农医发[2005]17兽药残留酶联免疫试剂盒备案审查技术资料要求.doc

农业部文件----农医发[2005]17号各省、自治区、直辖市兽医（畜牧、农牧、农业）厅（局、办）：　　根据《兽药管理条例》和《关于加强兽药残留检测试剂（盒）管理的通知》（农办医[2005] 3号），我部组织制定了《兽药残留酶联免疫试剂（盒）备案审查技术资料要求》和《兽药残留试剂（盒）备案参考评判标准》，现予发布，请各有关部门遵照执行此前发布的兽药残留检测试剂（盒）备案技术资料要求与本通知不符的，以本通知为准　　附件：1.兽药残留酶联免疫试剂（盒）备案审查技术资料要求　　　　　2.兽药残留酶联免疫试剂（盒）备案参考评判标准　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　二零零五年六月二十三日　　附件1：兽药残留酶联免疫试剂盒备案审查技术资料要求　　一、产品研制概况　　（一）立项依据和国内外研制概况　　（二）产品研制概况　　1、主要材料制备方法概述　　2、检测方法的建立　　3、样品提取方法的研究情况　　4、与理化方法的比较　　如无理化方法则选用代表性进口试剂盒比较　　（三）复核试验报告　　至少提供3个复核试验单位的报告（至少一家基准实验室）　　二、产品生产工艺　　1、生产过程　　2、工艺流程　　三、产品质量标准　　（一）质量标准　　1、物理性状描述　　2、灵敏度　　3、特异性　　阴性和具有参考意义浓度的阳性样品测定结果范围。

　　4、精密度　　选用标准曲线50%抑制浓度（IC50）附近浓度的标准溶液重复测定　　5、适用范围　　6、用法及结果判定　　7、注意事项　　8、贮藏条件和保质期　　9、规格　　（二）质量标准起草说明　　质量标准各项制定的依据　　四、产品稳定性试验　　2~8℃放置，分别于0、1、2、3个月测定，以后可根据保存期，每隔3个月测定1次　　推荐进行37℃加速和冻融的稳定性试验　　测定项目为0标准液的OD值、IC50、代表浓度的添加回收率，直到测定值　　超过允许范围为止　　五、使用说明书　　1、试验原理　　2、使用范围　　3、交叉反应　　4、使用单位需自备的设备及试剂　　5、提供的材料与试剂　　6、溶液的配制　　7、样品的前处理方法　　8、检测步骤　　9、结果判定　　10、检测方法灵敏度、准确度、精密度　　11、注意事项　　12、贮藏条件和保存期　　13、供应商名称、地址　　六、试剂盒的技术参数　　1、标准曲线　　2、检测限和定量限　　3、临界值　　4、精密度和准确度　　5、交叉反应　　附件2：试剂盒备案参考评判标准　　1、标准曲线　　定量方法：标准曲线至少由5个浓度组成，测定次数不少于5次，以确定工作浓度范围和IC50范围。

　　定性方法：工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定，每个浓度重复不少于5次，浓度与响应值之间应有一定的关系　　2、检测限和定量限　　检测限：20份空白样品测定均值加3倍标准差　　定量限：应大于标准曲线中最低浓度点对于定量方法，应对该浓度样品至少测定6次进行验证，而不能通过外延法推断　　3、临界值（cut-off值）的确定　　对于有最高残留限量的药物，检测方法的临界值为20份添加MRL浓度的样品重复3次测定的均值减去1.64倍标准差，即95%置信限处　　对于禁用药物，检测方法的临界值为定量限，该值应达到公认的指标　　4、精密度和准确度　　对于有最高残留限量的药物，添加浓度为MRL（最大残留限量maximum residue limit）及MRL上下各一个浓度；对于禁用药物，添加浓度为定量限和2倍定量限，每个添加浓度至少测定5个平行样，并至少进行3批实验（不同检测日期，不同标准曲线，不同批次试剂盒）　　（1）准确度：回收率范围大于40%或符合相应检测标准的要求　　（2）精密度：以变异系数表示　　批内变异系数：每批平行样之间的变异系数小于或等于25%，对于禁用药物小于或等于30%。

　　批间变异系数：所有样品之间的变异系数值小于或等于30%，对于禁用药物小于或等于40%　　定性方法：阴性和阳性样品各测定不少于50份，确定假阳性率和假阴性率　　5、交叉反应　　试剂盒与待检药物类似物、代谢物或共同存在的药物测定交叉反应率　　6、保存期　　保存期通过保存条件的稳定性试验结果确定　　7、复核试验　　复核试验主要内容应包括：　　（1）定量方法：检测限、IC50以及至少两个添加浓度的准确度和精密度，并与理化方法（或与具代表性进口试剂盒）比较　　（2）定性方法：检测限、假阳性率和假阴性率。