口气中挥发性硫化物的研究.pdf

南京医科大学硕士学位论文口气中挥发性硫化物的研究姓名：曹灵申请学位级别：硕士专业：口腔内科学指导教师：俞未一20030420南京医科大学硕士学住论文口气中挥发性硫化物的研究南京医科大学口腔医学院口腔内科学研究生曹灵导师俞未一教授中文摘要( 口气异常，最初引起人们注意是由于其在社交方面的不利影响与人交谈时，从1 2 腔中呼出的异味，常常引起交谈者的不快，甚至家人的反感，妨碍社交，导致生活质量的下降，甚至引起精神心理性疾病而且，口气异常的产生还与牙周病等口腔疾病的发生发展密切相关导致1 2 气异常的主要气体一挥发性硫化物( V o l a t i l es u l p h u rc o m p o u n d s ，V S C s ) 中含有对人体有害的成份，比如甲硫醇( C H 3 S H )和硫化氢( H ：S ) ，可能引发口腔疾病或促进疾病的发展．、L本研究采用气相色谱技术对挥发性硫化物中的主要成份进行了定性定量检测，分析其与牙周相关指标的相关性，探讨挥发性硫化物与牙周病的关系；比较了1 ：2 气检测中气相色谱法与1 ：2 气测量仪( H a l i m e t e r ) 法之间的相关性，为异常口气的科研和临床检测提供了科学的依据；同时，进行了硫酸锌漱口液治疗1 2 气异常的，临床实验。

／ ( 一、异常口气中挥发性硫化物的气相色谱分析研究【材料和方法l 随机选择南京医科大学附属1 ：2 腔医学院口气门诊就诊患者5 0 人( 平均年龄3 7 岁，男性2 3 人，女性2 7 人) 纳入标准：使 用口气测量仪( H a l i m e t e r ) 检测口气值( 挥发性硫化物浓度) ≥2 0 0×1 0 3m l ／m 3 ，无明显耳鼻咽喉、消化系统、呼吸系统以及其他全身系统性疾病排除非口源性因素引起口气异常者、患有粘膜病者、实验前1 个月内使用抗生素者及不能认真配合实验，依从性差者嘱患者检测前2 4 小时内不使用芳香性饮料、化妆品及其他漱口水，不食用大蒜、韭菜、萝卜等含硫较高食物检查时间为：上午8 ：0 0 ～9 ：0 0 ，晨起不刷牙、漱口、进食采用带有脉冲式火焰光度检测器的气相色南京医科大学硕士学位论文谱仪对1 3 气中挥发性硫化物的主要成份：硫化氢( H 2 S ) 和甲硫醇 ( C H 3 S H ) ，进行了定性定量分析色谱柱检测条件：柱温5 0 ℃，载气( N 2 ) 流速2 m l ／m i n ，燃气( H 2 ) 流速1 4m l ／m i n ，空气流速( 1 )1 7m l ／m i n ，空气流速( 2 ) 1 0m l ／m i n 。

口气采样结束后，检查记录患者口腔中牙周袋深度( p o c k e td e e p ，P D ) 、龈沟出血指数( s u l c u sb l e e d i n gi n d e x ，S B I ) 等牙周相关指标最后，将口气相关指标与牙周相关指标作统计学的相关性分析结果】经检测C H 3 S H 的浓度为3 ．4 1 4 ±3 ．4 2 1m g ／m 3 ，H 2 S 的浓度为1 ．5 5 8 ±0 ．5 0 6m g ／m 3 ，总的硫化物的浓度为3 ．7 4 3 ±2 ．6 8 4m g ／m 3 硫化 氢、甲硫醇以及总的硫化物的浓度随着牙周袋深度的增加和龈沟出血指数的增加而增加，同时甲硫醇乖硫化氢的浓度比值也随之增加二、口气检测中气相色谱法和H a l i m e t e r 法的比较【材料和方法】根据相关标准选择口气异常患者5 0 人首先，使用口气测量仪H a l i m e t e r 检测记录每位患者的口气值，使用前先用空气调零，嘱受试者闭口三分钟后测量，将H a l i m e t e r 的采气管插入口腔内约4 c m ，记录挥发性硫化物浓度峰值，重复检测3 次，取均值。

然后，采用带有脉冲式火焰光度检测器的气相色谱仪，对口气中挥发性硫化物的主要成份：硫化氢和甲硫醇的浓度，将甲硫醇和硫化氢中含硫量换算成总的硫化物浓度将两种口气检测方法的结果作相关性分析结果1S p e a r m a n 相关系数为r = 0 ．9 8 8 ，P o ．0 5 ) ，具有可比性；②漱口后o h 时三组挥发性硫化物浓度均有所下降，硫酸锌组与蒸馏水组差异显著( P O ．0 5 ) ；③漱口后1 、2 、3 h 时，，硫酸锌组挥发性硫化物浓度明显低于其他两组( P 2 0 0X1 0 m l ／m 3 ，无明显耳鼻咽喉、消化系统、呼吸系统以及其他全身系统性疾病排除非口源性因素引起口气异常者、患有粘膜病者、实验前1 月内使用抗生素者及不能认真配合实验，依从性差者【4 】2 ．仪器和试剂2 ．1 气相色谱检测系统( 如图1 所示)色谱仪：美国瓦里安( V A R I A N ) 公司，型号：C P ．3 8 0 0 检测器：脉冲式火焰光度检测器( P F P D ) ，色谱柱：石英毛细柱，美国惠普公司，型号：H P ．5 ，柱长3 0 m ，直径0 ．3 2 “m ，膜厚1 ．2 “m 。

南京医科大学硕士学位论又图】V A R ／A N 气相色谱仪2 ．2 标准气体：H 2 S 标准气体和C H 3 S H 标准气体均由苏碳气体科技公司提供 3 方法嘱患者检测前2 4 小时内不使用用芳香性饮料、化妆品及其他漱口水，不食用大蒜、韭菜、萝r 等舍硫较高食物复诊时间为：上午8 ：0 0 ～9 ：0 0 ，晨起不刷牙、漱口、进食使用气相色谱仪检测分析患者口气中H 2 S 和C H 3 S H 的浓度检测条件：柱温5 0 ℃，气化室温度15 0 ℃，检测室温度2 0 0 * ( 2 ，载气( N ：)流速2 m l ／m i n ，燃气( H ，) 流速1 4 m l ／m i n ，空气流速( 1 ) 1 7 m l ／m i n ，空气流速( 2 ) 10m l ／m i n 嘱受试者闭口用鼻呼吸3 r a i n ，将气密性注射器插入口腔中，并保持闭口状态，抽取1 5 m l 口气，关闭阀门，取出注射器，将1 0 m l 口气注入气相色谱仪进样口，进行气相色谱分析因为气体的浓度与色谱图中的峰面积成正比，所以检测已知浓度的标准气体的峰面积后，根据公式：样品浓度／样品峰面积= 标准气体浓度／标准气体峰面积，以及标准气体的峰的位置，可对口气组份进行定性定量分析。

南京医科大学硕士学位论文口气采样结束后，检查记录受试者口腔牙周相关临床指标( 选用6 个R a m f j o r d 指数牙) ：( 1 ) 牙周袋深度( p o c k e td e e p ，P D ) ：每牙探诊近颊、颊、远颊、近舌、舌、远舌6 个点，求平均值；( 2 ) 龈沟出血指数( s u l c u sb l e e d i n gi n d e x ，S B I ) ：参照M a z z a1 9 8 1 年提出的标准4 ．统计学分析实验结果采用S P S S l 0 ．0 统计软件进行处理分析结果经检测甲硫醇在3 ．2 3 4 m i n 位置处出峰，其浓度为3 ．4 1 4 ±3 ．4 2 1m g ／m 3 ，硫化氢在1 ．9 8 l m i n 位置处出峰，其浓度为1 ．5 5 8 ±o ．5 0 6m g ／m 3 ，如下图所示根据甲硫醇和硫化氢的合硫量，将甲硫醇和硫化氢浓度换算成总的硫化物浓度为3 ．7 4 3 ±2 ．6 8 4m g ／m 3检测结果的相关性分析如表1 ( 相关系数为S p e a r m a n 相关系数)南京医科大学硕士学位论文表1口气指标与牙周指标的相关系数总的硫化物浓甲硫醇／硫化 甲硫醇浓度硫化氢浓度 度氢浓度比值牙周袋深度0 ．88 40 ．7 4 50 ．9 4 20 ．18龈沟出血指数0 ．9 870 ．82 20 ．99 10 ．9 45P 值为O ．0 0 0 ，显著性正相关挥发性硫化物的浓度随着龈沟出血指数增加的变化情况如表2 和图2 所示表2V S Cs 浓度与龈沟出血指数的关系甲硫醇浓度硫化氢浓度总的硫化物浓甲硫醇／硫化龈沟出血指数( m g ／m ，)(／m ' )一( m g m g ／m／j r ．．m g ／，m ，)氢浓度比值tJ，虱琳厘儿但0 ．189 ±0 ．3 270 ．8 12 ±0 ．4 550 ．8 9 0 ±0 ．5730 ．174 ±0 ．30 10 ．7 1 1 ±0 ．3 471 ．10 0 ±0 ．28 11 ．5 0 9 ±0 ．26 40 ．7 2 1 ±0 ．3 881 ．3 13 ±0 ．3 631 ．53 0 ±0 ．1 4 22 ．3 15 ±0 ．2800 ．8 6 4 ±0 ．2 4842 ．753 ±0 ．8 0 31 ．50 8 ±0 ．19 43 ．2 5 4 ±0 ．6 2 21 ．83 1 ±0 ．4787 ．59 9 ±3 ．3 2 02 ．0 75 ±0 ．4597 ．0 1 9 ±2 ．5503 ．6 25 ±1 ．13 53南京医科大学硕士学位论文图2V S C s 浓度与龈沟出血指数的关系龈沟出血指数挥发性硫化物的浓度随着牙周深度增加的变化情况如表3 和图3所示。

表3V S C s 浓度与牙周袋深度的关系0 ．6 9 7 ±0 ．46 61 ．1 6 8 ±0 ．3 9 61 ．5 6 4 ±0 ．57 50 ．5 9 4 ±0 ．40 91 ．4 9 4 ±0 ．7 161 ．3 4 7 ±0 ．2532 ．2 6 3 ±0 ．6 0 21 ．1 0 9 ±0 ．4 974 ．2 9 6 ±1 ．65 81 ．7 2 4 ±0 ．3 054 ．4 8 7 ±1 ．3 262 ．4 5 3 ±0 ．69 27 ．2 9 6 ±2 ．59 12 ．2 3 3 ±0 ．29 26 ．9 6 6 ±1 ．98 03 ．2 0 8 ±0 ．76 41 1 ．0 7 6 ±4 ．15 82 ．17 4 ±0 ．79 29 ．4 3 1 ±3 ．48 65 ．1 13 ±0 ．779423456南京医科大学硕士学位论文图3V S C s 浓度与牙周袋深度的关系牙周袋深度( h i m )讨论实验结果显示，随着牙周袋深度和龈沟出血指数的增加，挥发性硫化物浓度也增加，表明挥发性硫化物的产生与牙周组织炎症的发生发展有关，这也与临床上所观察到的牙周组织炎症的患者常伴有较明显口气异常的现象相符。

口腔中的挥发性硫化物是由口腔中的细菌( 主要是革兰氏阴性厌氧菌) 分解含硫氨基酸( 胱氨酸和蛋氨酸) 而产生的‘2 1 可以产生硫化物的细菌，如牙龈卟啉单胞菌( P o r p h y r o m o n a sg i n g i v a l i s ，P g ) 、福赛氏类杆菌( B a c t e r o i d e sf o r s y t h u s ，B f ) 、牙密螺旋 体( T r e p o n e m ad e n t i c o l a ，T d ) 等等，同时也是牙周疾病的致病菌【5 J 南京医科大学硕士学位论文在牙周袋这样相对封闭的微环境中，更有利于这些革兰氏阴性厌氧菌产硫而牙周病活动期所出现的牙龈出血，则为这些牙周致病菌提供了其生长所需的氯化铁血红素【6 ] 因而，随着牙周病的发展，牙周袋的加深以及牙龈出血情况的加重，挥发性硫化物的产生也增加同时，挥发性硫化物浓度的提高亦有可能促进牙周病的发展体外实验表明，挥发性硫化物可以增加口腔粘膜通透性，促进胶原分解，改变纤维粘连蛋白的正常结构，降低牙周膜细胞的胞内p H 值，刺激I L 一1 、P G E ，等炎症因子的产生等等【3 】【8 ~ 9 1 。

挥发性硫化物的这些病理作用促进了牙周组织疾病的发展因而，我们推断在挥发性硫化物的产生和牙周病的发展之间存在一种相互促进的关系，形成了一种恶性循环甲硫醇／硫化氢的浓度比值伴随牙周袋深度和龈沟。