果蝇唾腺染色体标本的制作与观察PPT课件.ppt

实验四果蝇唾腺染色体标本的制作与观察一.￿实验目的￿1.￿学习果蝇唾腺染色体标本的制作方法2.￿观察果蝇唾腺染色体的特征 唾腺染色体(Salivary chromosome) 双翅类昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞中具有相当于普通染色体100－150倍的巨大染色体，被称为唾腺染色体唾腺染色体经过多次复制而不分开，约有1000－4000根染色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体(polytene chromosomes)二.￿实验原理The entire set of polytene chromosomes in one Drosophila salivary cell. 特征   R巨大；R体细胞配对，染色体只有半数（n）；R各染色体的异染色质多的着丝粒部分 互 相 靠 拢 形 成 染 色 中 心(chromocenter)；R深浅不同、疏密个别的横纹（Band)染色质丝的不同部位螺旋化程度不同，其中螺旋化程度较高的部位形成染色粒（chromomere），这些染色粒经多线染色体的“放大”，形成染色较深的横纹（band）横纹的相对大小和空间排列是恒定的，可以作为天然的精确基因定位的“坐标”。

    1935年Calvin B Bridges绘制了第一张比较完整的果蝇唾腺染色体的细胞学图banded chromosomes  1000x多线染色体是研究重复、倒位、易位、缺失等染色体畸变的好材料 An active region of transcription  producing  a "puff"  in  a  Drosophila polytene chromosome.  This series of time-lapse photographs shows how puffs arise and recede in the polytene chromosomes of Drosophila during larval development. Chromosome puffs 膨突：转录活跃区￿ 三.￿实验材料生物学材料黑腹果蝇的三龄幼虫用具和药品显微镜、解剖针卡宝品红染色液、1N HCl、生理盐水四.￿实验步骤 1. 剥离唾腺：       在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫置于载玻片上每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。

由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的脂肪剥离干净     果蝇三龄幼虫解剖图Salivary gland：唾腺Gonad: 性腺Ganglion: 神经节Trachea: 气管Ovary：卵巢Intestine：肠剥取唾液腺的步骤唾腺的位置及形态特征分离出来的果蝇唾腺位置：在幼虫体前约1/3处；形状：形如一对香蕉，上小下大一边常附着带状的不透明的脂肪;颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围组织透明；细胞特征：唾腺上的细胞较大，轮廓清晰，用低倍镜即可清楚看到2.  染色： 吸去生理盐水后，滴加卡宝品红染液染色10min 3. 压片： 染色完成后，盖上干净的盖片将片子放在实验台上，用大拇指用力压住，并横向揉几次注意不要使盖片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉)4. 镜检： 检查你制作的制片，寻找形态良好、分散适中的图象仔细观察各条臂的特点，并拍照记录   五. 结果解析 光学显微镜下可见黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是从染色中心向四周放射状地伸出5长1短共6条臂。

果蝇染色体数为2n＝8其中1号染色体（X染色体）为端着丝粒染色体，其着丝粒附着地一端在染色中心上，另一端游离；2号、3号染色体为中部着丝粒染色体，每条呈“V“伸展两臂，4号染色体很短小，呈点状附在染色中心边缘   。