植物样品全氮磷钾测定(共11页).docx

精选优质文档-----倾情为你奉上植株全氮、磷、钾测定方法一、植物全氮测定（一）H2SO4-H2O2消煮法1、适用范围本方法不包括硝态氮的植物全氮测定,适合于含硝态氮低的植物样品的测定2、方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾的定量采用H2O2为加速消煮的氧化剂,不仅操作手续简单快速,对氮、磷、钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失3、试剂（1）硫酸(化学纯,比重;（2）30% H2O2(分析纯)4、主要仪器设备消煮炉，定氮蒸馏器5、操作步骤称取植物样品(称准至装入100ml开氏瓶或消煮管的底部,加少量水润湿，加浓H2SO45ml,摇匀(最好放置过夜),盖上弯劲漏斗，在电炉或消煮炉上先小火加热,待H2SO4发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下稍冷后加1-5滴H2O2(3),再加热至微沸,消煮约7～10min,稍冷后重复加H2O2,,再消煮。

如此重复数次,每次添加的H2O2应逐次减少, 消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热10min,除去剩余的H2O2取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容(V1)每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差6、注释（1）所用的H2O2应不含氮和磷H2O2在保存中可能自动分解,加热和光照能促使其分解,故应保存于阴凉处在H2O2中加入少量H2SO4酸化,可防止H2O2分解2）称样量决定于NPK含量,健状茎叶称,种子,老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样,可按干样的5倍称样称样量大时,可适当增加浓H2SO4用量3）加H2O2时应直接滴入瓶底液中,如滴在瓶劲内壁上,将不起氧化作用,若遗留下来还会影响磷的显色4）上机分析准备的试剂指示剂溶液：取10ml指示剂储备液加入500ml容量瓶，加入4ml磷酸盐缓冲液用蒸馏水定容在分析前一天准备此试剂一般1L能分析200个样品）4mol/LNaOH :在蒸馏水中溶解80g氢氧化钠并稀释定容至500ml.（一般1L能分析200个样品）1000ppm N储备液;在1000ml容量瓶中溶剂氯化铵，并稀释定容分析标线梯度：0、5、10、15、20、25ppm（二）水杨酸-锌粉还原- H2SO4-加速剂消煮法1、适用范围包括销态氮的植物全氮测定,适合于硝态氮含量较高的植物样品的测定。

2、方法原理样品中的硝态氮在室温下与硫酸介质中的水杨酸作用,生成硝基水杨酸,再用硫代硫酸钠及锌粉使硝基水杨酸还原为氨基水杨酸.然后按H2SO4-加速剂消煮法进行消煮法进行消煮样品,使样品中全部氮转化为铵盐3、试剂（1）固体Na2S2O3;（2）还原锌粉(AR);（3）水杨酸-硫酸:30g水杨酸溶于1L浓硫酸中也可以该用含苯酚的浓硫酸:40g苯酚溶于1L浓硫酸中4、仪器设备5、操作步骤称取磨细烘干样品(过筛)～或新鲜茎叶样品～,置于100ml开氏瓶或消煮管中,先用水湿润内样品(烘干样),然后加水杨酸-硫酸10ml,摇匀后室温放置30min,加入Na2S2O3约,锌粉和水10ml,放置10 min,待还原反应完成后,加入混合加速剂2g,按土壤全氮测定方法进行消煮, 消煮完毕,取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容(V1)用于滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差三）消煮液中铵的定量(凯氏法)1、适用范围适合于各种植物样品消煮液中氮的定量2、方法原理植物样品经开氏消煮、定容后,吸取部分消煮液碱化,使铵盐转变成氨,经蒸馏,用H3BO3吸收,硼酸中吸收的氨可直接用标准酸滴定,以甲基红-溴甲酚绿混合指示剂指标终点。

3、试剂（1）400g/L NaOH溶液2）20g/L H3BO3-指示剂溶液3）酸标准溶液[c(HCL或1/2H2SO4)=L]4、仪器设备蒸馏装置或半自动蒸馏仪5、蒸馏检查蒸馏装置是否漏气和管道是否洁净后,吸取定容后的消煮液～ (V2,含NH4-N约1mg),注入半微量蒸馏器的内室另取150ml三角瓶,内加5 ml 2% H3BO3指示剂溶液(若为包括硝态氮的待测液,应加约6 mL的400g/L NaOH溶液),通过蒸气蒸馏(注意开放冷凝水,勿使馏出液温度超过40℃)待馏出液体积约达50～60ml时,停止蒸馏,用少量已调节至的水冲洗冷凝管末端用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同)与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定、以校正试剂和滴定误差6、结果计算ω(N), %=c(V-V0)××D×100/m;式中: ω(N)——植物全氮的质量分数,%;c——酸标准溶液的浓度,mol/L;V——滴定试样所用的酸标准液体积,ml;V0——滴定空白所用的酸标准液, ml;——N的摩尔质量,kg/mol;D——分取倍数(即消煮液定容体积V1/吸取测定的体积V2)。

二、植物全磷的测定（一） 钒钼黄吸光光度法1、适用范围适合于含磷量较高的植物样品的测定(如籽粒样品)2、方法原理植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸,其吸光度与磷浓度成正比,可在波长400～490nm处用吸光光度法测定磷浓度较高时选用较长的波长,较低时选用较短波长此法的优点是操作简便,可在室温下显色,黄色稳定,在HNO3、HClO4和H2SO4等介质中都适用,对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格,干扰物少,在可见光范围内灵敏度较低,适测范围广(约为1～20mg/L P),故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定3、试剂（1）钒钼酸铵溶液:钼酸铵[(NH4)6Mo7O2﹒4H2O,分析纯]溶于400mL水中,必要时可适当加热,但温度不得超过60℃另将偏钒酸铵(NH4VO3,分析纯)溶于300mL沸水中,冷却后加入250mL浓HNO3(分析纯)将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵(溶液中,不断搅匀,最后加水稀释至1L,贮于棕色瓶中2）NaOH溶液(c=6mol/L):24gNaOH溶于水, 稀释至100ml3）二硝基酚指示剂(ρ=2g/L):,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中。

4）磷标准溶液ρ[(P)=50mg/L]:(干燥的KH2PO4(分析纯)溶于水,加入5ml浓HNO3,于1L容器瓶中定容4、主要仪器设备分光光度计5、分析步骤准确吸取定容,过滤或澄清后的消煮液5～20ml(V2,含～放入50ml容量瓶中,加2滴二硝基酚指示剂,滴加6mol/LNaOH中和至刚呈黄色,加入5ml钒钼酸铵试剂,用水定容(V3)15min后,用1cm光径的比色槽在波长440nm处进行测定,以空白溶液(空白溶液消煮液按上述步骤显色),调节仪器零点校准曲线或直线回归方程:准确吸取50mg/L P标准液0, 1, , , 10, 15ml分别放入50mL容量瓶中,按上述步骤显色,即得0, , , , , 10, 15 ml P的标准系列溶液,与待测液一起进行测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或求直线回归方程6、结果计算 ρ(P)×V3×(V1/V2)×10-4ω(P)=m式中: ω(P) ——植物磷的质量分数,%; ρ(P) ——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度, mg/L;V1——消煮液定容体积, ml;V2——吸取测定的消煮液体积, ml;V3——显色液体积, ml;m——称样量,g;10-4——将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数。

7、注释（1）显色液中ρ(P)=1~5 mg/L时,测定波长420nm;5～20mg/L用490nm待测液中Fe3+浓度高应选用450nm,以清除Fe3+干扰校准曲线也应用同样波长测定绘制2）一般室温下,温度对显色影响不大,但室温太低(如<15℃)时,需显色30min稳定时间可达24h3）如试液为HCl,HClO4介质,显色剂应用HCl配制;试液为H2SO4介质, 显色剂也用H2SO4配制显色液酸的适宜浓度范围为～ mol/L,最好是～ mol/L酸度高显色慢且不完全,甚至不显色;低于 mol/L易产生沉淀物, 干扰测定钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为×10-3～10-2mol/L, 钒酸盐为8×10-5～×10-3 mol/L4、此法干扰离子少主要干扰离子是铁,当显色液中Fe3+浓度超过%时,它的黄色有干扰,可用扣除空白消除二）钼锑抗吸光光度法1、适用范围适合于含磷量较低的植物样品的测定(如茎秆样品等)2、方法提要植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。

3、试剂（1）6mol/L NaOH溶液（2）%二硝基酚指示剂（3）2mol/L(1/2 H2SO4)硫酸溶液:浓H2SO4加水至100mL4）钼锑贮存液: 浓H2SO4(分析纯)126 ml缓慢地注入约400 ml水中,搅拌,冷却钼酸铵(分析纯)溶解于约60℃的300ml水中,冷却然后将H2SO4溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中,再加入100 %酒石酸锑钾(KSbOC4O6﹒1/2H2O, 分析纯) 溶液,最后用水稀释至1L,避光贮存此贮存液含钼酸铵为1%,酸浓度为c(1/2 H2SO4)= mol/L（5）钼锑抗显色剂:抗坏血酸(C6H8O6,左旋,旋光度+21～+22, 分析纯) 溶于100ml钼锑贮存液中,此液须随配随用,有效期一天,冰箱中存放,可用3～5天6）磷标准工作液[ρ(P)=5 mg/L]:吸取100mg/L P标准贮存液稀释20倍,即为5 mg/L P标准工作溶液,此溶液不宜久存4、主要仪器设备同上5、分析步骤吸取定容过滤或澄清后的消煮液(V2,含P5～30ｕg)于50ml容量瓶中, 用水稀释至约30ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加6mol/L NaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴2mol/L(1/2 H2SO4)溶液,使溶液的黄色刚刚褪去,然后加入钼锑抗显色剂,摇匀,用水定容(V3)。

在室温高于15℃的条件下放置30min后,用1cm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点校准曲线或直线回归方程: 准确吸取ρ(P)= 5mg/L标准工作溶液0, 1, 2, 3, 4,5 ml,分别放入50mL容量瓶中,加水至30ml,同上步骤显色并定容, 即得0,按, , , , L P标准系列溶液, 与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程6、结果计算:同17、注释根据分光光度计性能,可选用650～890nm波长处测定,880～890nm处灵敏度高三、植物全钾的测定—火焰光度法（一）适用范围适合于植物样品消煮液中钾含量的测定二）方法提要植物样品经消煮或浸提,并经稀释后,待测液中的K可用火焰光度法测定三）试剂K标准溶液[ρ(K)= 100mg/L] :(分析纯),在105～110℃干燥2h)溶于水,于1L。