实验7 土壤硝态氮的紫外分光光度法.docx

实验土壤硝态氮的紫外分光光度法根层土壤中硝态氮的含量与植物生长发育有着密切的关系，其测定结果可 为合理施肥，肥料规划和估产提供依据一. 目的要求了解紫外/可见分光光度计的基本结构，掌握用波长选择消除干扰组分的测 定技术，用校正因数法测定土壤硝态氮的含量二. 方法原理用氯化钠溶液提取土壤硝态氮，于紫外分光光度计上分别测量其210和 275 纳米的吸光度，前者是硝酸根和以有机质为主的杂质的吸收值，后者是以有机 质为主的杂质的吸收因为 275纳米处硝酸根已无吸收，而有机质在275 纳米处的吸收值是210 纳米处的f倍，故可将A275校正为有机质在210纳米处的干扰吸收，从A210 中减去，即得硝酸根在 210纳米处得真实吸收值，再利用标准曲线法求得土壤 中硝态氮得含量三. 器皿与试剂1•紫外、可见分光光度计和xx比色皿2. 50毫升容量瓶10个， 100和 250毫升锥形瓶各4个，漏斗4个，普通试 管4支， 50毫升胖肚吸管1 支，5、 10毫升和 2 毫升刻度吸管各一只，滴管2 支3. 氯化钠溶液 1mol/L:称取氯化钠58.44克溶于400毫升水中，转入1 升容量瓶中，稀释至刻度4•硝态氮标准溶液100yg/ml:称取于105°C烘制2小时得硝酸钾0.3609克溶于水，转移至500毫升容量 瓶中，用水定容。

临用时再稀释至20yg/ml5•硫酸溶液，10%(V/V)四. 测定步骤1•待测液制备称取10.00克风干土样于250毫升锥形瓶中，加入50毫升1 mol/L的氯化 钠溶液，加塞振荡30分钟，过滤于干净干燥的100毫升锥形瓶中，初液弃去 同时做试剂空白2•标准曲线绘制与测定吸取20yg/ml硝态氮标准溶液0.00、0.50、1.00、 2.00、 3.00、 4.00毫升分别置入50毫升容量瓶中，用水定容至刻度后，再加入2毫 升 10%硫酸溶液，摇匀浓度分别为0.00、0.20、 0.40、 0.80、1.20和1.60yg/ml以零浓度标液作参比，于210米处测定标准系列的 吸光度，绘制标准曲线或建立回归方程去土壤浸体液和试剂空白液各10毫升入试管中，加入0.8毫升10%硫酸， 摇匀以试剂空白作参比，分别于210纳米和275纳米处测定吸光度，不要每 测一个样品改变一次波长，以避免逐次改变波长而引入波长重现性误差若土 壤浸体液吸光度太大，可用氯化钠溶液稀释，但应按比例加入硫酸溶液测定时，向比色皿中加入待测液不要超过容积3.结果计算根据测得A210和A275，按下式计算硝态氮的吸光度厶A△ A=A210-fxA275由厶A从工作曲线上查得相应浓度，乘以液土比和稀释倍数，即为土壤硝 态氮含量。

式中f为校正因数，本实验取值为3.6五. 问题讨论1.为什么标准曲线溶液不加入试剂空白？标准定容后，再加2 毫升 10％硫 酸溶液，对测定结果有没有影响？。