药理实验给药量以及实验数据统计.ppt

第二章 中药药理研究的基本知识n第一节 n中药药理实验设计的基本原则n1. 重复 ：n目的：验证在类似的条件是否可获得结果 的重现性以及结果的变异情况 n要点：nA.确定适当的样本数nB.各组动物数目尽量相同n按动物类型确定样本数：n（1）小动物：计量>10例;计数>30例n（2）中等动物：计量> 8 ;计数> 20例n（3）大动物5-10例n2. 随机：n 目的：n（1）避免非研究因素影响n（2） 除研究因素外，提高各比较组 的其他因素的均衡性、可比性n（3）满足统计学假设检验的要求n抽签随机法：n例：30只小鼠，要求随机分为3组：n可先将30只小鼠按1至30编号，做1-30 号签，充分混合号签后，随机各取10 枚为一组 n随机数字表法：nB组:n顺序号: 2， 3， 5， 7， 10， 11，n随机号: 08， 18， 27， 38， 90， 16 n余数: 2, 0, 0, 2, 0, 1n调整后各组的编号 :nA 组：1， 9，12，13， 15 nB 组：2， 5，7， 10， 11 nC 组: 3，4， 6， 8， 14 3. 对照 n（1） 正常对照组（空白对照、阴性对照） n（2）模型对照组 n（3）阳性对照组 n 意义：①检验实验体系是否可靠 n ②粗略估计受试药与对照药相比， 作用强度与特点上有哪些差异。

n（4）假手术对照组 n 有时可以替代正常对照 n（5）自身对照 n 观察同一个体给药前、后的区别 .第二节 实验动物选择 n1、符合医学实验动物标准 n一级：普通动物（亦称常规动物或无疾病的动 物）；n二级：清洁动物（饲养在温度恒定，普通设施 中的动物，饲料、垫料，用具均经过高压消毒 ）；n三级：无特殊病原体动物（specific-pathogen free , 简称SPF动物）；n四级：无菌动物（机体内外均无任何寄生虫的 动物，一般是临产前按无菌手术 剖腹取出胎仔 ，在无菌条件下用无菌饲料繁养获得的动物） n2、根据实验目的选择敏感种系n 心血管系统: 大鼠猫、犬、小型猪等 n 体温：兔 n 呕吐实验：鸽、猫或狗等n 免疫：纯种小鼠 n原则:选择对药物的反应与人体相近的 种系 n3、性别 ：根据要求选择 n用一种性别比两种性别兼用所得结果离散 度较小 n4、年龄体重 ：n 每批动物的体重，年龄越接近越好 n 通常：小鼠:18-22g，大鼠:200±25g，n 豚鼠:250-300g，兔、猫:1.5-2Kg,n 犬:10-15kg。

n 大鼠、小鼠:6-8周龄 n4、数量 ：n计量研究：小鼠每组>10只 n 大鼠每组>8只 n 豚鼠或兔每组>6只n 猪或狗>5只 n计数研究：小鼠每组>30只 n 大鼠每组>20只 n5.习性:小鼠、大鼠均为群居动物 ，不宜单独饲养 第三节 受试药 n1.制备情况：n（1）新药受试药要求：用处方固定，质 量稳定、工艺、质控指标恒定后的中试产 品n（2）一般受试中药：生药经鉴定科属种 清楚；提取制备工艺明确，含量确定（以 生药量或有效组分含量表示）n（3）中药单体：化学结构式清楚n 2、给药途径 n实验的给药途径与临床拟使用的途径一致 n中药粗制剂一般不用注射给药或体外实验 的方法检测药物效应 3、给药时间n预防性给药：n治疗给药： 4、剂量：n 剂量组数：新药研究至少设3个剂量组 n 三者最好成等比，能反应量效关系n 给药容量相等，浓度不等n 合理选择剂量：n （1）参考LD50：在LD50的1/10、1/20 、1/40等范围内设置高、中、低剂量组。

n （2）根据临床用药等效量计算 ： 不同种类动物等效用药量的计算小白 鼠20g大白 鼠 200g豚鼠 400g兔 1.5kg猫 2.0kg猴 4.0kg狗 12.0kg人 70.0kg小白鼠 20g1.07.012.2527.829.764.1124.2387.9大白鼠 200g0.141.01.743.94.29.217.856.0豚鼠400g0.030.571.02.252.45.210.231.5兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.514.2猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1狗12.0kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1人70.0kg0.002 60.0180.0310.070.0780.160.321.0n应用举例：n①某复方的总药量是60g/剂，每天1剂 按实验动物与人用药量折算表计算 ，200g重大鼠等效量是多少？n200g重大鼠等效量为： 60g×0.018=1.08g/只，n或：n 60g÷56＝1.07g/只 n人的每公斤体重给药量为： 60g÷70=0.857g/Kg。

n大鼠每公斤的给药量是： 1.08g×1000/200=5.4g/Kg n按体重计算，要达到等效，大鼠的剂 量应为人用剂量的 5.4g/Kg÷0.857g/Kg=6.3（倍） n②如同一复方要用小鼠实验，小鼠每 只的给药量为：n60×0.0026＝0.156g/只；n0.156÷20/1000=7.8 g/Kg；n按体重计算，要达到等效，小鼠的剂 量应为人用剂量的 7.80g/Kg÷0.857g/Kg=9.1（倍）n③豚鼠应用量为60÷31.5=1.90g/只；n1.90÷400/1000=4.762g/Kgn按体重计算，要达到等效，豚鼠的剂 量为人用量的4.762÷0.857＝5.56（倍 ）n④兔：60÷14.2＝4.225g/只； 4.225÷1.5＝2.81 6g/Kgn按体重计算，要达到等效，n兔的剂量应为人用量的n2.816÷0.857＝3.287（倍）n⑤狗用量为60g÷3.1＝19.35g/只； 19.35÷12=1.61g/Kgn按体重计算，要达到等效，n狗的给药量应为人的n1.61÷0.857＝1.88（倍）噻嗪类 不同种类动物间用药剂量换算表 （转换因子 计算法）n某利尿 中药250g重大鼠的有效量为 250 mg/kg，试计算15kg犬的等效实 验剂量？n犬的等效实验剂量n＝ 250 mg/kg×6.9÷22n=78.4mg/kg不同种类动物间用药剂量换算表 （体表面积/kg体重 比值法）n某利尿 中药250g重大鼠的有效量为 250 mg/kg，试计算15kg犬的等效实 验剂量？n犬的等效实验剂量n＝ 250 mg/kg×0.16÷0.47n=85.1mg/kgn（3）根据文献估计剂量 n如有相关的药物，相似的复方，其使 用剂量可作为参考。

n（4）通过预试估计剂量 n5．给药容量：n小鼠口服： 0.1ml-0.25ml/10g 最大不 超过0.4ml/10g n 其他途径不超过0.25ml/10gn大鼠：10ml/kg, 不超过2.0ml/100gn其他途径不超过1.0ml/100g.药物溶液配置n例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有 效的麻醉剂量为40mg/kg现有体重 为20g左右的30只小鼠要麻醉试问 要称量多少克的戊巴比妥钠，设计的 给药容量为多少，配成怎样浓度 ？药物溶液配置n答：称量戊巴比妥钠30mg，加生理 盐水至7.5ml, 使浓度为4mg/ml, 小鼠 腹腔注射0.1ml/10g(即10ml/kg)n或：称量戊巴比妥钠40mg，加生理 盐水至10ml, 使浓度为4mg/ml, 小鼠 腹腔注射0.1ml/10g(即10ml/kg)第四节 对照药 ①合法性：《中国药典》收载或符合部颁 标准，或新批准合法生产的药物n②可比性：其功用、主治、剂型（给药途 径）与受试药相似特殊情况下，在合理 范围内可适当灵活掌握n③择优选用：有多种同类药可供选用时， 应择优选用公认疗效较好的药物n选择的阳性对照药要注意有无批准文号。

n如：麝香保心丸：国药准字Z31020068n生产单位：n有效期：必须用有效期内产品n恬尔心注射用：国药准字（2001）J53号： 进口药品注册证号：BX20010122）n复方丹参注射液：沪卫药准字（1995）第 014021号 第五节 实验条件控制 n减少时间差异：动物生理活动有其昼夜节 律，如小鼠夜间活动增加，白天活动减少最 好每批实验在每天相同的时间测定n减少温度差异：室温稳定、适宜n饮食控制：有些实验需对动物禁食第六节 数据的统计处理和结果分析n(一)极端数据（outliers）的处理 ：n避免差错形成极端数据n对可疑数据及时复测或复核,及时纠正 差错n在x±3s 之外数据，可考虑舍弃否则 不应随便舍弃 n-根据《新药（西药）临床药研究指导原则汇编（药学、药理学毒理学）》 n(二)数据表达 ：n一般应至少有3位有效数字，n标准差至少有2位有效数字，n均数的小数位数应与标准差相同，n出示的结果应包括均数，标准差，例数， P值情况（大于、小于、或具体P值）n数字的精确度要与测量仪器所能达到的精 确度一致 n(三)数据统计分析应避免的差错：n1.量反应资料：n (1) 两组间实验结果比较常用t检验 （unpaired t test）。

n T值计算公式（通式）n两组例数相差不到一倍的简化t值公 式为：n下列情况两组间比较不能使用t检验:n ①方差不齐改用校正t值法（即t’检 验）n方差齐性检验：n▲如两组的标准差相差一倍以上时不 必检验，即可判断为方差不齐n▲通过计算，当 F>F0.05 时可判断为方 差不齐n(式中S较大者为S1、n1，较小者为S2, n2)nF0.05也可通过可查“方差齐性检验F值表”获 得（注：与“方差检验F值表”不同）n如：有两组数据,需统计有无显著差异：n甲组：11.5，14.1，12.3, 10.8，13.0, 13.2, 13.9 12.3, 10.6 x±s：12.41±1.26(n=9) n乙组：10.0, 11.9, 12.0, 12.8, 14.9, 17.4, 19.3, 20.2, 23.1 x±s: 15.73±4.48(n=9)n查无应舍数据n有无方差不齐： F=4.48×4.48/(1.26×1.26)=12.64n F0.05≈1.2+8/9+14/(9-3)=4.422nF>F0.05 说明两组方差不齐，用t’检验。

方差不齐时的校正t’值 计算公式n甲组：11.52±1.3 2(n=9) n乙组：15.73±4.48(n=9)n按上式计算 t’=2.142n f’=9.501n f=10时 t0.05=2.228n f= 9时 t0.05=2.262n因此,甲、乙两组间无显著差异n但以“t”检验，上述两组数据f=9+9-2=16nf=16 时 t0.05=2.120 ，将得出:两组数据有 显著差异的错误结论EXCEL软件T检验过程：选中fx →T TEST→显示填写框：n Array 1 B2:B11 nArray 2 C2:C11 nTails 2 nType 3 nTails 用于定。