超声提取小檗碱及其薄层扫描分析.docx

实验八 超声波辅助提取药用植物小檗碱及其薄层扫描分析背景知识小檗碱，英文名Berberine，中文名黄连素，一种常见的异喹啉生物碱，分子式C20H18N04,结构如下：小檗碱为一种季铵生物碱，熔点145°C，溶于水，难溶于苯、乙醚和氯仿, 从乙醚中可析出黄色针状晶体，其盐类在水中的溶解度都比较小，例如盐酸盐为 1 : 500，硫酸盐为1:30它存在于小檗科等四个科十个属的许多植物中，是黄 连、黄柏、功劳木、三颗针等中药材中的主要有效成分, 具有清热解毒、抗菌消 炎的功效在多数含以上药味中药制剂的质量标准中, 盐酸小檗碱常被选作含量 控制指标,其含量测定对于控制制剂质量、开发药源、合理用药等均具有重要意 义一、 实验目的1. 掌握生物碱提取方法2. 掌握生物碱薄层层析技术特点3. 了解薄层扫描技术定性、定量分析功能在天然产物成分分析中的应用二、 实验原理小檗碱为季胺碱，有较大极性，本实验根据其结构性质，采用酸性醇溶液提 取，在大极性展开剂中层析，薄层扫描测定三、实验材料与仪器小檗科药材， 1： 100盐酸：甲醇溶液、蒸馏水、碘化铋钾溶液、超声波 清洗仪，药材粉碎机、薄层扫描仪，移液管、烧杯（500ml）、量筒（lOOlml）、 三角烧瓶（250ml x2）、比色管（25ml）、圆底烧瓶，玻璃棒、薄层板（2.5x7.5cm, 碱性硅胶G板）。

四、实验内容洗净实验器皿、烘干一） 总碱提取称取0.10 g药粉，置于25m 1离心管中，加入1： 100盐酸：甲醇溶液25ml，在超 声波清洗仪中提取30min,放冷，用甲醇补足减失的重量，摇均，使用前在离心 机中离心沉降（3000prm, 3min,注意离心前要取下玻塞沉降，取清液备 用二） 总碱成分群整体特性测定2.1 对照品溶液的配制：精密称取小檗碱对照品适量，加甲醇制成 1 mg/mL 的溶液，作为对照品溶液2.2 展开剂配比：正丁醇：冰醋酸：水 7 ： 1： 2 2.3上样：用微量注射器取样品溶液5卩1，同时取对照品溶液5卩1，点在 硅胶G薄层层析板上（2.5x7.5cm），点样后的薄层板挥干溶剂，置干燥器中放置 片刻2.4 展层：将层析板放入已盛有展开剂的层析缸中展开；展开剂组成见2.2， 取出层析板，晾干2.6 显色：喷碘化铋钾溶液显色，室温下放置 0.5~1 小时2.7置于薄层扫描仪中扫描，扫描条件：双波长扫描，九s=525nm，,九R=650nm， 线性参数SX=7，狭缝=2.0mmx2.0mm，反射法锯齿形扫描，背景校正2.7.1 以小檗碱信号为参照物，设其相对比移值为1，计算各生物碱的相对 比移值：R二丄s ls式中： Rs 为相对比移值， l 为目标组分的迁移距离， ls 为参照组分的迁移距 ss离，2.7.2 以小檗碱信号为参照物，设其相对峰高比为 1，计算各生物碱的相对峰高比：式中：H为目标组分相对峰高比，h为参照物相对峰高比，h为目标组分峰5 5碘化铋钾显色剂配制：见附录生物碱显色剂 1五、思考题研究药用植物活性成分群整体特性有什么意义？参考文献:[1] 国家药典委员会，中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行） 2002 年4 月27 日。

[2] 李玉赜，刘永光薄层扫描法测定健胃胶囊中盐酸小檗碱含量辽宁中医学 院学报， 2004， 6 （4）， 337.。