机能试验学：不同类型缺氧动物模型制备和观察.ppt

不同类型缺氧动物模型制备和观察不同类型缺氧动物模型制备和观察氧的摄取、运输和利用氧的摄取、运输和利用外呼吸血液循环组织供氧用氧 氧的摄取、运输和利用氧的摄取、运输和利用 ①① 　　　　 ② ② ③③ ④④ 外外呼呼吸吸 与与HbHb结结合合 血血液液循循环环 组组织织细细胞胞 摄氧摄氧 携氧　　携氧　　 运氧运氧 用氧用氧　　　　　　　　 　　 Supply o2　 utilization o2 供氧　　　　 利用氧　　  由由于于组组织织氧氧的的供供应应减减少少或或对对氧氧的的利利用用障障碍碍，，而而引引起起细细胞胞代代谢谢、、功功能能和和形形态态结结构构异异常常变化的病理过程称为变化的病理过程称为缺氧缺氧（（hypoxiahypoxia）） 缺缺 氧氧 的的 概概 念念低张性血液性循环性组织性供氧↓用氧↓缺氧缺氧的类型、原因和发病机制乏氧性缺氧乏氧性缺氧（（hypoxic hypoxia）） 概念概念 乏氧性缺氧是指由于肺泡氧分压乏氧性缺氧是指由于肺泡氧分压降低，血液从肺摄取的氧减少，或静降低，血液从肺摄取的氧减少，或静脉血分流入动脉，以致脉血分流入动脉，以致PaOPaO2 2 降低降低，动，动脉脉血氧含量减少血氧含量减少，组织供氧不足，又，组织供氧不足，又称低张性缺氧。

称低张性缺氧 原原 因因v 吸入气体氧分压低吸入气体氧分压低(atmospheric hypoxia) Ø由于吸入气氧分压低，由于吸入气氧分压低，PaOPaO2 2和氧含量随之降低和氧含量随之降低v 静脉血分流入动脉（静脉血掺杂）增多 呼吸运动减弱或肺的疾患（如窒息、慢性阻塞性肺疾患、肺水肿、肺炎等）如高原或高空，大气压低；通风不好的矿井、坑道内；吸入低氧的混合气体（如高浓度的氮、氢等）v 外呼吸功能障碍（呼吸性缺氧） 如心房或心室中隔缺损，伴有肺动脉狭窄或肺动脉高压HbO2HHb2.6g/dl正常≥5g/dl缺氧紫绀紫绀 (cyanosis) 概念概念v 毛细血管毛细血管血液中血液中脱氧血红蛋白脱氧血红蛋白浓度达到或超过浓度达到或超过50g/L50g/L时，可使皮肤和粘膜呈青紫色，称为紫绀时，可使皮肤和粘膜呈青紫色，称为紫绀缺氧不一定有发绀，发绀不一定有缺氧如严重贫血病人如红细胞增多症患者血液性缺氧血液性缺氧（（Hemic Hypoxia）） 概念概念 血液性缺氧是指由于血红蛋白含量减少，血液性缺氧是指由于血红蛋白含量减少，或血红蛋白的性质发生改变，致或血红蛋白的性质发生改变，致血液携氧能力血液携氧能力降低降低，血氧含量减少，或，血氧含量减少，或血红蛋白结合的氧不血红蛋白结合的氧不易释出易释出所引起的组织缺氧。

因溶解于血浆的氧所引起的组织缺氧因溶解于血浆的氧变化不大，变化不大，PaO2正常，故又称等张性低氧血症正常，故又称等张性低氧血症（（isotonic hypoxemia）原原 因因v 贫血贫血（（anemia））Ø 单位容积血液内红细胞数和血红单位容积血液内红细胞数和血红蛋白量减少蛋白量减少Ø 氧容量降低，氧含量随之减少氧容量降低，氧含量随之减少v 氧化剂氧化剂(oxidant)中毒中毒Ø 血红蛋白的二价铁，在氧化剂的作用下，血红蛋白的二价铁，在氧化剂的作用下，可氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白可氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白Ø 剩余的剩余的FeFe2+2+与氧的亲和力异常增高，导致与氧的亲和力异常增高，导致氧离曲线左移，使组织缺氧氧离曲线左移，使组织缺氧Ø 肠源性发绀肠源性发绀（（enterogenous cyanosis））如亚硝酸盐或过氯酸盐 高铁血红蛋白血症 (methemoglobinemia)Fe2+Fe2+Fe2+Fe2+Hb: 22Hb-Fe2+HbFe3+OH氧化还原 （咖啡色）v 碳氧血红蛋白血症碳氧血红蛋白血症 (Carboxy hemoglobinemia)Ø CO与与Hb结合生成碳氧血红蛋白（结合生成碳氧血红蛋白（HbCO））Ø CO抑制抑制RBC内糖酵解，以致内糖酵解，以致2，，3—DPG生生成减少，氧离曲线左移，成减少，氧离曲线左移，HbO2难以释放难以释放O2v 血红蛋白与氧的亲和力异常增强血红蛋白与氧的亲和力异常增强Ø 输入大量库存血时，因库存血中的红细输入大量库存血时，因库存血中的红细胞胞2 2，，3 3—DPGDPG含量低，氧离曲线左移。

含量低，氧离曲线左移Ø 输如碱性溶液时，血浆输如碱性溶液时，血浆pHpH升高，氧离曲升高，氧离曲线左移循环性缺氧循环性缺氧（（Circulatory Hypoxia）） 概念概念 循环性缺氧是指由于血流速度减慢，循环性缺氧是指由于血流速度减慢，血流量减少，单位时间内供给组织的氧血流量减少，单位时间内供给组织的氧量减少而引起的缺氧，又称低动力性缺量减少而引起的缺氧，又称低动力性缺氧氧（（hypokinetic hypoxia））›全身性循环障碍全身性循环障碍 常见于心力衰竭、休克等常见于心力衰竭、休克等›局部性循环障碍局部性循环障碍 常见于栓塞和血管病变（如动脉粥常见于栓塞和血管病变（如动脉粥样硬化与血栓形成）样硬化与血栓形成）原原 因因组织性缺氧组织性缺氧（（Histogenous Anoxia）） 概念概念 由于组织细胞利用氧的能力不由于组织细胞利用氧的能力不足而引起的缺氧称为组织性缺氧，足而引起的缺氧称为组织性缺氧，又称氧利用障碍性缺氧又称氧利用障碍性缺氧原原 因因v 细胞中毒细胞中毒Ø 氰化物中的氰化物中的CNCN- -与氧化型细胞色素氧化与氧化型细胞色素氧化酶的酶的FeFe3+3+结合，形成氰化高铁细胞色素结合，形成氰化高铁细胞色素氧化酶，失去传递电子的能力，导致呼氧化酶，失去传递电子的能力，导致呼吸链中断，细胞用氧严重障碍而急速致吸链中断，细胞用氧严重障碍而急速致死。

死Ø 硫化物、砷化物等抑制细胞色素氧化硫化物、砷化物等抑制细胞色素氧化酶而导致呼吸链阻断酶而导致呼吸链阻断 缺氧虽分为上述四型，但在实际情况中缺氧虽分为上述四型，但在实际情况中所见的，往往是混合型例如失血性休克，所见的，往往是混合型例如失血性休克，既有血红蛋白减少所致的血液性缺氧，又有既有血红蛋白减少所致的血液性缺氧，又有微循环障碍所致的循环性缺氧又如心力衰微循环障碍所致的循环性缺氧又如心力衰竭，既有循环障碍引起的循环性缺氧，又可竭，既有循环障碍引起的循环性缺氧，又可继发肺淤血、水肿而引起呼吸性缺氧继发肺淤血、水肿而引起呼吸性缺氧• 复制不同类型缺氧模型复制不同类型缺氧模型• 观观察察不不同同类类型型缺缺氧氧时时的的呼呼吸吸、、皮皮肤肤粘粘膜膜颜颜色色及器官（主要是及器官（主要是肝脏肝脏）的变化；）的变化；• 掌掌握握缺缺氧氧的的分分类类、、特特点点，，了了解解不不同同类类型型缺缺氧氧时机体的各种表现时机体的各种表现实验目的实验目的• 广口瓶、一氧化碳（广口瓶、一氧化碳（CO）发生装置、试管、）发生装置、试管、烧杯、烧杯、1ml注射器、剪刀注射器、剪刀• 钠石灰钠石灰(NaOH·CaO)、、 5%亚硝酸钠亚硝酸钠(NaNO2)、、浓硫酸、甲酸。

浓硫酸、甲酸实验器材和药品实验器材和药品小白鼠（小白鼠（4只）只）实验动物实验动物实验材料实验材料实验分组实验分组•正常对照：正常对照：1只只 • 乏氧性缺氧：乏氧性缺氧：1只只 • 血液性缺氧：血液性缺氧：2只（只（CO中毒、亚硝酸钠中毒）中毒、亚硝酸钠中毒） 活活动动情情况况、、呼呼吸吸频频率率（（次次/10秒秒））、、幅幅度度和和节节律律；；呼呼吸吸深深度度、、皮皮肤肤粘粘膜膜颜颜色色变变化化（（耳耳廓廓、、趾趾端端、、唇唇周周、、尾尾））；；尸尸体体解解剖剖观观察察内内脏脏（（主主要要是是肝肝脏脏））及及血血液液颜颜色的变化色的变化观察指标观察指标 取1只小鼠放入装有钠石灰的广口瓶内，塞紧瓶塞，每10min观察记录一次小鼠的上述指标，直至小鼠死亡 尸体留待统一开腹取肝乏氧性缺氧乏氧性缺氧实验步骤实验步骤NaOH·CaO+CO2Na2CO3+CaCO3+H2O• 准备CO发生装置，将1只小鼠放入广口瓶中，观察其正常表现后，与CO发生装置连接• 用刻度吸管取甲酸3ml放于试管内，沿试管壁缓慢加入浓硫酸2ml，塞紧瓶塞• 观察各项指标记录动物死亡时间1 1、一氧化碳中毒、一氧化碳中毒血液性缺氧血液性缺氧CO发生装置发生装置实验步骤实验步骤 取1只小鼠，腹腔注 射 5％ 亚 硝 酸 钠0.3ml溶液，观察各项指标变化。

2 2、亚硝酸钠中毒、亚硝酸钠中毒血液性缺氧血液性缺氧实验步骤实验步骤腹腔注射方法腹腔注射方法注射位置注射位置：：左下腹腹腔左下腹腹腔固定姿势固定姿势：：头部略低于尾部头部略低于尾部 取小鼠取小鼠1 1只，作为正常对照，待实验组死亡只，作为正常对照，待实验组死亡后，颈椎脱臼法处死，与其他小鼠比较后，颈椎脱臼法处死，与其他小鼠比较正常对照正常对照实验步骤实验步骤实验结果实验结果缺氧类型缺氧类型正常对照正常对照乏氧性缺氧乏氧性缺氧CO中毒性缺中毒性缺氧氧 亚硝酸盐亚硝酸盐中毒性缺氧中毒性缺氧活动情况活动情况呼吸频率呼吸频率及深度及深度皮肤粘膜颜皮肤粘膜颜色色肝脏颜色肝脏颜色死亡时间死亡时间•广口瓶一定要密闭、塞紧•浓硫酸是强腐蚀药品，加液时要小心，不要溅到衣服、皮肤或地面上•CO中毒实验完毕后，应及时处理装置内的残留物•腹腔注射应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，但也应避免将药液注入肠腔或膀胱注意事项注意事项v缺氧瓶，co发生装置v小鼠尸体统一处理，置于冰柜中讨论与思考讨论与思考1、、瓶瓶内内放放置置钠钠石石灰灰为为何何导导致致小小鼠鼠发发生生缺缺氧氧？？小小鼠呼吸发生改变的机制是什么？鼠呼吸发生改变的机制是什么？2、、吸吸入入CO发发生生缺缺氧氧的的机机制制是是什什么么？？应应如如何何解解救救？？3、、腹腹腔腔注注射射NaNO2导导致致小小鼠鼠发发生生缺缺氧氧的的机机制制是是什么什么 ？应如何解救？？应如何解救？。