T-紫外可见分光光度计应用案例--普析.docx

紫外可见分光光度计应用案例案例1.肉制品中亚硝酸盐的测定前处理方法：称取5g(精确至0.01g)制成匀浆的试样，置于50mL烧杯中，加12.5mL饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中，于沸水浴中加热15min取出置冷水浴中冷却，并放置至室温在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表1）：表1 测量参数测量波长（nm）538比色皿光程（cm）2检测界面（见图1）：图1 肉制品中亚硝酸盐的检测界面上图标准曲线中，亚硝酸钠标准系列的质量依次为：0.0μg、2.0μg、4.0μg、6.0μg、8.0μg、10.0μg、15.0μg、20.0μg、25.0μg （100mL容量瓶中）方法检出限：该方法检出限为1mg/kg，能够满足《GB 5009.33-2010 食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定 第二法 分光光度法》的检测要求。

参考标准：《GB 5009.33-2010 食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定 第二法 分光光度法》案例2.啤酒中甲醛的测定前处理方法：吸取已除去二氧化碳的样品25.00mL移入500mL蒸馏瓶中，加200g/L磷酸溶液20.00mL于蒸馏瓶，接水蒸气蒸馏装置中蒸馏，收集馏出液于100mL容量瓶中（约100mL），冷却后加水稀释至刻度检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表2）：表2 测量参数测量波长（nm）415比色皿光程（cm）1检测界面（见图2）：图2 啤酒中甲醛的检测界面上图标准曲线中，甲醛标准系列的质量依次为：0.0μg、0.5μg、1.0μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg、8.0μg（25mL比色管中）方法检出限：该方法检出限为0.8μg，能够满足《GB/T 5009.49-2008 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法 （4.4甲醛）》的检测要求参考标准：《GB/T 5009.49-2008 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法 （4.4甲醛）》案例3.食用植物油中过氧化值的测定前处理方法：精密称取约0.01g~1.0g试样（准确至刻度0.0001g）于10mL容量瓶内，加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。

检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表3）：表3 测量参数测量波长（nm）500比色皿光程（cm）1检测界面（见图3）：图3 食用植物油中过氧化值的检测界面上图标准曲线中，铁标准系列的质量依次为：0.0μg、2.0μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、30.0μg、40.0μg（10mL比色管中）方法检出限：该方法检出限为0.4μg，能够满足《GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法 （4.2过氧化值 第二法 比色法）》的检测要求参考标准：《GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法 （4.2过氧化值 第二法 比色法）》案例4.棉籽油中游离棉酚的测定前处理方法：称取1.000g（精确至0.001g）精制棉油，置于100mL具塞锥形瓶中，加入20.0mL丙酮（70%），并加入玻璃珠3粒~5粒，在电动振荡器上振荡30min，然后在冰箱中冷藏，放置过夜取此提取液之上清液过滤，滤液供测定用检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表4）：表4 测量参数测量波长（nm）378比色皿光程（cm）1（石英）检测界面（见图4）：图4 棉籽油中游离棉酚的检测界面上图标准曲线中，棉酚标准系列的质量依次为：0.0μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、40.0μg、80.0μg、120.0μg（10mL具塞比色管中）。

方法检出限：该方法检出限为0.3μg（当测定试样1.000g时，最低检出浓度为0.06mg/100g），能够满足《GB/T 5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》的检测要求参考标准：《GB/T 5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》案例5. 油脂中没食子酸丙酯的测定前处理方法：称取10.00g（精确至0.001g）试样，用100mL石油醚溶解，移入250mL分液漏斗中，加入20mL乙酸铵溶液（16.7g/L），振摇2min，静置分层，将水层放入125mL分液漏斗中（如乳化，连同乳化层一起放下），石油醚层再用20mL乙酸铵溶液重复提取两次，合并水层石油醚层再用水振摇洗涤两次，每次15mL，合并水层，振摇，静置将水层通过干燥滤纸滤入100mL容量瓶中，用少量水洗涤滤纸，加入2.5mL乙酸铵溶液（100g/L），加水至刻度，摇匀将此溶液用滤纸过滤，弃去20mL初滤液，收集滤液供测定检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表5）：表5 测量参数测量波长（nm）540比色皿光程（cm）1检测界面（见图5）：图5 油脂中没食子酸丙酯的检测界面上图标准曲线中，没食子酸丙酯标准系列的质量依次为：0μg、50μg、100μg、200μg、300μg、400μg、500μg（25mL具塞比色管中）。

方法检出限：该方法检出限为18.1μgPG测定试样相当于2g时，最低检出浓度为9.1mg/kg能够满足《GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定》的检测要求参考标准：《GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定》案例6. 果汁饮料中总磷的测定前处理方法：称取一定量经混合均匀的果汁样品5.00 g～10. 00 g于500 mL凯氏烧瓶中，加入2粒～3粒玻璃珠、10 mL～15 mL硝酸（分析纯）、5 mL硫酸（分析纯），浸泡约2h先用微火加热，待剧烈反应停止后，加大火力溶液开始变为棕色时，立即滴加硝酸（分析纯），直至溶液透明，颜色不再变深为止继续加热数分钟至浓白烟逸出，冷却，小心加入20 mL水，再加热至白烟逸出，冷却至室温将溶液转移到50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，备用检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表6）：表6 测量参数测量波长（nm）400比色皿光程（cm）1检测界面（见图6）： 图6 果汁饮料中总磷的检测界面上图标准曲线中，磷标准系列的质量依次为：0.0mg/L、2.0 mg/L、4.0 mg/L、6.0 mg/L、8.0 mg/L、10.0 mg/L（50mL容量瓶中）。

方法检出限：该方法检出限为0.1mg/L能够满足《GB/T 12143-2008饮料通用分析方法 （9.5.3总磷）》的检测要求参考标准：《GB/T 12143-2008饮料通用分析方法 （9.5.3总磷）》案例7. 茶饮料中茶多酚的测定前处理方法：称取均匀透明的样液1g~5g（精确至0.001g）于25mL容量瓶中，加水4mL、酒石酸亚铁溶液5mL，充分摇匀，用pH7.5磷酸缓冲溶液定容至刻度检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表7）：表7 测量参数测量波长（nm）540比色皿光程（cm）1检测界面（见图7）：图7 茶饮料中茶多酚的检测界面上图中，A1=0.9598，A2=0.0092结果计算：X = 式中：X——样品中茶多酚的含量（mg/kg）；A1——试液显色后的吸光度；A2——试液底色的吸光度；1.957——用10mm比色皿，当吸光度=0.50时，1mL茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg；K——稀释倍数；m——测定时称取试液的质量（g）参考标准：《GB/T 21733-2008茶饮料 （6.2.1 茶多酚）》案例8. 白砂糖色值的测定前处理方法：称取样品100.0g于200mL烧杯中，加入pH7.00的三乙醇胺-盐酸缓冲溶液135mL，搅拌至完全溶解。

倒入已预先铺好0.45m孔径微孔膜的过滤器中，在真空下抽滤，弃去最初50mL左右的滤液，收集滤液应不少于50mL检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表8）：表8 测量参数测量波长（nm）420比色皿光程（cm）5检测界面（见图8）：图8 白砂糖色值的检测界面上图中，A=0.1755结果计算：C = 式中：C ——色值，单位为国际糖色值单位（IU）；A ——在420nm波长测得样液的吸光度；b ——比色皿光程，单位为厘米（cm）；c ——样液浓度[由20℃的折光锤度乘上一系数（白砂糖0.9862，绵白糖0.9854），然后查表求得]，单位为克每毫升（g/mL）参考标准：《GB 317-2006白砂糖（4.7色值的测定）》案例9. 鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的测定前处理方法：准确称取均匀的样品2g~4g（精确至0.0001g），用少量0.01mol/L的盐酸溶液溶解并定容于100mL容量瓶中，混匀将此溶液用滤纸过滤，弃去初滤液20mL吸取滤液5.00mL于100mL容量瓶中，用0.01mol/L的盐酸溶液定容，混匀，此溶液即为测试液检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表9）：表9 测量参数测量波长（nm）250比色皿光程（cm）1（石英）检测界面（见图9）：图9 鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的检测界面上图中，A=0.6021。

结果计算：X = 式中：X——样品中呈味核苷酸二钠的含量（含7.25分子结晶水）（g/100g）；A——样品在波长250nm处的吸光度；m——样品质量（g）； 530——含7.25分子结晶水呈味核苷酸二钠的平均分子量；2000——样品的稀释倍数；11950——呈味核苷酸二钠的平均摩尔吸光系数参考标准：《SB/T 10371-2003 鸡精调味料（5.2.4呈味核苷酸二钠）》案例10. 食品中二氧化硫的测定前处理方法:称取适量（5~10g）粉碎混匀后的样品，浸泡提取生成稳定络合物后过滤，取适量滤液与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫色络合物，使用T9通过与标准系列比较定量检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司 T9型紫外可见分光光度计仪器条件: 具体参数见表1表1 仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长550nm比色皿光程10mm检测谱图（见图1）: 图1 标准曲线谱图上面谱图显示R=0.9999样品检出限：该方法检出限为0.001g/kg，能够满足GB 5009.34-2003的检测要求。

参考标准：GB 5009.34-2003案例11.食品中的氰。