紫外分光光度计测VC.docx

紫外分光光度法测定蓝莓中的维生素C含量（一） 实验目的（1） 掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法2）掌握水果（或蔬菜）中的维生素C含量的测定方法二） 实验原理紫外分光光度快速测定法是根据维生素 C 具有对紫外产生 吸收和对碱不稳定的特性，于波长243nm处测定样品溶液与碱处 理样品两者吸光度之差,通过查校准曲线,即可计算样品中维生 素C的含量此法操作简单、快速准确、重现性好，结果令人满 意特别适合含深色样品的测定三）仪器与试剂仪器分析天平，蓝莓若干，研钵，容量瓶（0ml,50ml,100ml）, 滤纸，漏斗， 5ml 移液管试剂 抗坏血酸标准溶液：用分析天平准确称取抗坏血酸 10 mg， 加2 mL 1%盐酸，加蒸馏水定容至100 mL,混匀此抗坏血酸溶 液的浓度为100 |i g • mL-1（四）实验步骤1. 标准曲线的绘制试管标号 1 2 3 4 5 6 7 8标准VC加入体积/ml0.10.20.30.40.50.60.81.0蒸馏水9.99.89.79.69.59.49.29.0VC溶液1.02.03.04.05.06.08.010.0浓度/(ug/ml)2样品的测定1．样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。

称取5.00 g于研体中，加入2〜5 mL 1% HCI,匀浆，转移到25 mL 容量瓶中，稀释至刻度若提取液澄清透明，则可直接取样 测定，若有浑浊现象，可通过离心(10000 g, 10 min)来消除2．样品的测定：取 0.1〜0.2mL 提取液，放入盛有 0.2〜 0.4 mL 10%盐酸的10 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀 以蒸馏水为空白，在243 nm处测定其消光值通过查标准曲线， 计算出样品的维生素C的含量五) 计算与数据I1XV 总维生素C的含量(u g/g)= V1XW 总式中：u 从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量(u g)V1——测消光值时吸取样品溶液的体积(mL)V 总——样品定容体积（ mL）W 总——称样重量（ g）数据见 excel 表六）思考与讨论除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法? 答：一、氧化还原法1. 直接碘量法2. 2,6- 二氯酚靛酚滴定法二、分光光度法1. 紫外快速测定法2. 2,4- 二硝基苯肼法3. 高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸三、光电比浊法四、电化学法五、荧光分析法1. 抗坏铁酸的微量荧光测定法2. 抗坏铁酸总量的荧光测定法。