菊苣水提取物干预高嘌呤饮食诱导的鹌鹑尿酸及脂代谢紊乱的实验研究.doc

1菊苣水提取物干预高嘌呤饮食诱导的鹌鹑尿酸及脂代谢紊乱的实验研究作者：杨红莲,张冰, 刘小青 ,林志健【摘要 】 目的 观察菊苣水提取物对高嘌呤饮食诱导的鹌鹑尿酸(UA)、脂代谢紊乱的影响 ,并探讨其作用机制方法 鹌鹑按体重随机分为 5 组：正常组、模型组、阳性药组及菊苣水提取物大、小剂量组, 每组 15 只正常组给予普通饲料 ,其余各组均予以造模饲料阳性药组予苯溴马隆按 20 mg/(kg·d)灌胃,菊苣水提取物大、小剂量组分别予 15、l0 g/(kg·d)灌胃, 正常组与模型组予等体积蒸馏水灌胃, 每日 1 次7 d 后检测 UA、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC) 、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白 (LDL)水平及尿酸代谢相关酶黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶 (ADA)、鸟嘌呤脱氨酶(GD) 活性结果 与正常组比较,模型组 UA、TG、FFA 显著升高,HDL 显著降低；与模型组比较, 菊苣水提取物大、小剂量组可显著降低血 UA、TG 、FFA 水平模型组 GD 活性较正常组显著升高,菊苣水提取物大、小剂量组可显著降低 GD 活性；各组 XOD 与ADA 活性比较差异无统计学意义。

结论 菊苣水提取物具有明显的调节尿酸、脂代谢紊乱的作用,可能的机理是通过降低 GD 活性而降低 UA 水平, 通过降低 UA、FFA 水平从而降低 TG 水平 2【关键词】 菊苣；高嘌呤饮食；尿酸；脂代谢；鹌鹑Abstract：Objective To observe the influence of Cichorii extract on uric acid and lipid metabolic disorder and discuss the mechanism. Methods Quails were divided randomly into 5 groups by weight：normal group, model group, positive control group and Cichorii extract high and low dosage group, 15 quails in each group. The normal group was fed with the common feeder, and the other groups were fed with the yeast powder. Positive control group was given Benzbromarone 20 mg/(kg·d). Cichorii extract high and low dosage group were given Cichorii extract 15, 10 g/(kg·d) respectively. Normal and model group were given distilled water. UA, TG, FFA, TC, HDL, LDL level and XOD, ADA, GD activity related to uric acid metabolism were determined after 7 days. Results Compared with normal group, UA, TG, FFA of model group was significantly higher and HDL was significantly lower. Compared with model, Cichorii extract decreased UA, TG, FFA significantly. GD activity in model group increased significantly. Cichorii extract decreased GD activity. There was no significant variance of XOD and ADA activity in each group. Conclusion Cichorii extract had 3obvious effect in adjusting uric acid and lipid metabolic disorder. The possible mechanism was by decreasing GD activity and decreasing UA, FFA level.Key words：Cichorii extract；high-purine diet；uric acid；lipid metabolism；quail菊苣出自《新疆中草药手册》,系维吾尔族习用药材,为菊科植物菊苣 Cichorium intybus L．的干燥地上部分或根。

本课题组对菊苣进行了 10 余年的研究,相继对菊苣醇提物、水提物的药理活性作了观察,发现菊苣不同提取物对模型动物尿酸、脂、糖代谢紊乱有一定的调节作用[1-2]近年来, 由于高脂高嘌呤饮食摄入增多,高尿酸血症和高脂血症的发病率明显升高这两种疾病均被认为是心血管病的危险因子[3-4]本实验通过模拟人类发病途径喂饲鹌鹑高嘌呤食饵,建立尿酸(UA)及血脂紊乱模型在此基础上通过预防性给予菊苣水提取物,探讨其调节 UA 及血脂代谢紊乱的作用机制1 实验材料1.1 动物4迪法克鹌鹑, 雄性,体重(200±10)g,5 周龄,购自北京市种禽公司德岭鹌鹑厂1.2 药物与试剂造模剂：进口酵母干粉,批号 B823252-3,英国 OXOID 公司；阳性对照药：苯溴马隆,批号 060346,德国赫曼大药厂,药品注册证号X20000142；菊苣水提取物：本课题组提取；检测试剂盒：UA 试剂盒, 批号 80213A811；三酰甘油(TG) 试剂盒, 批号 80331C011；总胆固醇(TC) 试剂盒,批号 70710G011；高密度脂蛋白(HDL) 试剂盒, 批号 70306A011、低密度脂蛋白(LDL)试剂盒 ,批号 70427D021,均购自北京利德曼生化技术有限公司。

腺苷脱氨酶(ADA)试剂盒,批号070528、黄嘌呤氧化酶(XOD)试剂盒, 批号 071012、鸟嘌呤脱氨酶(GD)试剂盒, 批号 070916、游离脂肪酸(FFA)试剂盒,批号20070118,均购自南京建成生物研究所1.3 仪器贝克曼 CX4 型全自动生化分析仪；法国 JOUAN 公司恒温高速离心机；北京医疗设备厂恒温水浴箱；江西医疗器械厂液体快速混合器；ZHWY 200B 型恒温摇床,Sunon Wealth Elec Machine5有限公司产品；Centrifuge 5415D 台式离心机,德国 Eppendorf 产品；上海光谱仪器有限公司 752 型 Spectum 紫外可见分光光度计；北京天鹅衡器厂电子天平2 实验方法2.1 分组与给药鹌鹑按体重随机分为正常组、模型组、阳性药组和菊苣水提取物大、小剂量组,每组 15 只正常组给予普通饲料 ,其余各组均按文献[5]方法予以造模饲料, 自由饮食饮水阳性药组用苯溴马隆按 20 mg/(kg·d)灌胃,菊苣水提取物大、小剂量组分别按 15、l0 g/(kg·d)灌胃, 正常组、模型组予等体积蒸馏水灌胃,每日 1 次,连续 7 d。

2.2 检测指标造模 7 d 时, 动物禁食 12 h,于颈静脉取血 1 mL,按 3 000 r/min离心, 分离血清, 以酶比色法检测血清 UA 水平,以终点法检测血清TG、TC 水平；以酶法检测血清 HDL、LDL 水平,以比色法检测血清ADA、 XOD、GD 活性以铜试剂法检测血清 FFA 活性3 统计学方法6采用 SAS8.2 进行统计分析,2 组间均数比较,先进行方差齐性检验若方差齐,组间数据采用 t 检验,若 2 组总体方差不齐, 进行 t’ 检验, 数据以 x±s 表示,以 P＜0.05 为有统计学意义4 结果(见表 1～表 3)表 1 菊苣水提取物对鹌鹑血清 UA、FFA 水平的影响(略 ) 注：与正常组比较 ,#P＜0.05,##P＜0.001；与模型组比较,*P＜0.05(下同) 表 2 菊苣水提取物对鹌鹑血清XOD、ADA、GD 活性的影响(略)表 3 菊苣水提取物对鹌鹑血清TG、TC 、HDL、LDL 水平的影响( 略)5 讨论大量研究表明,高尿酸血症与血脂异常密切相关[6],血 UA 水平与 TG 水平呈显著正相关, 与 HDL 呈显著负相关[7-8],与 LDL、TC相关性的报道不一致。

有资料显示,约 2/3 高尿酸血症患者伴高脂血症, 约 60%～ 80%高 TG 患者伴发高尿酸血症[9] 本实验用高嘌呤饮食喂饲鹌鹑引起的 UA、血脂代谢紊乱模型 ,表现为模型组UA、TG 均显著高于正常组,HDL 显著低于正常组, 而 TC、LDL 则无显著变化,这种病理变化与临床现象基本相符在此基础上探讨了菊7苣水提取物对 UA、血脂水平的影响 ,为进一步研究菊苣提取物调节UA、血脂代谢紊乱的机制提供依据UA 是人类嘌呤代谢的最终产物嘌呤在人体内主要以嘌呤核苷酸的形式存在嘌呤核苷酸的分解代谢一般先在单核苷酸酶催化下水解生成嘌呤核苷(包括腺苷和鸟苷),腺苷和鸟苷在XOD、ADA、GD 催化下最终生成 UA,因此 ,我们主要从以上 3 种酶探讨菊苣水提取物降 UA 的机理实验结果显示 ,菊苣水提取物大、小剂量对 XOD、ADA 均未见明显影响, 与孔氏等[10]报道结果不一致, 推测可能与两次实验造模时间长短不同有关模型组 GD 显著高于正常组,表明造模 7 d 时血 UA 水平升高与 GD 活性增强导致 UA生成增多有关,菊苣水提取物大、小剂量均可显著降低 GD 活性,推测其降 UA 机理主要是通过抑制 GD 活性实现的。

血脂系指血清和血浆中的脂类成分,主要包括 TG、TC、FFA和磷脂等本实验观察了上述指标的变化情况,结果显示,菊苣水提取物大、小剂量组均可显著降低血 TG、FFA 水平,对 HDL 虽有一定程度的升高作用,与模型组比较差异无统计学意义据有关报道,UA 与FFA 有很好的相关性,升高的血 UA 可能通过 FFA 进一步引起脂代谢紊乱[11],故推测菊苣水提取物调节脂代谢紊乱的机制一方面可通过降低血 UA 使 FFA 水平随之降低 ,另一方面可能与直接降低 FFA 水平有关由于脂肪酸是体内合成 TG 的主要原料,故通过降低血清8FFA 水平 ,使 TG 合成减少 , 从而最终达到纠正脂代谢紊乱的目的由于 UA、血脂代谢涉及到核酸、脂等物质代谢,其机制复杂,而且中药整体综合调节具有多环节、多层次、多靶点的特点,因此,关于菊苣水提取物调节 UA、血脂代谢紊乱的机理有待于进一步探讨参考文献】[1] 张 冰,刘小青. 菊苣提取物对高糖复合高血脂模型兔血浆vWF、 ET 及 PGI2/TXA2 水平的影响[J]. 北京中医药大学学报 ,2000,23(6)：48－50.[2] 张 冰, 刘小青 ,胡京红.菊苣胶囊对糖尿病合并高脂血症兔血糖、血脂、血尿酸的影响[J].中药新药与临床药理,1998,49(9)：221－ 223.[3] Culleton BF, Larson MG, Kannel WB, et al. Serum uric acid and risk for cardiovascular disease and death：the Framingham Heart Study[J]. Ann Intern Med,1999,131：7 －13.[4] Conen D, Wietlisbach V, Bovet P, et al. Prevalence of hyperu。