中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法.doc

中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法一、通用显色剂（1）硫酸 ①浓硫酸与甲醇等体积小心混合，冷却；②15％浓硫酸的正丁醇溶液；③5％浓硫酸的乙酸酐溶液；④5％浓硫酸的乙醇溶液；⑤浓硫酸与乙酸等体积混合用以上任一试液喷薄层板后，于110℃烘烤15min，不同类的成分显不同颜色2）碘 ①0.5％碘的氯仿溶液；②碘蒸气 在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶，使缸为碘蒸气饱和将薄层板放入缸内数分钟即可显色，碘对很多化合物显黄棕色3）高锰酸钾-硫酸 高锰酸钾0.5g溶于15ml 40％硫酸中检测易还原性物质4）铬酸-硫酸 重铬酸钾5g溶于100ml 40％硫酸中易还原性物质显色5）荧光显色液 ①0.25％的罗丹明B乙醇溶液；②0.01％的荧光素乙醇溶液；③0.1％的桑色素乙醇溶液用以上任一试液喷薄层板后，在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点二、专属性显色剂（一）生物碱及含氮类化合物（1）改良碘化铋钾（Dragendorff）试剂 ①碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸与40ml水中；②碘化钾0.8g溶于20ml水中试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液用前将1ml贮备液、2ml冰醋酸与10ml水混合。

用于生物碱与某些含氮化合物，显橙红色2）碘-碘化钾（Wagner） 碘1g与碘化钾10g溶于50ml水（微温），加2ml乙酸，加水至100ml用于生物碱，显棕褐色3）碘铂酸 5ml 15％氯化铂溶液加45ml 10％碘化钾溶液，用水稀释至100ml用于生物碱，不同生物碱显不同颜色4）碘铂酸钾 10％六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合，加100ml 6％碘化钾溶液，混匀新鲜配制用于生物碱与其他有机含氮化合物，不同生物碱显不同颜色5）Ehrlich ①10％对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合②对二甲氨基苯甲醛1g，溶于100ml 96％乙醇中用于吲哚类，有时喷后要加热6）硫酸高铈铵 1％本品的85％磷酸溶液用于吲哚类，长春花生物碱显各种颜色7）对二甲氨基苯甲醛-硫酸 65ml浓硫酸与35ml水混合，放冷后加对二甲氨基苯甲醛125mg，再加入5％三氯化铁溶液0.05ml本试液可保存一周用于麦角生物碱8）肉桂醛-盐酸 肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml 36％盐酸混合，新鲜配制用于吲哚类衍生物9）呫吨氢醇 0.1g本品溶于90ml乙醇中，加10ml 36％的盐酸，用前新鲜配制。

用于色氨酸及其他吲哚类生物碱10）氯化铁-过氯酸 0.5mol/L三氯化铁溶液1ml与35％过氯酸溶液50ml混合用于吲哚类生物碱11）三氯化铁-碘 三氯化铁5g、碘2g溶于50ml丙酮与50ml 20％酒石酸的混合液中用于黄嘌呤生物碱类，不同生物碱显不同颜色12）硫酸铈-硫酸（改良Sonnenschein试剂） 硫酸铈0.1g混悬于4ml水中，加1g三氯乙酸，加热煮沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直至浑浊消失用于生物碱、含碘有机化合物的显色，喷后110℃烤几分钟，不同生物碱显不同颜色13）硫氰酸钴（Ⅱ）试液 硫氰酸铵3g、氯化钴1g溶于20ml水中用于生物碱，伯、仲、叔胺类14）碘化汞钾（Meyer）试剂 1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中，混合后加水稀释至100ml即可15）硅钨酸（Bertrand）试剂 5g硅钨酸溶于100ml水中，加盐酸少量调至pH＝2左右16）苦味酸试剂 1g苦味酸溶于100ml水中17）鞣酸试剂 鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml18）4-甲基伞形酮 0.02g本品溶于35ml乙醇，加水至100ml用于含氮杂环化合物19）硫酸铜-联苯胺 ①0.3g硫酸铜溶于100ml水-乙醇（5：4）的混合液中；②0.1％联苯胺的50％乙醇溶液。

用时先喷试液①，于60℃干燥后再喷试液②用于吡啶单羧酸的显色20）氯化铜 0.5％氯化铜溶液用于肟类21）硝普钠-铁氰化物 10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液、10％铁氰化钾溶液和水按（1：1：1：3）混合，冰箱内保存（可保存数周），使用前取适量与等体积丙酮混合用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的显色22）硝普钠-过氧化氢 5％硝普钠溶液2ml、10％氢氧化钠1ml与5ml 3％过氧化氢溶液混合后，加15ml水冰箱可保存数日用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的检测23）三氯化锑试剂 25g三氯化锑溶于75g氯仿中成饱和溶液用于秋水仙生物碱类二）黄酮类黄酮类化合物在紫外灯或日光下多显不同颜色，用氨薰、喷三氯化铝或氢氧化钠溶液等皆会使颜色加深或变色1）三氯化铝-乙醇试液 三氯化铝1g，加100ml乙醇溶解，即得用于含氧杂环化合物2）氢氧化钾（钠）试剂 10％氢氧化钾或氢氧化钠水溶液3）氨气4）三氯化锑试液 10％三氯化锑的氯仿溶液喷后110℃烤5min，用于黄酮类5）碱式（或中性）醋酸铅试剂 1％碱式醋酸铅（或饱和中性醋酸铅）水溶液用于黄酮类6）硫酸铜-枸椽酸钠 硫酸铜（CuSO4·5H2O）1.73g、柠檬酸钠17.3g与无水碳酸钠10g溶于水并稀释至100ml。

用于含邻二羟基的黄酮类与香豆精类7）硼氢化钾试剂 ①1％～2％硼氢化钾异丙醇溶液，必须新鲜配制；②浓盐酸先喷①溶液，5min后放入盐酸蒸气缸内用于双氢黄酮类化合物，显红、橙红色8）盐酸镁粉试剂 浓盐酸和镁粉9）醋酸镁试剂 2％醋酸镁甲醇溶液三）糖类（1）茴香醛-硫酸试剂 ①茴香醛0.5ml加入50ml乙酸，混匀后加1ml硫酸，用前新鲜配制②改良试液0.5ml茴香醛、9ml乙醇、0.5ml浓硫酸与0.1ml乙酸混合后立即使用用于糖类、甾族、萜类喷后将薄层板置100～105℃烤，不同糖显不同颜色2）α-萘酚-硫酸 15％的α-萘酚-乙醇溶液10.5ml、浓硫酸6.5ml、乙醇40.5ml与水4ml的混合液喷后100℃烤几分钟，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色用于糖类的显色3）苯胺-二苯胺-磷酸 4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85％磷酸共溶于200ml丙酮中喷后85℃烤10min，用于还原糖，不同糖显不同颜色4）对二甲氨基苯甲醛-乙酰丙酮① a.50％氢氧化钾溶液5ml与20ml乙醇混合；b.乙酰丙酮与正丁醇（1:100）的混合液两种溶液均需新鲜配制，临用前混合取a.混合液0.5ml，加入10ml b.溶液。

②对二甲氨基苯甲醛1g溶于30ml乙醇中，加30ml 36％盐酸，需要时用180ml正丁醇稀释使用时先喷试液①，于105℃加热5min，再喷试液②，于90℃干燥5min用于氨基糖类5）酚-硫酸试剂 酚3g、浓硫酸5ml溶于95ml乙醇中喷后110℃加热几分钟，糖显棕色6）1,3-二羟基萘酚-磷酸试剂 0.2％1,3-二羟基萘酚乙醇溶液100ml与85％磷酸100ml混匀喷后120℃加热5～10min，酮糖显红色，醛糖显淡蓝色7）邻氨基联苯-磷酸 邻氨基联苯0.3g溶于5ml 85％磷酸与95ml乙醇，即得用于糖类8）苯胺-磷酸 2mol/L苯胺的水饱和正丁醇溶液与0.67mol/L磷酸正丁醇溶液，按1:2（体积）混合用于糖类9）咔唑-硫酸 0.5g咔唑、5ml硫酸溶于95ml乙醇中用于糖类10）3,5-二氨基苯甲酸-磷酸试剂 3,5-二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于25ml 80％磷酸中，加水稀释到60ml喷后100℃加热15min，2-去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光11）苯胺-邻苯二甲酸试剂 0.93g苯胺、1.66g邻苯二甲酸溶于100ml水饱和的正丁醇溶液中。

喷后105～110℃加热10min，糖显红棕色12）百里酚-硫酸试剂 百里酚0.5g、硫酸5ml溶于95ml乙醇喷后120℃加热15～20min，多数糖在白色背影上显暗红色，继续加热则变成浅紫色13）萘雷锁辛-磷酸 0.2％萘雷锁辛乙醇溶液100ml与85％磷酸溶液10ml相混合用于糖类14）4-氨基马尿酸 0.3％的4-氨基马尿酸乙醇溶液用于还原糖15）酞酸苯胺 0.93g苯胺和1.66g酞酸溶于100ml水饱和的正丁醇中用于糖类16）硝普钠-偏高碘酸钠 ①2.5％偏高碘酸钠溶液；②7％硝普钠溶液、水与饱和的哌嗪乙醇溶液按照1：3：20比例混合使用时先喷试液①，室温干燥10min，再喷试液②用于脱氧糖17）偏高碘酸钠-联苯胺-硝酸银 ①0.1％偏高碘酸钠溶液；②联苯胺2.8g溶于80ml乙醇、70ml水、30ml丙酮与1.5ml 1mlo/L盐酸的混合液中；③20ml丙酮加1ml饱和硝酸银溶液，然后逐滴加水直至沉淀的硝酸银刚刚溶解使用时先喷试液①，干燥，再喷试液②，放入含25％氢氧化铵溶液的容器内5min后，取出轻轻喷试液③用于糖和含1,2二羟基多醇类18）联苯胺-三氯乙酸 0.5g联苯胺溶于10ml乙酸，加10ml 40％三氯乙酸水溶液，用乙醇稀释至100ml。

用于糖类19）蒽酮 0.3g蒽酮溶于10ml乙酸与20ml乙醇中，加入3ml 85％磷酸与1ml水置冰箱内保存用于酮糖20）氨性硝酸银试剂 1g硝酸银，加20ml水溶解，滴加适量的氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全溶为止，过滤用于糖类21）碱性酒石酸铜试剂 ①结晶硫酸铜6.23g，加100ml水；②酒石酸钾钠34.6g、氢氧化钠10g，加100ml水用时将试液①与试液②等量混合用于糖类22）呫吨氢醇冰醋酸（Xanthydrol）试剂 10mg呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸（含1％的盐酸）中用于α-去氧糖四）强心苷（1）3,5-二硝基苯甲酸（Kedde）试剂 2％ 3,5-二硝基苯甲酸的甲醇液与2mol/L氢氧化钾甲醇溶液或5％氢氧化钠乙醇液，用前等量混合强心苷显紫红色，几分钟后褪色2）三氯乙酸 ①25％三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液②三氯乙酸3.3g溶于10ml氯仿，加30％过氧化氢溶液1～2滴喷后110℃加热7～10min，紫外灯下观察荧光用于甾族、洋地黄苷与藜芦碱3）碱性三硝基苯试剂 ①间三硝基苯100ml溶于40ml二甲基甲酰胺溶液，加浓盐酸3～4滴，加水至100ml；②5％碳酸钠溶液。

使用时先喷试液①，再喷试液②，于90～100℃加热4～5min用于强心苷，在浅橙色背景上显橙红色4）硫酸-次氯酸盐 10ml 1mol/L硫酸与3ml次氯酸钠溶液（10％活性氯）混合用于洋地黄苷5）三氯化锑试剂 25％或饱和的三氯化锑氯仿溶液喷后100℃加热5min，在紫外灯或日光下观察五）蒽醌类蒽醌类化合物本身在日光下显黄色或橙黄色，在紫外光下则显黄、红、橙色荧光薄层展开后用氨熏或喷氢氧化钾（钠）碱溶液，则颜色变深或变色1）氢氧化钾试剂 10％氢氧化钾甲醇溶液2）氨气3）醋酸镁试剂 0.5％醋酸镁甲醇溶液，喷后100℃加热5min4）乙酸铝溶液 0.5％乙酸铝水溶液，喷后紫外灯下看荧光5）硼酸试剂 1％硼酸水溶液6）碱式醋酸铅试剂 1％碱式醋酸铅水溶液六）香豆素与酯类香豆素母体本身无荧光，但羟基香豆素在紫外光下常显亮蓝色荧光层析法检识常用以下显色剂。