小动物疾病的临床研究与诊疗.ppt

小动物临床微生物学研究林德贵中国农业大学动物医学院临床医学系北京 100094我们已经完成的工作w 北京地区犬四季、不同季节被毛与皮肤细菌分 布和种类的调查分析 w 脓皮症犬主要致病细菌的种类和药敏试验 w 犬顽固性脓皮症主要致病菌的种类和药敏试验 w 犬口腔微生物区系的调查（食物不同） w 猫口腔微生物区系的调查（食物不同） w 犬肠道微生物区系调查与研究 w 抗生素诱导犬肠炎的微生物区系变化研究我们已经完成的工作w 犬猫膀胱炎症的微生物调查（临床病例） w 犬猫耳道微生物分布与耳病主要致病细菌与真 菌的研究 w 犬子宫蓄脓病例的主要致病菌分析（需氧菌和 厌氧菌） w 某些药物对犬皮肤细菌性感染的研究皮肤细菌学研究的意义w 知道皮肤不同部位主要的致病细菌情况 w 了解敏感药物 w 指导临床上顽固性脓皮症的治疗 w 明确不同抗生素的使用顺序和替代基本原则 w 正确使用敏感药物（剂量、时间、梯队）犬的子宫蓄脓子宫内膜电镜扫描涂片对照 健康犬 犬子宫内容物细菌培养 及药敏试验子宫内容物细菌培养及药敏试验细细菌种类类菌株数（% ）培养条件埃希氏大肠肠杆菌（Escherichia coli） 肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae） 铜绿铜绿 假单单胞菌（Pseudonas aeruginosa） 奇异变变形杆菌（Proteus mirabilis） 克吕吕沃尔氏菌（(Kluyvera） 拟拟杆菌(bacteroid) 杨杨格枸橼橼酸杆菌 (Citrobacter.youngae) 产产气荚荚膜杆菌(Bacillus welchii)总计总计28（60.87） 5（10.87） 4（8.70） 3（6.52） 2（4.35） 2（4.35） 1（2.18） 1（2.18）46兼性厌厌氧 兼性厌厌氧 兼性需氧 兼性厌厌氧 兼性厌厌氧 专专性厌厌氧 兼性厌厌氧 专专性厌厌氧埃希氏大肠杆菌的药敏试验结果敏感中度敏感耐药敏感菌株（%）株（%）株（%）株（%）氨苄西林（AM）14（50.0）5（17.86）9（32.14） 19（67.86）羧苄西林（CB）3（10.71）7（25.0）18（64.29） 10（35.71）阿莫西林/克拉维酸 （AMX /CA） 头孢噻 吩（CF）13（46.43） 20（71.43）9（32.14） 5（17.86）6（21.43） 3（10.71）22（78.57） 25（89.29）头孢呋 辛钠（CXM ）20（71.43）4（14.29）4（14.29）24（85.71）头孢噻肟 （CTX） 氨曲南（AZT）13（46.43） 19（67.86）8（28.57） 6（21.43）7（25.0） 3（10.71）21（75.0） 25（89.29）庆大霉素（GM）22（78.57）2（7.14）4（14.29） 24（85.71）阿米卡星(AN) 四环素(TE)22（78.57） 12（42.86）6（21.43） 2（7.14）－ 14（50.0）28（100） 14（50.0）诺氟沙星(NOR)20（71.43）2（7.14）6（21.43） 22（78.57）复方新诺明(SXT)16（57.14）1（3.57）11（39.29）17（60.71）氯霉素(C)20（71.43）2（7.14）6（21.43）22（78.57）呋喃妥因(FT)22（78.57）2（7.14）4（14.29）24（85.71）磺胺（SMX）15（53.57）6（21.43）7（25.0）21（75.0）埃希氏大肠杆菌的药物敏感试验结果w 从表上可以看出埃希氏大肠杆菌对头孢噻肟和磺胺敏 感率为75.0%； w 对氯霉素、诺氟沙星和阿莫西林/克拉维酸的敏感率为 78.57%； w 对头孢噻吩（89.29%）、头孢呋辛钠（85.71%）、 氨曲南（89.29%）、庆大霉素（85.21%）和呋喃妥 因(85.71%)的敏感率超过了85.0%； w 对阿米卡星敏感率则达到了100%。

犬子宫蓄脓的治疗w 是治疗败血症！ w 抗生素：阿米卡星，洛美沙星，头孢噻 吩 w 犬球蛋白（世纪元亨公司的质量与信誉 ） w 高效重组干扰素 w 静脉输液猫牙病与口腔微生物的种类调研与药敏实验w 对照组：正常猫的口腔微生物（真菌和细菌）种类 的调查； w 试验组：患牙结石病的猫口腔粘膜、牙结石表面和 齿龈沟的微生物（真菌和细菌）种类的调查与药敏 试验结果； w 试验组又分成以猫粮为主要食物组、猫粮＋人的食 品组和家庭自制食品组 w 实验动物：对照组的猫是来动物医院接种疫苗、体 检的健康猫，无眼观牙病者； w 试验组的猫为牙结石病患犬，以齿龈炎症为主试验方法w 将猫的口腔分成左右两部分，随机采取 左侧或右侧口腔中的样本每只猫采4个 样本，用无菌牙科刮匙分别轻轻刮取上 颌的犬齿、第三前臼齿，下颌的犬齿和 第一臼齿的齿面及齿龈沟，将刮取物溶 解在盛有0.5ml灭菌生理盐水的试管中， 振荡1min，制成标本液口腔细菌的分离培养结果w 无论是口腔环境正常的还是异常的猫，都可以分离出 巴氏杆菌，并且该菌的数量比较大 w 对于口腔环境正常的猫来说，分离到的需氧或兼性厌 氧菌主要是巴氏杆菌、葡萄球菌、弧菌、棒状杆菌和 非发酵菌； w 厌氧菌主要是拟杆菌、普雷沃菌、梭杆菌、丙酸杆菌 、双歧杆菌。

w 对于口腔环境异常的猫来说，分离到的需要或兼性厌 氧菌主要是巴氏杆菌、弧菌和中间型葡萄球菌，而厌 氧菌主要是拟杆菌、丙酸杆菌、韦荣菌和梭杆菌真菌鉴定结果w 对于口腔环境正常的猫来说，真菌生长较少， 主要是念珠菌（白色念珠菌、克柔念珠菌和热 带念珠菌）， w 偶尔也会分离到外瓶霉； w 而对于口腔环境异常从猫来说，真菌生长比较 旺盛，可分离到大量的念珠菌，外瓶霉比较常 见不同日粮成分对犬口腔微生 态影响的调查研究w 有统计表明：年龄在4岁以上的犬有85％以上患有牙周疾病w 即使犬的牙齿看起来是正常的，沿齿龈也会有细菌的存在和增 殖，然后包裹牙齿的牙龈将逐渐退向牙周，从而为细菌的生长 提供更多的空间，同时细菌开始向牙根和颚部蔓延 w 更为严重的是细菌有可能通过口腔和牙龈组织进入血液，并且 感染肺部、心脏、肾脏、肝脏甚至神经系统 w 国内外部分专家学者提出犬口腔微生物环境的改变与其日粮成 分有着密切的关系，并进行了相关的调查与研究 w 本试验系统地调查研究饲喂不同日粮时，犬口腔微生物的种类 及构成，并对口腔内发现的主要致病微生物进行药物敏感性实 验结果w 口腔环境正常的犬，分离出的革兰氏阳性无芽孢杆菌居多（如 ：白喉棒状杆菌、龋齿罗氏菌和产单核细胞李斯特菌等）；革 兰氏阳（阴）性球菌较少，个别样本甚至分离不到；厌氧菌以 革兰氏阳性杆菌为主（如：痤疮丙酸杆菌、青春双歧杆菌和迟 缓真杆菌等）； w 真菌生长较少，以白色念珠菌、克柔念珠菌和热带念珠菌为主 。

w 口腔环境异常的犬，可分离出大量的白喉棒状杆菌、条纹带棒 状杆菌、中间型葡萄球菌和金黄色葡萄球菌；厌氧菌十分单一 ，局限于丙酸杆菌属内；真菌生长旺盛，可分离出大量的白色 念珠菌 治疗处方w 选择敏感的抗生素： w 选择敏感的抗真菌药物： w 给予犬球蛋白北京地区犬细菌性皮肤病主要病原菌 （需氧与兼性厌氧）的分离鉴定与药敏试验w 从35例细菌性皮肤病患犬的皮肤损害处共分离出104株细菌 ，其中葡萄球菌株88株，微球菌10株，棒状杆菌5株，弧菌 1株，未分离出大肠杆菌、链球菌和绿脓假单胞菌等一些常见 病原菌 w 在88株葡萄球菌中，涉及葡萄球菌9种，主要是产色葡萄球 菌（46株，52.3%）和中间葡萄球菌（27株，30.7%） ，且捡出率也很高 w 过去认为有临床意义的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、中 间葡萄球菌和猪葡萄球菌仅有33株（37.5%） 药敏结果表明w 这些葡萄球菌对抗生素的敏感性依次为万古霉 素和苯唑西林 (94.3%)＞氯霉素（88.6％ ）＞环丙沙星、左氧氟沙星和恩诺沙星(82.9 ％)＞庆大霉素（70.5％），对红霉素 (53.4%)、克林霉素(40.9%)、青霉素 (29.5%)、四环素(22.7%)和复方新诺明 (18.2%)的耐药性已相当高。

w 此外，微球菌对红霉素和克林霉素、棒状杆菌 对氯霉素和哌拉西林也表现出极高的耐药性药物敏感性分析结果表明1，克林霉素的敏感率很低，可能与北京动物医院使用林 可霉素的频率大有关 2，以上情况表明，在本地区这些临床标本中分离出的葡 萄球菌属对上述五种药物的耐药性已相当高，加之有可 能多重耐药，给临床用药带来一些困难 3，此外，微球菌对红霉素和克林霉素、棒状杆菌对氯霉 素和哌拉西林也表现出来极高的耐药性 4，临床医生在经验用药时，应尽量避开耐药性已很高的 品种，选择敏感性高的抗生素，从而获得确切疗效对于犬顽固性的皮肤病顽顽固性的脓脓皮症顽顽固性真菌性皮肤病敏感的抗生素 （全身与局部外用）抗真菌药 （全身与局部外用）犬球蛋白犬球蛋白 专用的抗脓皮症香波专用抗真菌香波干扰素干扰素保肝药物单克隆抗体的概念单克隆抗体（Monoclonal Antibody, McAb）是指由一个Ｂ细胞分化增殖的子代细胞（浆细 胞）产生的针对单一抗原决定簇的抗体Kohler和Milstein于1975年建立了体外淋 巴细胞杂交瘤技术，1984年获得诺贝尔医学奖 单克隆抗体的制备单抗生产工艺的提高原来生产方式：小鼠腹水提取新型生产方式：生物工程培养• 产业化：扩大生产规模的前提 • 生物工程化：产品质量的控制 • 合法化：产品注册的技术保障 • 吸收好、起效快、副作用更小免疫制剂的种类预防性免疫制剂：疫苗、菌苗、类毒素等。

治疗性免疫制剂：单克隆抗体、免疫球蛋白、抗血清、细胞因子等诊断性免疫制剂：检测抗体或抗原的胶体金纸 条、ELISA试剂盒等免疫球蛋白制剂的发展-- IMIG的问题在Ig制剂制备早期，商品化的Ig仅为肌肉注射用 免疫球蛋白（IMIG）IMIG的局限性，主要表现在：（1）用量过小，即使多部位注射，总用量也有 限；（2）注射部位会有严重的疼痛反应；（3）进入循环前部分Ig会被酶降解，且起效较 慢静注用犬免疫球蛋白（IVIG）的特点（1）用量不受限制，静注无疼痛反应；（2）直接进入血液循环，不会被酶降解，起效迅速；（3）安全性好，病原因子均已灭活；（4）对多种疑难疾病均有确切疗效；（5）毒副作用少（极少的过敏反应）静注用犬免疫球蛋白的作用机理IVIG的作用机理非常复杂，其疗效与制品中含有各种特 异性免疫球蛋白分子密不可分靶细胞阻断作用－ 免疫调理作用－• 改变免疫复合物结构和可溶性 结合活化的补体成分• 增加自然杀伤细胞的数量与功能 改善IgG的新陈代谢率• 调节多种细胞因子的表达 中和自身免疫性抗体世纪元亨犬用IVIG的特点（1）纯度高、 具有体内IgG全部生理活性制品中IgG纯度高达99%以上，含少量IgA，不含IgM和IgE。

保持有完整的天然分子结构，具有体内IgG全部生理活性世纪元亨犬用IVIG的特点（2）安全性高、没有传播病原的危险犬 血 浆CDV检查 CPV检查 ICHV检查 Rabies检查 细菌检查 寄生虫检查病 原 灭 活低pH孵放、 巴氏灭活、 DV50纳米膜 过滤经经世纪元亨犬用IVIG的特点（3）w 质量稳定、长期存放不影响生物活性由于采用柱层析和加温处理，彻底去除了影响IgG稳定性的纤溶酶，使制品免遭降解，长期存放仍始终保持完整的生物分子结构世纪元亨犬用IVIG的适应症• 外科：手术后，大失血； • 重症感染：子宫蓄脓，败血症 • 血液病 • 肿瘤：良性与恶性肿瘤 • 自身免疫病：免疫缺陷 • 过敏性疾病： • 原发性IG缺乏或低下症世纪元亨犬用IVIG的适应症-外科临床适应症：烧伤、烫伤、断肢、器官损伤等严重创伤 ，各种。