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mTORC1信号通路及其与糖尿病的相关研究进展 吴迪　刘江华【摘要】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mechanistic target of rapamycin，mTOR）是属于PIKKs激酶家族成员的一种高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，通过形成2种独特的多蛋白复合物mTORC1和mTORC2发挥其调控细胞各项功能的重要作用近年来，mTORC1信号通路因其与生物合成、细胞自噬、介导免疫等过程密切相关而备受关注本文就近年来mTORC1信号通路及其与糖尿病的相关研究作一综述关键词】mTORC1；信号通路；糖尿病；细胞免疫R587.2 A ISSN.2095-6681.2018.07..041 mTORC1的简介1.1 mTORC1的结构与功能mTORC1（mechanistic target of rapamycin complex 1）是由哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR、mTOR调节相关蛋白Raptor、哺乳动物LST8同源蛋白mLST8、富脯氨酸AKT底物1-PRAS40和含DEP结构域的mTOR交互蛋白DEPTOR这5种物质构成的多蛋白复合物[1]其主要作用包括促进细胞的生物合成、细胞生长增殖、营养物质的吸收、抑制细胞自噬等，同时其活性受到来自雷帕霉素、胰岛素、生长因子、某些特定氨基酸及其衍生物、理化因素等一系列因素的严格控制[2]。

1.2 mTORC1信号通路1.2.1 mTORC1上游信号转导与调节PI3K-Akt通路：胰岛素样生长因子可通过络氨酸激酶受体RTK激活PI3K-Akt信号通路，使Akt分别于丝氨酸残基939、丝氨酸残基981、苏氨酸残基1462磷酸化结节硬化复合物2（Tuberous Sclerosis Complex 2，TSC2）[3]这些TSC2的磷酸化的位点可以破坏TSC1/TSC2二聚体，使TSC2与TSC1不再相关联，TSC2失去其GTP酶活化蛋白（GTPase activating protein，GAP）的活性，解除其对Rheb-GTP的水解作用mTORC1必须通过活性小G蛋白Ras同源蛋白（RHeb）激活，从而经胰岛素信号通路合成蛋白[4]Akt也可以磷酸化PRAS40，使其从mTORC1中的Raptor上脱落，消除其阻碍Raptor与mTORC1的2个底物4EBP1和S6K结合的作用，从而达到激活mTORC1的目的MAPK/ERK通路：有丝分裂原，如胰岛素样生长因子IGF-1可以激活MAPK/ERK通路，抑制TSC1/TSC2复合体，活化mTORC1[5]当生长因子与临近的络氨酸激酶受体RTK结合时，接头蛋白GRB2结合其SH2结构域，从而募集了能够激活G蛋白RAS的鸟苷酸交换因子Sos。

RAS可以激活RAS-RAF-MEK-ERK级联信号转导[6]，最终使ERK磷酸化TSC2丝氨酸残基644，激活核糖体S6激酶RSK使其磷酸化TSC2丝氨酸残基1798这些磷酸化反应可以导致TSC1/TSC2二聚体的分裂，阻止其去活化Rheb，保持mTORC1活性有相关实验表明，RSK可以磷酸化Raptor，帮助其抵抗PRAS40的抑制作用[7]Wnt通路：Wnt通路参与了生物体细胞生长和增殖的调控，有研究表明该通路的激活和mTORC1的激活密切相关，Wnt通路的激活可以抑制糖原激酶GSK3B[8]当Wnt通路失活时，GSK3B可以使TSC2在丝氨酸残基1341/1337位点磷酸化，同时磷酸化AMPK丝氨酸残基1345位点，而研究表明AMPK的磷酸化是GSK3B磷酸化TSC2的必要前提条件，因此Wnt通路也参与了mTORC1信号通路的调控，也正因为如此mTORC1可以促进生物体内的蛋白质合成[8]细胞因子：如TNF-α可以通过IKK2诱导mTOR的激活[9]IKK2可以使TSC1在丝氨酸残基487/511位点的磷酸化，从而使TSC异二聚体复合物分裂，保持Rheb-GTP结合状态能量代谢：翻译需要消耗大量的能量，特别是ATP的消耗巨大。

如果ATP消耗过多，水解生成大量的AMP，AMP/ATP比例失衡，就会导致AMPK的激活AMPK，即AMP依赖的蛋白激酶，是生物能量代谢调节的关键分子，是研究糖尿病及其他代谢相关疾病的核心它表达于各种代谢相关的器官中，能被机体的运动、多种激素、细胞压力以及影响细胞代谢物质等各种刺激激活相关研究表明，AMPK是机体保持葡萄糖平衡所必需的，其激活能改善由2型糖尿病引起的代谢失衡[10]AMPK可以磷酸化TSC2丝氨酸残基1387位点，激活其复合物的GAP活性，将Rheb-GTP水解为Rheb-GDP通过该途径可以使mTORC1失活，阻碍蛋白质的合成AMPK还可以磷酸化Raptor的2个丝氨酸残基位点被磷酸化的Raptor可以招募14-3-3蛋白与之结合，使其可以游离于mTORC1复合体之外缺少了Raptor的无法招募底物，就无法通过mTORC1合成蛋白质另外，肿瘤抑制因子丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶STK11也可以激活AMPK深入mTORC1在这方面的研究可能有助于阐明其与肿瘤紧密联系的机制[11]低氧应激：當细胞处于低氧环境下时，细胞会通过限制蛋白质的合成以减少能量的消耗，低氧诱导因子HIF1α可以稳定并激活REDD1的转录。

REDD1蛋白能与TSC2相结合，阻碍14-3-3蛋白对TSC复合体的抑制作用，保持其GAP活性，维持Rheb与GDP的结合形式，从而抑制mTORC1的活性此外，在低氧环境下，线粒体ATP合成减少，AMPK活性增加，进而抑制mTORC1活性[12]1.2.2 mTORC1下游信号转导与调节mTORC1主要通过磷酸化下游的真核转录起始因子4E结合蛋白1（4E-BP1）和p70 S6 kinase 1（S6K1）[13]，激活mRNA5端的翻译起始复合物，进而激活翻译，调控细胞的增殖分化、自噬与调亡等4E-BP1：活性mTORC1可以磷酸化翻译抑制因子4E-BP1，将其从真核转译起始因子eIF4E中释放出来，然后eIF4E便与eIF4A和eIF4G相结合[14]解旋酶会移除mRNA的5-UTR区域的5个茎环结构以防止蛋白质过早的翻译，随后翻译起始复合物在5端帽状结构形成，开始招募小核糖体亚基40S并扫描AUG起始密码子起始位点[15]当核糖体接触AUG密码子翻译开始S6K：去磷酸化的S6K位于eIF3支架复合体上，活性mTORC1被征募至该支架复合体上然后磷酸化S6K使其激活[1]mTORC1至少磷酸化S6K1的2个氨基酸残基，其中最关键的一个修饰位于苏氨酸残基（T389）上[16]。

mTORC1磷酸化S6K1又可以刺激PDK1磷酸化S6K1活性S6K1可以通过激活S6核糖体蛋白（核糖体的一个组成部分）和eIF4B并使它们被招募形成转录前起始复合物PIC[17]S6K1也可以通过磷酸化mTORC1负调控区域的2个位点参与mTORC1的正反馈调节刺激mTORC1的活性S6K1还可以磷酸化泛素酶β-TrCP（BTRC）降解作用的标记物程序性细胞死亡蛋白4（PDCD4），PDCD4是一个肿瘤抑制因子，它可以通过与eIF4A相结合避免参与形成转录起始复合物[18]2 mTORC1与糖尿病2.1 mTORC1与胰岛β细胞在胰岛β细胞中，mTORC1和mTORC2扮演着各自独特的角色，活性mTORC1通过调节Cyclin D2的合成与稳定性来调控β细胞的生长、增殖[19]有研究报道对雄性肥沙鼠使用雷帕霉素rapamycin的长期治疗可以导致增加胰岛β细胞凋亡和渐进性高血糖[20]mTORC1的激活可以促进胰岛β细胞分泌胰岛素降低血糖近年来，不断有研究表明mTORC1在调控胰岛β细胞功能上存在着两面性，比如在对TSC2敲除小鼠的研究中发现，幼年小鼠表现为β细胞数量增加，出现低血糖和高胰岛素血症，但在老龄小鼠则表现为β细胞数量减少，出现渐进性高血糖和低胰岛素血症[21]。

S6K可以在不增加胰岛β细胞数量的前提下，通过增加胰岛素分泌，提高糖耐量，这表明mTORC1主要通过S6K通路调控胰岛素分泌[22]此外，有相关研究表明β细胞在2型糖尿病中因氧化应激与内质网应激所导致的胰岛素合成、分泌异常增多和β细胞凋亡也与mTORC1相关[23]2.2 mTORC1与糖代谢mTORC1除了能直接通过影响胰岛β细胞的生长、增殖参与到血糖的调控中来，还能通过S6K1途径调控HIF1α和胆固醇调节元件结合蛋白SREBP1和SREBP2参与调控糖代谢[24]HIF1α可以促进己糖激酶、葡糖糖转运蛋白1、乳酸脱氢酶等基因的表达，促进葡萄糖的吸收与利用mTORC1对α-酮戊二酸脱氢酶也有抑制其活性的作用[25]2.3 mTORC1与自噬自噬是真核细胞的主要降解途径，细胞必须通过自噬完成从细胞质中移除受损细胞器、蛋白质和小细胞碎片，回收老化、损伤材料，将它们分解然后合成新的细胞结构[26]自噬也可以清除蛋白质聚集体和破坏细胞器，导致细胞功能障碍mTORC1在激活后可以磷酸化自噬相关蛋白Atg13，阻止其与Atg1、Atg17、Atg101形成ULK1复合物[27]，进而阻止细胞质膜上ULK1复合物参与自噬体前体的形成，抑制自噬[28]。

mTORC1抑制自噬的同时刺激蛋白质合成及细胞生长可能导致受损蛋白质和细胞器的积累，进而造成细胞水平的损害[29]正常自噬过程中出现的问题与糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病和癌症有关有不少研究表明，胰岛β细胞自噬基因Atg7的缺失，能导致自噬作用减弱，血清胰岛素水平下降，糖耐量减低[30]糖尿病模型诱导药物链脲佐菌素STZ能在作用早期增加自噬相关蛋白LC3-VMP1和Beclin-1-VMP1的表达，说明自噬对药物实验早期胰岛β细胞具有保护作用[31]但是，不同程度的自噬，对胰岛β细胞产生的影响也不尽相同，如2型糖尿病患者中自噬体和自噬泡的累积能引起胰岛β细胞的死亡增加[32]尽管自噬对胰岛β细胞作用并不十分明确，但可以肯定的是mTORC1—自噬—胰岛β细胞3者之間联系密切2.4 mTORC1与细胞免疫及T1DM雷帕霉素在临床上常作为免疫抑制剂用于抑制T细胞和B细胞的增殖，但是其对mTORC1的抑制作用常常导致生成更多功能更强的记忆T细胞雷帕霉素对mTORC1的抑制作用不仅能提高T细胞增殖期初始T细胞转变为记忆T细胞前体的能力[33]，还可以促进记忆T细胞在收缩期分化为成熟的T细胞[34]。

有趣的是，雷帕霉素对mTORC1的抑制可以增加老龄小鼠B细胞数量，增强免疫力[35]雷帕霉素抑制免疫系统的矛盾现象与多个因素有关，其中包括了与调节性T细胞Treg的相互作用[34]在过去，mTOR一直被认为是免疫细胞的一个抑制因子，但随后不断有研究表明mTORC1可以促进Treg的生成，增强T细胞抑制免疫的作用，并且mTORC1参与调控的胆固醇和脂质代谢和Treg产生的免疫抑制分子CTLA4和ICOS也存在着一定联系[36]目前认为，1型糖尿病是一种以抗原呈递细胞APC和T细胞为介导的自身免疫性疾病，其发病有赖于T细胞（CD4+和CD8+）所表达的抗β细胞抗原反应，CD8+T细胞是启动自身免疫反应的必备条件，而活化的CD4+T细胞则是引起T1DM的必备条件，促炎细胞因子是β细胞的中介因子已有研究表明，敲除Rheb基因或以雷帕霉素抑制CD4+T细胞的mTORC1活性，可以抑制Th1、Th17细胞分化，促进Th2细胞分化[37]因此可以推断mTORC1与1型糖尿病之间存在着某种联系3 結 语mTORC1活性受细胞内多种信号调控，其中细胞因子、能量代谢、细胞环境等信号主要经由TSC1/TSC2-Rheb途径传递。

氨基酸等营养分子类信号激活mTORC1的机制尚不十分清。