优化方案高中生物第一章第23节微生物的纯培养微生物数量的测定知能演练轻巧夺冠北师大版选修.doc

优化方案】2013高中生物 第一章第2、3节微生物的纯培养 微生物数量的测定知能演练轻巧夺冠 北师大版选修1A卷1．有关涂布分离法，叙述错误的是(　　)A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．适宜条件下培养D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析：选D涂布分离法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养用不同稀释度的菌液接种，只有在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，才能够在培养基表面形成单个菌落，而不是所有培养基上均可出现单个菌落2．(2012·昆明三中高二质检)用涂布分离法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比(　　)A．比实际值高B．比实际值低C．和实际值一致D．比实际值可能高也可能低解析：选B培养基上的一个菌落也可能由相连的两个或多个菌体繁殖而来，因此统计的活菌数要少于菌体实际值3．某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为215，那么每毫升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)(　　)A．2.15×108　　　　　　　 B．2.15×109C．215 D．21.5解析：选B。

稀释倍数为106,0.1 mL稀释液的菌落数的平均值为215，则每毫升样品中菌落数就为215/0.1×106＝2.15×1094．在土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验操作中，对使用的平板和试管要进行标记，以下说法正确的是(　　)A．对培养皿仅需注明培养基的种类即可B．一般在使用之后进行标记C．由于试管用的较多，只需对试管进行标记即可D．标记的目的主要是为了防止实验中平板、试管等的混淆解析：选D本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，应在使用前就做好标记标记时要注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等5．下图是微生物平板划线示意图划线的顺序为1→2→3→4→5下列操作方法正确的是(　　)A．操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B．划线操作要在火焰上进行C．在5区域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌解析：选D操作前要将接种环放在酒精灯的外焰灼烧进行灭菌；整个操作过程要在酒精灯旁进行；1、2、3、4、5这五个区域都可能有所需菌落；在每次划线前对接种环灼烧是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，划线结束后对接种环灭菌是为了杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

6．需要在火焰旁操作的有(　　)①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液　④涂布平板　⑤微生物的培养A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④解析：选D称取土壤、土壤溶液稀释、涂布平板等操作均需在火焰旁进行，以防止杂菌污染7．(2011·高考山东卷改编)研究发现乳酸菌素(小分子蛋白质)有抑菌作用，其提取及应用如图所示―→―→―→抑菌实验(1)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或________接种对新配置的培养基灭菌时所用的设备是________实验前需对超净工作台进行________处理2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供________3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈可通过测定透明圈的________来看乳酸菌素的抑菌效果解析：(1)微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和(稀释)涂布(平板)法；新配制的培养基需要用高压蒸汽灭菌锅灭菌；实验前需对超净工作台进行消毒处理2)尿素可为乳酸菌A提供氮源：(3)透明圈越大，表明抑菌效果越好答案：(1)涂布分离法(或：稀释混合平板法)　高压蒸汽灭菌锅　消毒(2)氮源　(3)直径(或：大小)8．某研究所对受污染的某水库中的大肠杆菌进行了数量的测定。

牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂H2O5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1000 mL(1)研究人员首先配制了如表所示的培养基，其中的蛋白胨主要为大肠杆菌的生长提供________________________________________________________________________2)研究人员取污水10 mL加无菌水________mL制备稀释倍数为101的稀释液，并依次制备102、103、104、105、106的系列稀释液3)在每个稀释倍数的液体中均取出0.1 mL，用________法接种样品至少________个培养皿为避免杂菌污染，接种时要对实验者和实验室进行________，并且要在________附近进行操作4)用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少，这是因为__________________解析：答案：(1)氮源和维生素　(2)90　(3)涂布分离　3　消毒　酒精灯火焰　(4)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落B卷1．用涂布平板分离法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是(　　)A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和256，取平均值235解析：选D。

在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单用3个平板的计数值来求平均值2．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(　　)A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析：选D检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105,106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的一组平板为代表进行计数3．下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是(　　)A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析：选A。

微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法而一般不用活菌计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30～300间的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源4．某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2760、295和16，则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)(　　)A．2.76×104个/mL B．2.95×105个/mLC．4.6×104个/mL D．3.775×104个/mL解析：选B为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此只有295符合要求其稀释度倍数为102，所用稀释液体积为0.1 mL，代入计算公式得菌落总数为2.95×105个/mL5．某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用(　　)A．天然培养基B．稀释涂布平板法C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D．用显微镜直接观察、寻找，再培养解析：选C在培养过程中选择适合所需微生物生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基，使微生物R在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖。

6．某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)实验的主要步骤如下请分析回答问题：(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________4)转为固体培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选解析：题干中首先说明了化合物A是有机物，后来在培养基中又增加了磷酸盐、镁盐以及微量元素，通过比较各培养瓶中化合物A的多少，选出“目的菌”，由此还可推断出“目的菌”所需碳源和氮源都来自化合物A，是异养型获得“目的菌”后，再进行扩大培养，培养过程中及培养结束后注意灭菌答案：(1)目的菌　选择(2)化合物A　异养需氧型(3)减少　增加(4)平板划线7．(2011·高考课标全国理综卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。

某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________________和________________3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染解析：(1)要获得分解原油的细菌，应选择以原油为唯一碳源的培养基，以保证这种细菌可以大量繁殖，而其他细菌不能生存此种培养基属于选择培养基2)纯化菌种常用平板划线分离法和涂布平板分离法3)在以原油为唯一碳源的培养基上，在菌落周围的原油被分解而形成分解圈，分解圈越大，说明该菌株降解能力越强4)实验室灭菌有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，实验操作要在酒精灯火焰附近的无菌区进行答案：(1)原油　选择　(2)平板划线分离法　涂布平板分离法　(3)强　(4)干热灭菌　高压蒸汽灭菌　火焰1．微生物的分离包括样品稀释、划线或涂布及培养三个步骤。

2．平板划线法和涂布法是微生物接种的常用方法3．分离和纯化微生物是微生物技术的重要操作方法4．统计菌落时，一般选择同一稀释度的3个培养皿中的菌落数目相近者，且对细菌和放线菌来说，要求每皿以30～300个菌落为宜，霉菌以每皿10～100个菌落为宜5．平板菌落计数法是应用广泛的微生物数量测定方法，又称活菌计数法此法还常用于微生物的选种与分离纯化及其他方面的测定。