2.开放式洗涤法 若无四联盐水袋装置，能够用一般医用生理盐水，在百级超净台内连接洗涤1)同封闭式四联盐水袋洗涤法中(1)要求2)在超净台上用无菌操作将生理盐水加入被洗涤红细胞袋内，混匀3)在4℃±2℃ 以2908×g离心力离心5分钟。

4)在超净台上将上清液及白膜分入废液袋中，再加入生理盐水并混匀5) 在4℃±2℃ 以2900×g离心力离心5分钟6)如此反复(4)(5)步骤常规反复洗涤3次，最终一次分出上清和白膜后，在洗涤红细胞制品中加入生理盐水充足混匀1单位成品净重125g±10% 2单位成品净重250g±10%3.机器洗涤法 国外普遍应用机器洗涤红细胞，洗涤红细胞机型很多，比如细胞处理机等洗涤效果优于手工洗涤，但价格昂贵，中国现在使用甚少二)洗涤红细胞特点通常手工洗涤红细胞能够去除红细胞中80%～90%白细胞和98%以上血浆蛋白使用机器洗涤后红细胞中，白细胞减至5×108/L以下，几乎不含任何血浆蛋白该制品不仅可降低白细胞引发NHFTR反应，也能够降低或避免血浆蛋白所致过敏反应，适适用于本身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输血患者立即对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体患者不管那种方法洗涤后红细胞均应在二十四小时内输注，因为在洗涤过程中破坏了原血袋封闭系统，有操作污染可能 五、冰冻解冻去甘油红细胞红细胞低温保留法为英国Smith首先发明1953年Mollison使用冻融红细胞首次成功同期，Tullis用Cohn分离机洗涤冻融后红细胞，以后逐步推广应用，大家逐步认识到冰冻红细胞是长久保留红细胞一个理想方法。

红细胞代谢速度取决于保留温度，若将保留温度降至使红细胞代谢率达成几乎停止时，红细胞代谢耗能最少，从而可避免代谢毒性产物积累，以达成延长红细胞保留期目标不过血液在零度以下会结冰，在细胞内外形成冰晶，破坏细胞结构，使细胞外液渗透压升高，促进细胞脱水，最终引发细胞解体死亡所以必需在冰冻过程中加防冻剂，通常常见防冻剂分为两种，一是细胞内防冻剂，如甘油、二甲基亚砜(DMSO),二是细胞外液防冻剂，如羟乙基淀粉(HES).冰冻红细胞常见防冻剂为甘油制备方法浓缩红细胞制备 将贮存6天以内悬浮红细胞、悬浮少白红细胞、少白全血、全血经3600（g）离心10分钟，分离出血浆、红细胞保留液等上清，其它部分为浓缩红细胞依据甘油化后红细胞中甘油最终浓度不一样分为高浓度甘油慢冻法和低浓度甘油超速冷冻法高浓度甘油慢冻法甘油最终浓度40%，红细胞冰冻及保留温度-80℃低浓度甘油快冻法甘油最终浓度20%左右，将红细胞快速冰冻并保留在-196℃液氮中现中国多数血站采取是高浓度甘油慢冻法，下面介绍高浓度甘油慢冻法制备冰冻解冻去甘油红细胞制备方法甘油化 向1U浓缩红细胞内加入57.1%甘油溶液160毫升，加甘油速度要先慢后快，再15~20分钟内加完，加液同时要不停地振荡混匀，甘油化红细胞室温平衡半小时。

然后2500（g）8分钟离心去上清放-80℃冻存解冻：于输注前将贮存冰冻红细胞从低温冰箱取出，放入37~40℃恒温水浴箱中缓慢摇动，融化到全部解冻洗涤脱甘油：先加9%浓盐水80ml（15~20分钟加完），以每分钟10ml速度加入6%羟已基淀粉100ml，离心去上清；再以每分钟10ml速度加入6%羟已基淀粉100ml，每分钟20ml速度加入0.9%NaCl，离心去上清；然后以每分钟40ml速度加入200ml0.9% NaCl，如此洗涤三遍最终加入0.9%NaCl100ml制成红细胞悬液供临床输注冰冻解冻去甘油红细胞特点：冰冻解冻去甘油红细胞最大优点是能够长久保留，通常保留期为所以常见于本身输血和稀有血型红细胞保留，能够处理稀有血型患者抢救性输血，同时本身输血又可避免输血反应和输血相关疾病传输通常冰冻红细胞解冻洗涤后在4℃±2℃保留，二十四小时内输注冰冻红细胞操作过程复杂，需要一定设备，制品价格昂贵，所以推广使用受到一。