新冠核酸检测实验室PCR管八联管滤芯吸头等耗材质检和储存程序.docx

新冠核酸检测实验室 PCR 管（八联管）滤芯吸头等耗材质检和储存程序1 目的保证耗材的使用质量，合理的配用及存放2 适用范围核酸扩增荧光检测实验室常用耗材：离心管；PCR管（八联管）；滤芯吸头；PCR用采血管、采样管、采样拭子 和一次性吸管等；无核酸水、PBS等缓冲液3 负责人林**4 购买和储存程序4.1 购买前订出计划并定出品名、质量规格报相关部门 订货及购买4.2 购买后，验收合格即领取4.3 常用的消耗品定点、定量地摆在实验台抽屉里，并 标明品名及数量特殊的消耗品放在指定的地方4.4 每周用量要有记录，并及时补充及领取所用去的数 量4.5 订购消耗品前，应准确查询数量4.6 玻璃用品应放在指定位置，存放要小心，以免损 坏5 质检程序5.1 辅料质检的基本原则5.11 外包装检查:外包装应完整无损无污，标识清楚 检查品名、品牌，货号，规格、生产日期，有效期、保存 条件等信息5.12. 内包装检查：内包装物品应与外包装标识一致， 检查是否有破损，泄漏，内容物是否齐全，是否有相应的 使用说明书等5.13. 性能质检:检测试剂耗材是否与其性能一致，比 如吸头的准确性和气密性等5.14. 污染物质检:检试剂耗材是否被常规检测项目的 待检物污染，这种污染可能是物品生产环节，也可能是运 输或实验室的保存过程中被污染。

5.15. 抑制物质检:检试剂耗材中是否存在 PCR 反应的 抑制物，比如核酸酶5.2 辅料质检的前提条件5.21 弱阳性质控:需要准备弱阳性质控，包括标准物 质、第三方质控或弱阳性样品用于进行性能质控和抑制物 质控5.22.阴性质控:需要准各确定阴性的样品或空白对 照，用于进行污染物的质控5.23 重复次数:符合统计学计算的最常用的两个数字是 5和 20,5 通常是能进行统计学分析的最少重复次数，20通 常用于计算95%的置信区间我科选择重复次数 55.3 常见辅料的质检辅料的质检应结合实际工作中可能用到的场景，并非 越苛刻越好，需要每个实验室结合自身情况来设计和调整 参数我科按以下方式质检5.31 离心管：(1) 渗漏密闭性:将 5 个离心管加入半量墨汁，盖好盖 子后放入水中，浸泡30min,没有墨汁渗出为合格2) 离心密闭性:将5个离心管加入半量纯水,放入离心 机， 1.OOOOrpm , 3 0m i n ,管盖未崩开未漏液为合格3) 热密闭性:将 5 个离心管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入金属浴中，56°C,30min,再进行称重，离心管 未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。

⑷冷密闭性:将5个离心管加入半量纯水，放入-20°C 冰箱，24h,离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格5） 污染物质检:将 5 个离心管分别加入半量阴性纯 水，盖好盖子涡旋Imin后静置5min,吸取纯水作为模板进 行扩增，qPCR无扩增为合格6） 抑制物质检:将 5 个离心管分别加入弱阳性质控物，室温静置5min,然后进行提取RNA核酸，DNA核酸，室 温静置5min,作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合 格5.32PCR 管（八联管）：⑴渗漏密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量墨汁， 盖好盖子后放入水中，浸泡30min,没有墨汁渗出为合格⑵离心密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量纯水， 放入离心机，1.000rpm,30min,管盖未崩开未漏液为合格（3）热密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量纯水， 盖好盖子称重后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序， 程序运行完毕后，再进行称重，PCR管（八联管）未变形，管 盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格4）冷密闭性:将 5 个 PCR 管（八联管）加入半量纯水， 放入20°C冰箱，24h，离心管未变形，管盖未崩开未漏液 为合格。

5） 污染物质检:将5个PCR管（八联管）加入半量阴性 纯水，盖好盖子涡旋Imin后静置5min,作为模板进行扩增， qPCR 无扩增为合格6） 抑制物质检:将5个PCR管（八联管）分别加入弱阳 性质控物，室温静置5min,然后进行提取RNA核酸，DNA核 酸，室温静置5min,作为模板进行扩增，qPCR增未被抑制 为合格7） 空白荧光通透性：对于qPCR,需要考察PCR管（八联 管）是否有非特异性光信号，将 5个空PCR管（八联管），盖好盖子后放入PCR仪，设置 一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR无扩增为合 格8） 阳性荧光通透性：对于qPCR,还需要考察PCR管（八 联管）是否会抑制荧光的通透性，将 5个含弱阳性样品和 扩增试剂的PCR管（八联管），与确认无荧光干扰的PCR管 （八联管），盖好盖子后放入PCR仪一同扩增，设置一个常 用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR扩增未被抑制为合 格5.33 滤芯吸头：测试吸头需使用经校准的移液涔1) 准确性:将 5 个吸头分别吸取定量的纯水称重，重 量与体积的关系按照l・g/n)l.换算(2) 气密性:取5个吸头，吸取最大量程的含有 1%甘油 的墨水，观察有色液体不出现在滤塞之上，液面相同为合 格。

3) 防气溶胶性能:取5个吸头，吸取阳性核酸，反复 吹吸10次，换另一个新吸头在阴性纯水中反复吹吸 10次，取阴性纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格4) 污染物质检:取 5个吸头，吸取阴性纯水反复吹吸10次，取阴性纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合 格5) 抑制物质检:取5个吸头，吸取弱阳性质控物反复 吹吸10次，然后进行提取；吸取RNA核酸和DNA核酸反复 吹吸10次，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合 格5.34PCR 用采血管、采样管、采样拭子和一次性吸管主要考察污染物和抑制物(1) 污染物质检:将 5个耗材加入一定量阴性纯水，盖 好盖子涡旋l.min后静置30min,吸取纯水作为模板进行扩 增，qPCR无扩增为合格2) 抑制物质检:将 5 个耗材分别加入弱阳性质控物，室温静置30min,然后吸取质控物进行提取；作为模板进行扩 增，qPCR扩增未被抑制为合格5.35无核酸水、PBS等缓冲液：(DPH 值:测量各缓冲液的 PH 值2) 污染物质检:吸取缓冲液作为模板进行扩增， qPCR 无扩增为合格3) 抑制物质检:将缓冲液分别与RNA核酸和DNA核酸 混合，然后吸取混合液作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑 制为合格。

经上述检测未发现不合格情况后，即启用该批耗材6.引用的图表6.1YC*ZYY/JYK-J1.-S0P_18-7-01 附表9 :消耗性材料 验收记录表。