实验 改良半叶法测定叶片光合速.docx

实验八改良半叶法测定叶片光合速率【原理】植物进行光合作用形成有机物，而有机物的积累可使叶片单位面积的干物重增加，但是，叶片在 光下积累光合产物的同时，还会通过输导组织将同化物运出，从而使测得的干重积累值偏低为了消 除这一偏差，必须将待测叶片的一半遮黑，测量相同时间内叶片被遮黑的一侧单位面积干重的减少值， 作为同化物输出量（和呼吸消耗量）的估测值这就是经典的半叶法测定光合速率的基本原理测定时 须选择对称性良好、厚薄均匀一致的两组叶片，一组叶片用于测量干重的初始值，另一组（半叶遮黑 的）叶片用于测定干重的终了值，不但手续烦琐，而且误差较大改良半叶法”采用烫伤、环割或化学 试剂处理等方法来损伤叶柄韧皮部活细胞，以防止光合产物从叶中输出（这些处理几乎不影响木质部 中水和无机盐分向叶片的输送），仅用一组叶片，且无须将一半叶片遮黑，既简化了手续，又提高了 测定的准确性仪器与用具】电子天平；烘箱1台；铝盒2个（或者用纸包）；刀片1片；自带1把剪刀；有机玻璃（或硬塑料） 模板1块；纱布或手帕1块；纸牌10个；锡纸10小条等实验步骤】1. 选择叶片实验可在晴天上午7〜8点钟开始预先在茶山茶树上选定有代表性的叶片（如叶 片在植株上的部位、年龄、受光条件等应尽量一致）10张，挂牌编号。

2. 叶片基部处理 可用刀片将叶柄的外皮环割0.5cm左右宽，切断韧皮部运输为了使经以上处 理的叶片不致下垂，可用锡纸、橡皮管或塑料管包绕，使叶片保持原来的着生角度3. 剪取样品 叶基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，开始进行光合速率测定一般按 编号顺序分别剪下对称叶片的一半（中脉不剪下），并按编号顺序将叶片夹于湿润的纱布上，保持黑暗， 带回室内带有中脉的另一半叶片则留在植株上进行光合作用过4〜5h后（光照好、叶片大的样品， 可缩短处理时间），再依次剪下另一半叶同样按编号包入湿润纱布中带回实验室两次剪叶的次序 与所花时间应尽量保持一致，使各叶片经历相同的光照时数4. 称重比较将各同号叶片之两半对应部位叠在一起，用适当大小的模板和单面刀片（或打孔 器），在半叶的中部切（打）下同样大小的叶面积，将光暗处理的叶块分别放在105°C下杀青10min，然 后在80C下烘至恒重（约5h），在分析天平上分别称重，将测定的数据填入表1中，并计算结果表1用改良半叶法测定光合速率的记载表测定日期：月 日 试验地点：植物材料：备注：第一次取样时间：第二次取样时间：取样面积（cm2）:光合作用时间（h）:暗处理叶的干重（mg）:光照叶的干重（mg）:干重增量（光一暗）（mg）:5. 计算光合速率(mg/dm2・h) = [(光-暗)干重增量(mg)]^[叶片切块面积(dm2)x光合时间(h)]上述是总光合速率的测定与计算，如果需要测定净光合速率，只需将前半叶取回后，立即切块， 烘干即可，其他步骤和计算方法同上。

注意事项】1. 实验要选择晴天做，所用叶片要选择对称性好、厚薄一致、向阳、无病虫的功能叶2. 韧皮部要切割彻底，如果切割不彻底，部分有机物仍可外运，测定结果偏低3. 切割韧皮时，不要伤及木质部4. 光照结束后，相同编号的两半叶要对应部位叠在一起，用适当大小的模板切割相同的叶片面积思考题】1. 通过光合作用测定你能够解决什么理论和实践问题？2. 改良半叶测定光合速率受哪些因素的影响？3. 简要介绍测定光合速率的三种方法及原理4. 测定光合速率为什么要选择对称性好、叶龄、叶色、受光一致，无病虫害的功能叶？5. 为什么将待测叶片编号？6. 在改良半叶法中为什么要切割韧皮部？。