专题二动物细胞工程答案.doc

动物细胞工程一.动物细胞工程常用的技术有动物细胞培养，动物细胞核移植,动物细胞融合,其中动物细胞培养是其他技术手段的基础二.1 •动物细胞培养的原理：细胞增殖2•取材：动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，原因是：这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强3•用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理相关组织,分散成单个动物细 胞4 •原代培养过程具有贴壁生长和接触抑制的特点5•培养条件：无菌无毒的环境,营养成分包括糖（葡萄糖），氨 基酸，促生长因子，无机盐，微量元素等，还需要加入血清, 血浆等一些天然成分和气体环境为95%空气加5% CO?CO?的 作用是维持培养液的PH所需要的PH是727・4 6•原代培养时细胞的层数是望层，原因是：当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖7•原代培养时是否会出现停止增殖的现象，Mo原因是：会出 现接触抑制现象，即当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增殖8•写出动物细胞培养的流程图课时练29页三.动物体细胞核移植技术1. 原理是：动物细胞核的全能性1=12. 去核的卵母细胞发育到主期时期，为什么选择该时期的卵母细胞，因为Mil中期卵母细胞体积大，易操作，含有促 使细胞核全能性表达的物质和营养条件。

3. 选择的供体细胞一般为10代以内的细胞，原因是:10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型4. 卵母细胞通过显微操作去核5. 生殖方式为无性生殖,克隆动物的性状体现核供体生物和提供卵母细胞生物两个亲本的性状,主要体现出核供体生物的 性状，原因是遗传物质主要存在于细胞核6. 广义的克隆包括三个层次，分别是：分子水平上的克隆，细胞水平上的克隆，个体水平上的克隆7. 写出动物体细胞核移植过程图：课时练30页四：动物细胞融合与单克隆抗体1.动物细胞融合植物体细胞杂交培养基成分及形态液体，除营养物质外,固体，除营养物质外一般还有血清，血浆还有植物激素等细胞应用的原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性，细胞的全能性细胞融合前提用胰蛋白酶或胶原蛋用纤维素酶，果胶酶白酶分散为单个细胞去除细胞壁后诱导原生质体融合诱导手段离心，振动，电激,离心，振动，电激,聚乙二醇，还可用灭聚乙二醇活的病毒诱导结果获得杂种细胞，以生获得杂种植株产细胞产品用途及意义制备单克隆抗体，病克服远缘杂交不亲和毒疫苗，干扰素等的障碍，扩大杂交亲本范围，培育新品种写出动物细胞融合的基本过程具有不同遗传信息的两个或多个细胞 灭活的病毒，PEG,电激髦 杂交细胞。

2 •单克隆抗体的制备第一次筛选第二次筛选筛选原因去除具有未融合的亲 本细胞和融合的具有 同种核的细胞去除不能产生所需抗体的杂交瘤细胞筛选方法选择培养基抗体检测筛选目的获得杂交瘤细胞筛选出能产生专一性抗体的杂交瘤细胞1）什么是克隆化培养指单细胞培养技术，使之无性繁殖获得克隆细胞株的方法2）单克隆抗体的用途及特点:特点：特异性强，灵敏度高，并可以大量制备1. 作为诊断试剂：最广泛的用途，具有准确，高效，简易，快速的优点2. 利用同位素标记的单克隆抗体，在特定组织中成像的技术，可 定位诊断肿瘤，心血管畸形等疾病3. 用于治疗疾病和运载药物：如抗癌细胞的单克隆抗体和放射性同位素，化学药物或细胞毒素相结合，制成生物导弹，定向杀 死癌细胞3）筛选出杂交瘤细胞后，常用的培养方法是体外培养和体内培养,如注射到小鼠腹腔内4)筛选出的杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专的抗体5）写出单克隆抗体制备的基本过程：课时练33页。