5、Waters e2695高效液相色谱仪的确认方案.doc

W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪的确认方案的确认方案 QC-QR-FA003-QC-QR-FA003- 0000第第 1 页页 共共 7 页页1.1. 目的：目的：1.1 确认 Waters e2695 高效液相色谱仪的文件资料齐全，安装符合规定，安装环境满足运行要求1.2 确认 Waters e2695 高效液相色谱仪性能稳定，测试数据准确可靠1.3 制定 Waters e2695 高效液相色谱仪的维护保养、操作 SOP，确定对操作人员的培训内容2.2. 确认范围：确认范围：本方案适用于质量控制中心 Waters e2695 高效液相色谱仪的确认（包括安装确认、运行确认和性能确认） 3.3. 确认人员及其职责：确认人员及其职责：3.1 药化组组长：负责组织 Waters e2695 高效液相色谱仪确认方案、报告的起草，实施确认3.2 质量控制中心主任：参与确认方案、报告的起草，组织确认实施3.3 QC 化验员：参与确认方案、报告的起草，执行相应取样及检验3.4 工程部仪器员：参与确认方案、报告的起草，执行安装、运行和性能确认。

3.5 质量保证中心主任：负责确认方案、报告的审核，起草确认合格证书3.6 质量副总经理：负责确认方案、报告的批准，签发确认合格证书4. 仪器描述：仪器名称：高效液相色谱仪 仪器型号：Waters e2695生产厂家：美国沃特斯 出厂日期： 年 月公司编号：QC-xxx 安装位置：液相色谱室Waters e2695 主机（高精度四元梯度泵、自动进样器、柱温箱等）+ Water 2489 双通道紫外检测器+ Waters Chemstation 色谱管理软件用于对紫外有吸收的可溶性有机化合物、生物化合物等样品的定性、定量分析，给出可靠数据●Waters e2695 四元梯度输液泵主要技术参数：1)工作模式：相互独立、电子控制的双柱塞直线驱动装置，双压力传感器反馈回路，无需混合器和阻尼器2)溶剂数：1～43)流速范围：0.010～10.000ml/min, 以 0.001ml/min 为增量W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪的确认方案的确认方案 QC-QR-FA003-QC-QR-FA003- 0000第第 2 页页 共共 7 页页4)流速精度：RSD≤0.075%5)流速准确度：±1.0%6)延迟体积：0.999 9)进样针清洗：针内外每次进样后通过专用流路自动清洗●Water 2489 双通道紫外检测器紫外检测器：1)波长、极性和灯源开关均可时间编程控制2)内置硝酸铒滤光片，紫外光、可见光都可以校正。

3)可变波长范围：190～700nm4)检测通道：2 个5)光源：氘灯6)波长准确度：±1nm7)带宽：5nmW Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪的确认方案的确认方案 QC-QR-FA003-QC-QR-FA003- 0000第第 3 页页 共共 7 页页8)测量范围：0.0001～4.0000AUFS9)基线噪音：±0.25x10-5AU，230nm，10Hz，1.0s10)漂移：1 x 10-4 AU/hour，254nm 在 1mL/min（甲醇）11)梯形狭缝的光路设计，从硬件上消除示差折光效应12)具有操作面板，可以独立设定工作参数、显示运行状态5.5. 确认进度安排确认进度安排5.1 安装确认：2012 年 9 月 21 日～2012 年 9 月 23 日5.2 运行确认：2012 年 9 月 22 日～2012 年 9 月 24 日5.3 性能确认：2012 年 9 月 22 日～2012 年 9 月 24 日6.6. 确认内容：确认内容：6.16.1 安装确认安装确认(IQ)(IQ)Waters e2695 高效液相色谱仪的安装确认包括：仪器包装及开箱检查、安装条件检查和开机显示，检查内容、检查方法和接受标准详见表 1。

表表 1 1：：W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪安装确认安装确认(IQ)(IQ)检查检查检查项目参考文件检查内容接受标准仪器包装及开箱检查合同清单发货单仪器的外包装；仪器主机及其配件；操作手册、图纸、软件、仪器出厂合格证仪器的外包装无破损；仪器主机及其配件的型号、品牌与参考文件一致；操作手册、图纸、软件、仪器出厂合格证明齐备电脑配置检查电脑系统信息CPU、系统、硬盘内存CPU:酷睿 1.66GHz；系统：Windows XP；硬盘内存≥ 40G安装条件检查操作手册图纸仪器所处的房间环境；试验台水平度；电源电缆连接情况温度：20℃～30℃；试验台水平测试合格；电源电缆连接正常，动力参数（电压、频率）符合仪器要求HPLC 控制系统操作手册操作权限操作员仅能进行本级权限的操作；W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪的确认方案的确认方案 QC-QR-FA003-QC-QR-FA003- 0000第第 4 页页 共共 7 页页管理员方可进入方法创建、修改画面。

开机显示操作手册开机指示开机指示灯亮，自动进入工作界面维修服务购销合同维修单位名称、地址、联系人、、维修单位名称、地址、联系人、、齐全6.26.2 运行确认（运行确认（OQOQ））在不使用试样的条件下，确认 Waters e2695 高效液相色谱仪能在操作极限内能正常运转，达到设计标准和用户需求Waters e2695 高效液相色谱仪的运行确认包括：仪器的操作测试和校准，测试内容、测试方法和接受标准详见表 2表表 2 2：：W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪运行确认（运行确认（OQOQ）测试）测试测试内容测试方法接受标准泵流量准确度和精密度分别测量流量在 0.5ml/min、1.0ml/min 和1.50ml/min 的准确度和精密度以水为流动相，待压力稳定后，在流动相出口处用称重过的25ml 容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集 5 分钟流出的流动相，精密称定，每个流速测定 5 次，记录测试温度泵流量的准确度（相对偏差）不得超过设定流量的 5%；泵流量的精密度（RSD）不得超过 0.5%梯度准确度(A/B 通道)按表 3 设置的梯度洗脱程序，以两通道代替色谱柱连接管路，先用超纯水冲洗系统，待基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。

测定三次，取各梯度级高度的平均值，由曲线图测量 100%B（C）梯度级平均高度计算各梯级实际体积%，每个梯级的理论体积%和实际体积%之差即为梯度准确度，以最大差值为梯度准确度误差梯度相对偏差不得超过±2%柱温箱温度准确度和温度稳定性分别设定柱温温度计为 25℃和 40℃，将一标准温度测试仪放入柱温箱，每 30min 读取测试仪及工作面板显示的温度一次，共读 5 次标准温度测试仪显示的柱温箱温度不超过设定值±1℃；工作面板显示的柱温箱温度与标准温度测试仪测定的温度不超过±2℃W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪的确认方案的确认方案 QC-QR-FA003-QC-QR-FA003- 0000第第 5 页页 共共 7 页页紫外-可见光检测器波长准确度以 10%高氯酸溶液为溶剂，配制含氧化钬 4%的溶液将该溶液以手动方式注入流通池，扫描全波长范围内的光谱图该溶液的吸收峰波长为 241.13nm/278.10nm/287.18nm/333.44nm/485.29/536.64/640.52nm仪器波长的允许误差为：紫外区±1nm，500nm 附近±2nm。

基线噪音和基线漂移C18 色谱柱，检测波长 254nm，流动相为甲醇，流速为 1.0ml/min，待柱平衡稳定后，进行基线的测试，测试时间一小时，观察并记录测试结果基线噪音:不超过 5×10-5 AU基线漂移：不超过 5×10-3 AU/h进样精密度取穿琥宁含量测定项下的对照品溶液(0.1mg/ml)，连续进样 5 次峰面积相对标准偏差不得超过2.0%检测器线性取穿琥宁含量测定项下的对照品溶液（60、80、100、120、140）µg/ml，5 个浓度对照品置于不同进样瓶中，分别进样，记录色谱图，求样品浓度与峰面积的相关系数相关系数不得低于 0.99人员培训培训日期培训内容参加人员Waters ee2695 高效液相色谱仪操作、校准与维护培训文件文件类型文件编号接受标准标准操作规程SOP-QC-在确认过程中准备，仪器使用前被批准校准与维护操作规程SOP-QC-在确认过程中准备，仪器使用前被批准表表 3.3. 梯度洗脱表梯度洗脱表时间A 通道（C 通道）：超纯水B 通道（D 通道）：0.3%甲醇水溶液0.00min100%0%3.00min100%0%6.00min0%100%9.00min0%100%9.01min20%80%12.00min20%80%12.01min40%60%W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪仪的确认方案的确认方案 QC-QR-FA003-QC-QR-FA003- 0000第第 6 页页 共共 7 页页15.00min40%60%15.01min60%40%18.00min60%40%18.01min80%20%21.00min80%20%21.01min100%0%24min100%0%6.36.3 性能确认（性能确认（PQPQ）） 6.3.1 色谱条件：流动相：0.05%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节 pH 值至 2.5±0.05）-甲醇（3：7） 色谱柱：C18 色谱柱 检测波长：251nm进样量：10µl 流速：1.0ml/min对照品：脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品内标物：4-羟基苯甲酸乙酯溶液6.3.2 系统适用性试验 分别量取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品溶液(1mg/ml)和 4-羟基苯甲酸乙酯溶液(1mg/ml)各 5ml，置 50ml 量瓶中，加流动相至刻度，进样量10µl，记录色谱图。

●理论板数：按脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯峰计算不低于 3000●分离度(R)：大于 1.5●拖尾因子(T)：在 0.95～1.05 之间●重复性：取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品溶液(0.1mg/ml)，进样量 10µl，连续进样 5 次，记录色谱图，其峰面积相对标准偏差(RSD)不得超过 2.0%7.7. 人员培训和人员培训和 SOPSOP 的制定的制定7.17.1 人员培训人员培训7.1.1 仪器供应商现场进行 Waters e2695 高效液相色谱仪操作培训7.1.2 仪器供应商现场进行 Waters e2695 高效液相色谱仪校准与维护培训7.27.2 SOPSOP 的制定的制定7.2.1 在确认过程中准备 Waters e2695 高效液相色谱仪标准操作规程，并在仪器使用前被批准W Wa at te er rs s e e2 26 69 95 5 高高效效液液相相色色谱谱仪。