HBV研究的动物模型.ppt

单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,,*,HBV研究的常用动物模型,王宝菊,,2010年10月15日,,HBV的特点,,HBV具有顽强的抵抗力,,,HBV具有肝脏嗜性,,,HBV具有严格的种属特性：仅人和黑猩猩能感染HBV,,黑猩猩 HBV感染模型,,目前唯一的HBV自然感染的动物模型,,,HLA-I类分子和HBV的CTL多肽表位与人有重叠，可用于研究HBV感染的CTL应答,,,价格昂贵、存在伦理学限制,Muchmore EA. Immunol Rev. 2001 Oct;183:86-93.,,树鼩HBV感染模型,,树鼩（,Tupaia belangeri,）与松鼠大小相似，但与灵长类动物亲缘关系很近树鼩可被HBV感染，但感染率很低Weizsäcker F, Köck J, MacNelly S, Ren S, Blum HE, Nassal M. Methods Mol Med. 2004;96:153-61.,,Walter E, Keist R, Niederöst B, Pult I, Blum HE. Hepatology. 1996 Jul;24(1):1-5.,,HBV转基因小鼠模型,,已有含有全拷贝HBV基因的转基因小鼠，在肝细胞内可以有效的完成HBV的生活周期,,,免疫系统背景清楚可用于研究HBV感染时的病毒清除机制和免疫损伤机制,,,HBV基因组整合至染色体，非自然感染，肝内不能产生cccDNA,Chisari FV.,Curr Top Microbiol Immunol,. 1996;206:149-73.,,高压水注射HBV感染小鼠模型,转染动物只需要质粒DNA，特别适合研究HBV变异株的生物学特性,,,利用pAAV-HBV1.2质粒，选择C57BL/6小鼠可建立HBV持续性“感染”,,,检测到针对HBV的免疫应答，可用于研究HBV感染的免疫调节,,,研究HBV感染中天然免疫的作用（如ISG15）,,高压水注射小鼠模型相关文献,,Hydrodynamic injection of viral DNA: a mouse model of acute hepatitis B virus infection.,Yang PL, Althage A, Chung J, Chisari FV. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002 Oct 15;99(21):13825-30.,,,An immunocompetent mouse model for the tolerance of human chronic hepatitis B virus infection.,Huang LR, Wu HL, Chen PJ, Chen DS.,Proc Natl Acad Sci U S A,. 2006 Nov 21;103(47):17862-7.,,,Immune effectors required for hepatitis B virus clearance.,Yang PL, Althage A, Chung J, Maier H, Wieland S, Isogawa M, Chisari FV. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 Jan 12;107(2):798-802. Epub 2009 Dec 22. PubMed PMID: 20080755; PubMed Central PMCID: PMC2818933.,,,Hepatitis B virus core antigen determines viral persistence in a C57BL/6 mouse model.,,Lin YJ, Huang LR, Yang HC, Tzeng HT, Hsu PN, Wu HL, Chen PJ, Chen DS. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 May 18;107(20):9340-5. Epub 2010 May 3. PubMed PMID: 20439715; PubMed Central PMCID: PMC2889105.,,嵌合小鼠HBV感染模型,采用各种手段将人肝组织移植至免疫缺陷小鼠,,,移植后的人肝组织能支持HBV复制，可用于研究抗HBV药物,,,可用于研究HBV感染的免疫应答和评估治疗性疫苗,Ilan E, Burakova T, Dagan S, et. al. Hepatology. 1999 Feb;29(2):553-62.,,嗜肝DNA病毒及其家族成员,,嗜肝病毒（Hepadnaviridae）是一组具有肝脏嗜性的DNA病毒，在病毒粒子的大小、形态和结构以及基因组的大小、结构等方面非常近似，1991年国际病毒分类委员会（ICTV）命名。

依据病毒颗粒、病毒基因的细微差别和病毒蛋白抗原性的差异，嗜肝病毒科又可分为两属，正类嗜肝病毒属（orthohepadnavirus，哺乳动物的）和禽类嗜肝病毒属（avihepadnavirus）,,,正类嗜肝病毒：HBV、WMHBV、OHV、GHV、WHV、GSHV、ASHV,,,禽类嗜肝病毒：DHBV、HHBV、RGHV、SGHBV、STHBV,,DHBV,感染的家鸭模型,研究嗜肝病毒细胞表面受体、HBV复制周期和基因突变,,,研究病毒持续存在和病毒清除的机制以及筛选新的抗病毒药物,,,禽类与人的亲源关系较远，影响研究结果的实际应用,,土拨鼠模型,WHV,在病毒形态、基因组结构、复制周期等方面与,HBV,十分类似,,,WHV,感染后的自然经过如慢性化、,HCC,等与,HBV,类似,,,土拨鼠模型已被用于研究：,,1.,嗜肝病毒感染的发病机制,,2.,评价新的预防性和治疗性疫苗,,3.,抗病毒药物筛选,,4. WHV,感染的,T,细胞应答,,,土拨鼠模型在抗病毒药物评价中的应用,Antimicrob Agents Chemother. 2009 Sep;53(9):3803-14.,MIV-20,Entacavir,Antimicrob Agents Chemother. 1998 Dec;42(12):3209-17.,,利用土拨鼠模型进行HBV研究的主要研究小组,Cornell university/Tennant, Bud C., Stephan Menne,,,http:///,,,,Georgetown University/Paul J. Cote,,,Duisburg-Essen University/Micheal Roggendorf, Mengji Lu,,,Memorial University/Thomas I. Michalak,http://www.med.mun.ca/Medicine/Faculty/Michalak,-Thomas.aspx,,,土拨鼠WHV感染模型相关文献,,Roggendorf M, Yang D, Lu M. The woodchuck: a model for therapeutic vaccination against hepadnaviral infection. Pathol Biol (Paris). 2010 Aug;58(4):308-14.,,,Kulkarni K, Jacobson IM, Tennant BC. The role of the woodchuck model in the treatment of hepatitis B virus infection. Clin Liver Dis. 2007 Nov;11(4):707-25,,,Roggendorf M, Schulte I, Xu Y, Lu M. Therapeutic vaccination in chronic hepatitis B: preclinical studies in the woodchuck model. J Viral Hepat. 2007 Nov;14 Suppl 1:51-7.,,,Lu M, Menne S, Yang D, Xu Y, Roggendorf M. Immunomodulation as an option for the treatment of chronic hepatitis B virus infection: preclinical studies in the woodchuck model. Expert Opin Investig Drugs. 2007 Jun;16(6):787-801.,,,Menne S, Cote PJ. The woodchuck as an animal model for pathogenesis and therapy of chronic hepatitis B virus infection. World J Gastroenterol. 2007 Jan 7;13(1):104-24.,,,Tennant BC, Gerin JL. The woodchuck model of hepatitis B virus infection. ILAR J. 2001;42(2):89-102. Review. PubMed PMID: 11406711.,,中国旱獭WHV感染模型,在中国，旱獭分布于西北地区，主要有四种：,,1. M. himalayana,,,2. M. caudata,,,3. M. baibacina,,,4. M. sibirica,,Weeks,WHcAb(%inhibition),WHsAg(OD450),WHV DNA (copies/ml),1,2,4,3,3.3kb,MH+,MH-,W,MH+,MH-,W,WHsAg,WHcAg,Chinese woodchucks were susceptible to WHV infection,WHV replication intermediates,anti-WHc, WHsAg and WHV DNA in serum,WHsAg, WHcAg and histological changes in liver,J Gen Virol. 2011;92(Pt 3):681-91.,,旱獭WHV感染模型在抗病毒治疗中的应用,,HBV研究常用的动物模型,灵长动物HBV感染模型,,,黑猩猩HBV感染模型,,,小鼠模型,,,转基因小鼠模型,,嵌合小鼠模型,,高压水注射小鼠模型,,,嗜肝病毒感染的动物模型,,,鸭DHBV感染模型,,土拨鼠WHV感染模型,,旱獭WHV感染模型,,旱獭模型组近年来参与的课题,乙肝病毒感染动物模型-中国旱獭的研究(30271170) 自然科学基金,,,乙肝病毒遗传学特征及其致病和致癌相关性研究（2005CB522901）973项目,,,乙型病毒性肝炎病毒感染模型（2008ZX10002011）十一五国家重大科技专项,,,HBV细胞和动物模型的建立和应用（2012ZX10004503）十二五国家科技重大专项,,,病毒与免疫细胞的相互作用与机理的联合研究（S2011GR0448、2011DFA31030）国际科技合作项目,,旱獭模型组的主要研究内容,,早期应用抗病毒药物及DNA疫苗对HBV感染的影响(朱珍妮）,,,利用大鼠和旱獭评价核苷类似物线粒体毒性（朱彬）,,,旱獭WHV慢性感染模型的建立,,,旱獭模型的优化及相关检测方法的建立或完善,,,利用小鼠模型研究免疫抑制剂对HBV感染的影响(王俊忠、黄顺梅）,,,应用小鼠模型研究Treg在HBV感染中的作用,,,应用免疫抑制剂诱导的HBV持续复制模型评价因免疫抑制诱导HBV复发的治疗方案,,欢迎加入！,,。