生物碱类药物分析课件.ppt

第九章第九章 生物碱类药物的分析生物碱类药物的分析生物碱类药物分析•掌握**：生物碱类典型药物的结构特征与性质；特征鉴别试验•了解：其他鉴别反应；其他杂质检查方法；学习目标学习目标生物碱类药物分析第一节第一节￿ ￿典型药物的基本结构与性质典型药物的基本结构与性质一、基本结构和分类（一）苯烃胺类本类药物的结构特征为N在侧链上，为脂肪胺代表药物：盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱生物碱类药物分析盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱性质：性质：1. 1.碱性较强，与酸易成盐；碱性较强，与酸易成盐；**2. 2.手性特征；手性特征；*3. 3.氨基醇结构；氨基醇结构；**4. 4.紫外吸收；紫外吸收；*生物碱类药物分析（二）、托烷类（二）、托烷类•莨菪醇和莨菪酸缩合而成的脂类化合物•代表药物：硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱生物碱类药物分析硫酸阿托品硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱性质：性质：1. 1.碱性较强，与酸易成盐；碱性较强，与酸易成盐；**2. 2.手性特征，阿托品为外消旋体手性特征，阿托品为外消旋体**生物碱类药物分析（三）、（三）、￿ ￿喹啉类喹啉类•苯并吡啶的衍生物（N在α位）•代表药物如硫酸奎宁、硫酸奎尼丁生物碱类药物分析硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁性质：性质：1. 1.两份子药物与一份子两份子药物与一份子二元酸成盐二元酸成盐**2. 2.手性特征；手性特征；*生物碱类药物分析（四）、异喹啉类（四）、异喹啉类•苯并吡啶的衍生物（N在ββ位）•代表性药物如盐酸吗啡、磷酸可待因生物碱类药物分析盐酸吗啡盐酸吗啡磷酸可待因磷酸可待因性质：性质：1. 1.盐酸吗啡具有两性，碱性较盐酸吗啡具有两性，碱性较强强**生物碱类药物分析（五）、（五）、￿ ￿吲哚类吲哚类•本类药物的结构特征为苯并吡咯•代表药物如硝酸士的宁、利血平等生物碱类药物分析硝酸士的宁硝酸士的宁利血平利血平性质：性质：1.N11.N1碱性较强；碱性较强；2. 2.利血平以游离状态存在；利血平以游离状态存在；1 11 12 22 2生物碱类药物分析（六）、黄嘌呤类（六）、黄嘌呤类•咪唑和嘧啶并合的双杂环化合物。

•代表药物如咖啡因、茶碱生物碱类药物分析咖啡因咖啡因茶碱茶碱性质：性质：1. 1.以游离碱存在；以游离碱存在；生物碱类药物分析1. 1. 碱性碱性**** 季季铵铵碱碱＞＞脂脂肪肪胺胺、、脂脂环环胺胺＞＞芳芳胺胺、、N—N—芳芳杂杂环环＞＞酰胺酰胺 麻黄碱、阿托品＞罂粟碱＞咖啡因麻黄碱、阿托品＞罂粟碱＞咖啡因 吗啡具酸碱两性吗啡具酸碱两性 二、生物碱的通性：二、生物碱的通性：生物碱类药物分析2. 2. 旋光性旋光性 一般多为左旋体有效一般多为左旋体有效3. 3. 溶解性溶解性 游游离离生生物物碱碱不不溶溶或或难难溶溶于于水水，，能能溶溶或或易易溶溶于于有有机溶剂，在稀酸中成盐而溶解机溶剂，在稀酸中成盐而溶解 生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂 生物碱类药物分析典型药物典型药物N原子状态原子状态碱性碱性苯胺类苯胺类盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱脂肪仲胺脂肪仲胺N较强（秋水仙碱除较强（秋水仙碱除外）外）托烷类托烷类硫酸阿托品硫酸阿托品氢溴酸东莨菪氢溴酸东莨菪碱碱脂环叔胺脂环叔胺N较强较强喹啉类喹啉类硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁喹啉喹啉N喹核脂环喹核脂环N弱弱较强较强异喹啉类异喹啉类盐酸吗啡盐酸吗啡磷酸可待因磷酸可待因脂环叔胺脂环叔胺N较强，酸碱两性较强，酸碱两性（磷酸可待因没有）（磷酸可待因没有）吲哚类吲哚类硝酸士的宁硝酸士的宁利血平利血平吲哚吲哚N脂环叔胺脂环叔胺N弱弱较强较强黄嘌呤类黄嘌呤类咖啡因咖啡因茶碱茶碱嘌呤嘌呤N（邻位（邻位有羰基）有羰基）极弱极弱生物碱碱性比较生物碱碱性比较**生物碱类药物分析第二节第二节￿ ￿鉴别试验鉴别试验一、性状检查（一）外观：形态、色泽、臭味（二）溶解度生物碱类药物分析（三）物理常数（三）物理常数1.熔点•例：磷酸可待因（05版药典）￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿加入20％NaOH溶液至白色沉淀出现，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，滤过；沉淀用水洗净，在105℃干燥1小时￿，依法测定，熔点为154℃-158℃。

2.比旋度•例：硫酸奎宁，硫酸奎尼丁3.吸收系数生物碱类药物分析（一）显色反应（一）显色反应（二）沉淀反应（二）沉淀反应常用的生物碱沉淀试剂为：常用的生物碱沉淀试剂为：1. 1. 重金属盐类，如重金属盐类，如K K2 2HgIHgI4 4、、KBiIKBiI4 4、、I I2 2—KI—KI、二氯化汞等；、二氯化汞等；2. 2. 大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等生物碱类药物分析•（1）.双缩脲反应￿￿￿￿芳环侧链氨基醇结构的特征反应•盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱蓝紫色蓝紫色生物碱类药物分析（（（（2 2 2 2））））VitaliVitaliVitaliVitali反应反应反应反应•莨菪酸结构的托烷类生物碱的特征反应•硫酸阿托品，氢溴酸东莨菪碱硫酸阿托品加发烟硝酸加发烟硝酸5 5滴滴水浴蒸干水浴蒸干放冷放冷加乙醇加乙醇2 2－－3 3滴润湿滴润湿加固体加固体KOHKOH一粒一粒显深紫色显深紫色生物碱类药物分析（（（（3 3 3 3）绿奎宁反应）绿奎宁反应）绿奎宁反应）绿奎宁反应•C6位含氧喹啉类生物碱•在此生物碱的微酸水溶液中，加微过量溴水或者氯水，再加氨溶液，应呈翠绿色。

硫酸奎宁硫酸奎宁溴水或者氯水溴水或者氯水氨试液氨试液翠绿色翠绿色生物碱类药物分析（（（（4 4 4 4）紫脲酸铵反应）紫脲酸铵反应）紫脲酸铵反应）紫脲酸铵反应•黄嘌呤类生物碱生物碱类药物分析（（5 5））MarquisMarquis反应反应含酚羟基的异喹啉生物碱的特征反应：盐酸吗啡含酚羟基的异喹啉生物碱的特征反应：盐酸吗啡生物碱类药物分析三、三、仪器分析器分析鉴别法法（一）（一）UV（二）（二）IR（三）色（三）色谱生物碱类药物分析第九章￿生物碱类药物的分析第一节￿典型药物的结构和性质一、苯烃胺类￿：1.碱性**￿￿2.手性*￿￿3.氨基醇结构￿**￿4.UV*二、托烷类：1.碱性**￿￿2.阿托品为消旋体**三、喹啉类：1.碱性￿￿**四、异喹啉类：1.盐酸吗啡酸碱两性**五、吲哚类：1.碱性**六、黄嘌呤类：1.游离**第二节￿鉴别试验一、性状检查：外观、溶解度、物理常数二、化学鉴别法1.显色反应；2.沉淀反应3.特征鉴别反应**（1）双缩脲反应；（2）vitaili反应（3）绿奎宁反应（4）紫脲酸铵反应；（5）Marquis反应三、仪器分析法：UV，IR，色谱生物碱类药物分析•掌握**：非水滴定法的原理、应用实例；提取酸碱滴定法的步骤以及常用试剂；•了解：其他实验条件的选择。

学习目标学习目标生物碱类药物分析第三节第三节￿ ￿特殊杂质检查特殊杂质检查一、利用药物和杂质在物理性质上的差异一、利用药物和杂质在物理性质上的差异硫酸奎宁中硫酸奎宁中“氯仿氯仿- -乙醇中不溶物乙醇中不溶物”的检查的检查硫酸阿托品中硫酸阿托品中“莨菪莨菪碱碱”的检查的检查* *利血平中利血平中“氧化产物氧化产物”的检查的检查利用旋光度的差异利用旋光度的差异利用溶解行为的差异利用溶解行为的差异利用对光选择性吸收的差异利用对光选择性吸收的差异生物碱类药物分析二、利用药物和杂质在化学性质上的差异二、利用药物和杂质在化学性质上的差异1 1 1 1、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查本品2 2、盐酸吗啡中罂粟酸的检查、盐酸吗啡中罂粟酸的检查罂粟酸遇三氯化铁显红色罂粟酸遇三氯化铁显红色要求本品加入试剂，不得显红色要求本品加入试剂，不得显红色加水溶解加水溶解加加NaHCO3+NaHCO3+碘试液碘试液加乙醚振摇加乙醚振摇乙醚层不得显红色乙醚层不得显红色水层不得显绿色水层不得显绿色生物碱类药物分析三、色谱法三、色谱法•硫酸奎宁中其它金鸡纳碱的检查￿￿￿￿检查方法：供试品溶液自身稀释对照法•有关物质的检查￿￿￿￿方法：HPLC生物碱类药物分析旋光法旋光法* * 硫酸阿托品（硫酸阿托品（0505版药典）版药典）【【检查检查】】莨菪碱莨菪碱 取本品，按干燥品计算，加水制成每取本品，按干燥品计算，加水制成每1ml￿1ml￿中含中含50mg50mg的溶液，依法测定（附录的溶液，依法测定（附录Ⅵ￿EⅥ￿E），旋光度），旋光度不得过－不得过－0.40°0.40°。

已知莨菪碱的比旋度为已知莨菪碱的比旋度为-32.5￿°￿-32.5￿°￿））求杂质限量是多少？求杂质限量是多少？-0.4°-0.4°-32.5°-32.5°=0.0123g/ml=12.3mg/ml=0.0123g/ml=12.3mg/ml12.312.35050=24.6%=24.6%×100%×100%生物碱类药物分析第四节第四节￿ ￿含量测定含量测定一、非水滴定法（非水碱量法）( (一) )原理和方法•游离生物碱：生成生物碱的高氯酸盐•生物碱盐：置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱的酸 BH+·A- + HClO4BH+·ClO4- + HA生物碱类药物分析（二）测定条件的选择（二）测定条件的选择1.1.适用范围及溶剂的选择适用范围及溶剂的选择K Kb b＞＞1010-10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；时，宜选冰醋酸作为溶剂；K Kb b为为1010-10-10-10-10-12-12时时，，宜宜选选冰冰醋醋酸酸与与醋醋酐酐的的混混合合液液作作为溶剂；为溶剂；K Kb￿b￿＜＜1010 -12-12时，选用醋酐作为溶剂时，选用醋酐作为溶剂生物碱类药物分析2. 2.酸根的影响酸根的影响•酸根在冰醋酸中的酸性：￿￿￿￿￿高氯酸＞氢溴酸＞盐酸＞硫酸＞硝酸＞其它弱酸￿（磷酸、有机酸）•若滴定过程中置换出的HA酸性较强，反应将不能进行到底，需进行一定处理，以排除HA的干扰。

生物碱类药物分析3. 3. 指示终点的方法指示终点的方法 电位法：玻璃电位法：玻璃——甘汞电极系统甘汞电极系统 指示剂法：结晶紫指示剂法：结晶紫生物碱类药物分析（三）、测定实例（三）、测定实例****1、游离弱碱性生物碱药物的含量测定￿（咖啡因）•咖啡因的碱性很弱（pKb为14.1），所以选用酸酐－冰醋酸作为溶剂，可使突跃显著增大•4个N，但只有一个N碱性稍强，故滴定时，1mol的高氯酸相当于1mol的咖啡因生物碱类药物分析（（1 1）一般均预先在溶液中加入）一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 的冰醋酸的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰 ※※理论量理论量1 1～～3 3倍倍 2. 2. 氢卤酸盐的测定氢卤酸盐的测定汞污染汞污染生物碱类药物分析•（2）筛选溶剂，达到终点易观察的目的，同时采用电位法指示终点•（3）部分采用HPLC进行含量测定生物碱类药物分析 取取本本品品约约 0.15g0.15g，，精精密密称称定定，，加加冰冰醋醋酸酸 10ml10ml，，加加热热溶溶解解后后，，加加醋醋酸酸汞汞试试液液 4ml 4ml 与与结结晶晶紫紫指指示示液液 1 1滴滴，，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（（0.1mo1/L0.1mo1/L））滴滴定定至至溶溶液液显显翠翠绿绿色色，，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。

每每 1ml 1ml 高高氯氯酸酸滴滴定定液液（（0.1mol/L0.1mol/L））相相当当于于 20.17mg 20.17mg 的的C C1010H H1515NO· NO· HClHCl盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱 ChP(2005) ChP(2005) 生物碱类药物分析 生生物物碱碱的的硫硫酸酸盐盐，，在在冰冰醋醋酸酸介介质质中中只只能能被被滴滴定定至至生物碱的硫酸氢盐生物碱的硫酸氢盐 3. 3. 硫酸盐的测定硫酸盐的测定生物碱类药物分析（（1 1）硫酸阿托品）硫酸阿托品 HClOHClO4 4直接滴定时，反应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为1∶11∶1生物碱类药物分析（（2 2）硫酸奎宁）硫酸奎宁 HClOHClO4 4直接滴定时，反应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为1∶3 1∶3 （（C C2020H H2424N N2 2O O2 2·H·H+ +））2 2·SO·SO4 42-2-+3HCLO+3HCLO4 4→→（（C C2020H H2424N N2 2O O2 2·2H·2H+ +））·2CLO·2CLO4 4- -+ +（（C C2020H H2424N N2 2O O2 2·2H·2H+ +））·HSO·HSO4 4- -￿·CLO￿·CLO4 4- -生物碱类药物分析 因因HNOHNO3 3具具有有氧氧化化性性，，可可使使指指示示剂剂变变色色，，一一般般电电位位法法指示终点。

如硝酸毛果芸香碱指示终点如硝酸毛果芸香碱4. 4. 硝酸盐的测定硝酸盐的测定生物碱类药物分析无影响，直接测定如磷酸可待因无影响，直接测定如磷酸可待因 5. 5. 磷酸盐及其有机酸盐的测定磷酸盐及其有机酸盐的测定生物碱类药物分析（一）原理与方法 二、提取酸碱滴定法二、提取酸碱滴定法适用于碱性比较强的的药物适用于碱性比较强的的药物分析Pkb=6-9)(Pkb=6-9)生物碱类药物分析1.1.碱化、分离提取碱化、分离提取****生物碱类药物分析2. 2. 滴定滴定**** （（1 1）直接滴定法）直接滴定法 用于碱性较强的生物碱用于碱性较强的生物碱 生物碱类药物分析（（2 2）剩余滴定法）剩余滴定法 用于碱性较弱的生物碱用于碱性较弱的生物碱 生物碱类药物分析（（3 3）提取剩余滴定法）提取剩余滴定法 用于对热不稳定的生物碱用于对热不稳定的生物碱 生物碱类药物分析1.1.碱化试剂碱化试剂 最常用氨水最常用氨水**** 优优点点：：使使大大部部分分生生物物碱碱游游离离，，不不会会和和生生物物碱碱发发生生反应，不易乳化，易挥发，易除去，无干扰。

反应，不易乳化，易挥发，易除去，无干扰二）测定条件的选择生物碱类药物分析2. 2. 提取溶剂提取溶剂 （（1 1）提取溶剂选择的原则）提取溶剂选择的原则 对对生生物物碱碱溶溶解解度度大大，，而而对对其其他他共共存存物物溶溶解解度度尽可能小；与生物碱及碱化试剂不起任何反应尽可能小；与生物碱及碱化试剂不起任何反应2 2）常用的提取溶剂）常用的提取溶剂 最常用氯仿最常用氯仿****生物碱类药物分析3. 3.选择合适的指示剂选择合适的指示剂•要求：变色范围在酸性区域的指示剂；被滴定生物碱的化学计量点，应在选用的指示剂变色范围内药品药品化学计量点化学计量点的的PH值（值（PT值）值）滴定突越的滴定突越的PH值值指示剂指示剂阿托品阿托品5.43.8-7.2甲基红甲基红罂粟碱罂粟碱3.603.8-4.6溴酚蓝溴酚蓝注：甲基红：注：甲基红：4.2-6.34.2-6.3，溴酚蓝：，溴酚蓝：3.0-4.63.0-4.6生物碱类药物分析4. 4.避免乳化避免乳化•措施：采用碱性弱的碱化试剂；选用不易产生乳化的其他有机溶剂；避免猛烈振摇•如果乳化已经出现，则采用以下方法：改变两相体积比；加入少量乙醇；加入无机盐；离心；热敷；加少量酸。

生物碱类药物分析•磷酸可待因糖浆的含量测定￿￿￿￿用内容量移液管，精密量取本品10ml，以水洗出移液管内的附着液，置分液漏斗中，加氨试液使成碱性，用氯仿振摇提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因提尽为止，每次得到的氯仿液均用同一份水10ml￿洗涤，洗液用氯仿5ml￿振摇提取，合并氯仿液，置水浴上蒸干，精密加硫酸滴定液(0.01mol/L)￿25ml，加热溶解，放冷，加甲基红指示液2￿滴，用氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)滴定每1ml￿的硫酸滴定液(0.01mol/L)相当于84.88mg的C18H21NO3·H3PO4·3/2H2O生物碱类药物分析第三节￿特殊杂质检查一、利用物理性质上的差异：旋光性*二、利用化学性质上的差异三、色谱法第四节￿含量测定一、非水溶液滴定法（一）原理和方法**：游离碱，生物碱盐（二）测定条件的选择1.适用范围及溶剂的选择2.酸根的影响3.指示剂方法的选择（三）测定实例**1.游离碱的测定；2.氢卤酸盐的测定；3.硫酸盐的测定；4.硝酸盐的测定；5.磷酸及有机酸盐的测定二、提取酸碱滴定法1.原理和方法：步骤**2.测定条件的选择：碱化试剂**、提取溶剂**、指示剂生物碱类药物分析三、酸性染料比色法三、酸性染料比色法•生物碱与某些酸性染料，在一定PH条件下可定量结合显色，然后用比色法测定含量。

•特点：灵敏度高、方便，并且具有一定专属性和准确性适用于含量较低的样品测定生物碱类药物分析（一）基本原理（一）基本原理•在适当的介质中，BHBH+￿.+￿.In In- -（水相）（水相）B+HB+H+ +￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿BH￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿BH+ +HIn￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿HHIn￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿￿H+ ++In+In- -BHBH+￿.+￿.In In- -（有机相）（有机相）+ +生物碱类药物分析（二）测定条件的选择（二）测定条件的选择※关键：酸性染料与有机碱能否定量的形成离子对，并完全被有机溶剂提取•1.水相最佳PH值的选择：•使生物碱均形成阳离子，且酸性染料电离足够阴离子生物碱类药物分析2. 2.酸性染料酸性染料•种类的要求：与生物碱定量结合；生成的离子对在有机相中溶解度较大，而染料自身在有机相中不溶或很少溶解；生成的离子对有较高吸光度•常用：溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等生物碱类药物分析3. 3.有机溶剂的选择有机溶剂的选择•要求：对离子对的提取率高；不能或极少与水互溶•常用三氯甲烷、二氯甲烷等4.水分的存在￿完全无水生物碱类药物分析5. 5.有色杂质的存在有色杂质的存在•为了防止有色杂质的干扰。

可对酸性染料进行处理：用有机溶剂提取，除去有色杂质生物碱类药物分析Ø 供试品溶液的制备：取本品供试品溶液的制备：取本品2020片，精密称定，研片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品2.5mg￿2.5mg￿），），置置50ml50ml量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，作为供试品溶液至刻度，滤过，取续滤液，作为供试品溶液Ø 对照品溶液的制备：另取硫酸阿托品对照品约对照品溶液的制备：另取硫酸阿托品对照品约25mg25mg，精密称定，置，精密称定，置25ml25ml量瓶中，加水溶解并稀释量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取至刻度，摇匀，精密量取5ml5ml，置，置100ml100ml量瓶中，加量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液 　　例：硫酸阿托品片（例：硫酸阿托品片（05版药典）版药典）生物碱类药物分析测试方法：测试方法： 精密量取供试品溶液与对照品溶液各精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml2ml，分别置，分别置预先精密加入三氯甲烷预先精密加入三氯甲烷10ml10ml的分液漏斗中，各加溴甲的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液酚绿溶液2.0ml2.0ml，振摇提取，振摇提取2￿ 2￿分钟后，静置使分层，分分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外取澄清的三氯甲烷液，照紫外- -可见分光光度法（附可见分光光度法（附录录ⅣAⅣA），在），在420nm420nm的波长处分别测定吸光度，计算，的波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与并将结果与1.027￿1.027￿相乘，即得供试量中含有相乘，即得供试量中含有(C(C1717H H2323NONO3 3) )2 2·H·H2 2SOSO4 4·H·H2 2O O的重量。

的重量生物碱类药物分析(C(C1717H H2323NONO3 3) )2 2·H·H2 2SOSO4 4·H·H2 2O O标示量标示量%=%=Ax/AAx/AR￿R￿×￿C×￿CR R￿×￿50￿×￿1.027￿×￿×￿50￿×￿1.027￿×平均片重平均片重W×W×标示量标示量×100%×100%1.0271.027：质量换算因数，指：质量换算因数，指1g1g无水硫酸阿托品相当于无水硫酸阿托品相当于硫酸阿托品的量由下式求得：硫酸阿托品的量由下式求得：(C(C1717H H2323NONO3 3) )2 2·H·H2 2SOSO4 4·H·H2 2O O的分子量的分子量(C(C1717H H2323NONO3 3) )2 2·H·H2 2SOSO4 4的分子量的分子量=1.027=1.027生物碱类药物分析•四、紫外-可见分光光度法•五、荧光分析法•六、高效液相色谱法生物碱类药物分析生物碱类药物分析。