超高效液相色谱质谱结合主成分分析方法研究制川乌配伍前后的肠内菌代谢差异.docx

          超高效液相色谱质谱结合主成分分析方法研究制川乌配伍前后的肠内菌代谢差异                    李雪�┢ぷ臃� 邢俊鹏 林娜 刘志强 宋凤瑞1引言制川乌（Radix Aconiti Preparata， RAP）为川乌的炮制品，是一种广泛用于治疗风湿性疾病的常用中药，其主要化学成分为二萜类生物碱，该类化合物既是活性成分同时又具有一定的毒性＼[1＼]中医理论常通过配伍的方式达到减毒增效的目的川乌与白芍、川乌与防己配伍是中医治疗风湿痹症的常用药对，前者出自于汉代张仲景的乌头汤，后者最早见于唐代孙思邈的防己汤＼[2＼]近年来，对于乌头与白芍或防己药对配伍减毒增效的机理研究主要集中在镇痛、抗炎和免疫调节等药效学方面＼[3，4＼]，而对于其药理活性成分在发挥药效前生物转化情况却鲜有报道经口服给药的中药在到达靶器官之前，其中的化学成分可能受到肠内菌群的作用而发生生物转化＼[5＼]因此，药物经肠内菌的代谢研究对阐明其生理作用机制具有重要意义但是由于中药化学成分的复杂性及代谢产物的多样性，多组样品代谢后差异的分析面临着巨大的挑战本研究采用UPLCMS技术对制川乌单煎液、制川乌白芍共煎液、及制川乌防己共煎液在大鼠肠内菌中代谢前后的乌头类生物碱及其代谢产物进行了高效的分离鉴定，进而采用主成分分析方法对液质数据进行分析。

首次从整体原型及代谢产物的角度分析了白芍、防己对制川乌肠内菌生物转化的影响，为阐明制川乌与白芍、防己配伍后减毒增效机理提供了新的依据2实验部分2.1仪器与试剂Accela UPLC高效液相色谱系统串联FinniganLTQ XL离子阱质谱仪（美国Thermo公司产品），配备ESI电喷雾离子源； 手套式厌氧培养箱（美国Thermo公司产品）制川乌（四川江油）； 白芍、防己（长春市吉林大药房）； 利血平（美国Sigma公司）； GAM培养基（日本日水公司）； 甲醇、乙腈（色谱纯，英国Fisher Scientific公司）； 乙酸乙酯（分析纯，北京试剂厂）； 去离子水由Millipore纯水仪制备 1引言制川乌（Radix Aconiti Preparata， RAP）为川乌的炮制品，是一种广泛用于治疗风湿性疾病的常用中药，其主要化学成分为二萜类生物碱，该类化合物既是活性成分同时又具有一定的毒性＼[1＼]中医理论常通过配伍的方式达到减毒增效的目的川乌与白芍、川乌与防己配伍是中医治疗风湿痹症的常用药对，前者出自于汉代张仲景的乌头汤，后者最早见于唐代孙思邈的防己汤＼[2＼]近年来，对于乌头与白芍或防己药对配伍减毒增效的机理研究主要集中在镇痛、抗炎和免疫调节等药效学方面＼[3，4＼]，而对于其药理活性成分在发挥药效前生物转化情况却鲜有报道。

经口服给药的中药在到达靶器官之前，其中的化学成分可能受到肠内菌群的作用而发生生物转化＼[5＼]因此，药物经肠内菌的代谢研究对阐明其生理作用机制具有重要意义但是由于中药化学成分的复杂性及代谢产物的多样性，多组样品代谢后差异的分析面临着巨大的挑战本研究采用UPLCMS技术对制川乌单煎液、制川乌白芍共煎液、及制川乌防己共煎液在大鼠肠内菌中代谢前后的乌头类生物碱及其代谢产物进行了高效的分离鉴定，进而采用主成分分析方法对液质数据进行分析首次从整体原型及代谢产物的角度分析了白芍、防己对制川乌肠内菌生物转化的影响，为阐明制川乌与白芍、防己配伍后减毒增效机理提供了新的依据2实验部分2.1仪器与试剂Accela UPLC高效液相色谱系统串联FinniganLTQ XL离子阱质谱仪（美国Thermo公司产品），配备ESI电喷雾离子源； 手套式厌氧培养箱（美国Thermo公司产品）制川乌（四川江油）； 白芍、防己（长春市吉林大药房）； 利血平（美国Sigma公司）； GAM培养基（日本日水公司）； 甲醇、乙腈（色谱纯，英国Fisher Scientific公司）； 乙酸乙酯（分析纯，北京试剂厂）； 去离子水由Millipore纯水仪制备。

1引言制川乌（Radix Aconiti Preparata， RAP）为川乌的炮制品，是一种广泛用于治疗风湿性疾病的常用中药，其主要化学成分为二萜类生物碱，该类化合物既是活性成分同时又具有一定的毒性＼[1＼]中医理论常通过配伍的方式达到减毒增效的目的川乌与白芍、川乌与防己配伍是中医治疗风湿痹症的常用药对，前者出自于汉代张仲景的乌头汤，后者最早见于唐代孙思邈的防己汤＼[2＼]近年来，对于乌头与白芍或防己药对配伍减毒增效的机理研究主要集中在镇痛、抗炎和免疫调节等药效学方面＼[3，4＼]，而对于其药理活性成分在发挥药效前生物转化情况却鲜有报道经口服给药的中药在到达靶器官之前，其中的化学成分可能受到肠内菌群的作用而发生生物转化＼[5＼]因此，药物经肠内菌的代谢研究对阐明其生理作用机制具有重要意义但是由于中药化学成分的复杂性及代谢产物的多样性，多组样品代谢后差异的分析面临着巨大的挑战本研究采用UPLCMS技术对制川乌单煎液、制川乌白芍共煎液、及制川乌防己共煎液在大鼠肠内菌中代谢前后的乌头类生物碱及其代谢产物进行了高效的分离鉴定，进而采用主成分分析方法对液质数据进行分析首次从整体原型及代谢产物的角度分析了白芍、防己对制川乌肠内菌生物转化的影响，为阐明制川乌与白芍、防己配伍后减毒增效机理提供了新的依据。

2实验部分2.1仪器与试剂Accela UPLC高效液相色谱系统串联FinniganLTQ XL离子阱质谱仪（美国Thermo公司产品），配备ESI电喷雾离子源； 手套式厌氧培养箱（美国Thermo公司产品）制川乌（四川江油）； 白芍、防己（长春市吉林大药房）； 利血平（美国Sigma公司）； GAM培养基（日本日水公司）； 甲醇、乙腈（色谱纯，英国Fisher Scientific公司）； 乙酸乙酯（分析纯，北京试剂厂）； 去离子水由Millipore纯水仪制备   -全文完-。