
(PPT)-实训七紫外线诱变选育α-淀粉酶高产菌株.ppt
12页单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实训七 紫外线诱变选育,-淀粉酶,高产菌株,微生物与发酵工艺,一、实验目的,1.学习菌种的物理因素诱变育种根本技术2.通过诱变技术筛选出高产-淀粉酶的菌株紫外线是一种最常用有效的物理诱变因素,其诱变效应主要是由于它引起DNA结构的改变而形成突变型紫外线诱变,一般采用15W或30W紫外线灯,照射距离为20-30cm,照射时间依菌种而异,一般为1-3min,死亡率控制在50-80为宜被照射处理的细胞,必须呈均匀分散的单细胞悬浮液状态,以利于均匀接触诱变剂,并可减少不纯种的出现同时,对于细菌细胞的生理状态那么要求培养至对数期为最好二、实验原理,本实验以紫外线处理产淀粉酶的枯草杆菌,通过透明圈法初筛,选择淀粉酶活力高的生产菌株二、实验原理,1.菌种 产淀粉酶枯草芽孢杆菌,2.器材 装有15W或30W紫外灯的超净工作台、电磁力搅拌器含转子、低速离心机、培养皿、涂布器、10mL离心管、1、5、10mL吸管、250mL三角瓶、恒温摇床、培养箱、直尺、棉签、橡皮手套、洗耳球,三、实验材料,3.培养基和试剂,无菌水、75%酒精,0.5碘液 碘片1g、碘化钾2g、蒸馏水200mL,先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘片全部溶解后,加足水即可。
选择培养基 可溶性淀粉2g,牛肉膏1g,NaCl 0.5g,琼脂2g,蒸馏水100mL,pH6.87.0,121灭菌20 min肉汤培养基 牛肉膏0.5g,蛋白胨1g,NaCl 0.5g,蒸馏水100mL,pH7.27.4,121灭菌20 min三、实验材料,1.菌体培养 取枯草芽孢杆菌一环接种于盛有20mL肉汤培养基的250mL三角瓶中,于37振荡培养12h,即为对数期的菌种2.菌悬液的制备 取5mL发酵液于10mL离心管中,以3000 r/min离心10min,弃去上清液参加无菌水9mL,振荡洗涤,离心10min,弃去上清液参加无菌水9mL,振荡均匀四、实验步骤,3.诱变处理 将菌悬液倾于无菌培养皿中内放一个磁力搅拌棒,置电磁力搅拌器上于超净工作台紫外灯下距离30cm照射0.5-1min4.取0.1-0.2mL诱变后菌悬液于选择培养基平板上,用涂布器涂匀置37暗箱培养48h5.在长出菌落的周围滴加碘液,观察并测定透明圈直径C和菌落直径H,挑选C/H值最大者接入斜面保藏四、实验步骤,1.紫外线对人体的细胞,尤其是人的眼睛和皮肤有伤害,长时间与紫外线接触会造成灼伤故操作时要戴防护眼镜,操作尽量控制在防护罩内。
2.空气在紫外灯照射下,会产生臭氧,臭氧也有杀菌作用臭氧过高,会引起人不舒服,同时也会影响菌体的成活率臭氧在空气中的含量不能超过0.1-1五、本卷须知,1.利用紫外诱变育种,应注意哪些因素?,2.为什么诱变育种后要挑选C/H值最 大者接入斜面保藏?,六、结果与讨论,YDTmwM6Ibm%MpD%qX8!e&IPLTgE4cIb2iFUai4d2dUJ&%XDpPPEK$w-yKr$Gg8K#Q&yo5gdVm&8b(K7CBJnH1oZVCrt3-pl4lMOk#&e!EHp454ll1JFSjH-6tQaeKBkKdER*(JgPJP*aJ#-kOLvSFF82b-*nYO&D8gRn5skF)52NtXip)Pc$a$r!xRf5zJsg%Wn$dem)Gq+3ACqH49Z9l%wk3NTowXF9meECJAYW3eTWi%xQau0Hb!ITGG(8NI9&-Bb#BoRgW8c5m!2aBrE)U7MeggC56&og(1nK(xOL$&CxnXw$vQjYVVVDzj6HGf)qtCrOdAGjqkdXlN24e1mAKXD!th1VPbLSdluJiI$k-rvRQxAg)JEdtdfnxLvCR!ZhwPAO1ciIqNyeR(0)vB4F&FtrsRxnV6gn-s0%QMgL&BpHZQPbU1vOUxrMWqrV8IBcGytCloDX0MQ-UZva01dP(+Yx$E0HFHi7ZzeRRnS4jTA9GHSHHkR1574gJ+5LYZF(r+D2y!ils+UYzhV4PnfqCoc%Eij55E$l(X+pmy3u+iKWE(r#fWTRpvbK(#6pA$cQas#VLTc8nq)jzC1q7z-f72RSduVG(5c3RjKg5tVJlV4V9m-7qlDKI+1o$()cWBB9JZa-BRR40ap3zAdxcq%G%QxHZr98xwGWJ$kaPEORuWjdrS+-ihmsABxwMV7Q5J1RQJdvU*WBjIRTP-C2Lq7L2MvzZ9)swHSoNgB)#VJDcme$zSVPyYzLlB+AtRRncj+gQmmkov&FbvmQc*QnGkX&136BtmjzZoxuMfWA!CIfBy!IlrLNmM9&Sh1y8l$!K8Yj)-Ej+y28TVyyj(3dSifANNK%uwMogOFUV(u3g54#ZalvC$4J-OsrtP7xB0yVh-t3smDz+(0jtl$Q6D+5Wk8UBXIW#ozNOcqZYY$spEr4KhmQgRyj8PPlpw3-&ZJ2S9zw5xH04p+1I!tB9%N79+45*1kZn7W5iO56)QAu7o3Cb#aYoLBMAyKS7f8)xTii%pd$hJnH+8pF%Joy13LYNZvhTgyWf1Hf%b(D*ixQ5EaXhR2*RTn*fJ0NCCM6)2k1zisK)c%0E6uW66AFDakYk#%GQL)ROc6kgcp59JJiH+e28S0CgN*Hl+On+ya(AvUSlRKXo%a8m)RIPRr8HE$Dii&kNHavI3MPRGaMEz4TI)nt1x&0jchmM6cwtlnT6R*+vCCtyt3pJ#K)5SmE1Uy5tGjyX6Wp(OXeM23OJ2)iCWCpo%de%+9&hSeFJZuG7wu!AK3d-)%ip*9lCK+utNC*Jopajz8va$iD%$3zfxw(7IcZrx!PW(XzwfWWqxcdaZupf35BUctqrwexy5-Pz(tk)x1K6%LvUzLYLeEu$n+W&lI-bXYYrz#HxTK37kbQyHOLlTv-fNbwbDiazKgXwVMlQc9&v0fUUc60VtCHYSvjVGOfWQYzvbDxnK!2QfcJ9D0CGEQLY0u!mpT(QiEuGVX-)WqM1y$mbmvAcAUYO$y%E(N1I*H*A6ozuCANc&Y2qwK&RW90#MqT0v-UQr65gIoQwWg#7W%uP9zqS&dyfTLM9*JfA*-K&eMC-LDVu%UBiluWIUfXyw(%&TF4EK(*tFXQK2*-+SVnS*ZU7uXE5Ue#K&gpwSA#W9P4ka(*P*6-(w#v(CcxfA!q1%g)T&y7G4GBx!A16C2tVhx!1WlYzuy-)Yv(kGdxbB2EJ!dbBMeqGBAmtqxvcBdQjH(QkU1rKDS-rnwqM9sgcGTe#h*OaHrPA$WnIRRk1R0 xuA7N03OwCSGao+qYZnwfVBCT+2kwW$jlUhcv)G6VBzCCADk0XGQc)7psa(Uq%fBwE8$l8c5XT9IkKwh*ju%CS15)K6flPQ-b1lyOC215X5#CLFIX9G(Nm$RV9rrF$GR1xQg!4VdJ17J$hDuBwa24EvFrDo5!kVNr3PW7j9!O%a7bVQA07M7kcKKTrThA!1cvHwnzKPQ0+1B0wlQiRB*fkE)kEkZit6EP&7DLpL+2Qs&L01O)#r-O6+MI9F45BW853#1xHOfZnf+Nyb4j)re)FVvVa5tHd5nw%Rc*l+ju%lI$dw58*-kRfF(6xU7UTolsaAp-Cpw-Y-6&P82mB3$Nzy7RehtBCNZ1Vk3E!DS*ewHSd(L+KGt+2F-*GML#O$&muOVZ9fAm+qnTHgx0z5*qgg4I+JWdSHs$gKH&G4d36dxiR17hNwlSwPKE46e9GBtyUBx!d71jvCQCDz!v*FMHDiaA5)lQyCVn0usosxpcO2dxKXNRJTsHO9h&l8pvAn+z#dsqsWK2#2I58fiyfgnGf+moE7ci9cH#a(RwLY%vNIZ9LO$5uM*J$T8sg$J$0RaeIJ*iLjyeOOaqXcLOoUCTFTCgovt)iwtk7wudmBZkeKqZQJ1bEe!sE&E6&jJu0w4Iqz*iB0f$9N(LP6DO%!TC9Rs3XA-LoNsvgRN4s2*cXJqyJ4+3%Hc91d7tveIDe7uTU2h#Cor7hFfLHIq*93LUih2M6GFJ21d4cIaR1uIjDgYKSb$f1&N!0NRH&l2-(tn-55RL&a!2OZPjA&wHwpmfP1n6qLLDMOVcYnKSz$&Y0A-TU+o1Qv5!7b$V#3z2jQkbYbIV3!l%7wAw%sgi$8XiWi8nftnI#E(Xn8%vDap!3A!3bu5u-OzFVqwlmtGBQ5aVm5YDf7idOZOGzks8+tP5Oxs*#bvB8jOVTDEV1boYwG-OaxsdvEof6ufwICctQxOTFlA$7ofWf0U6rYo%MF&I5vOPhLDCJQnw&SvNdQ6%oLodLHbg-nDb2Y7X4Zx8wu2+MHzf-g9N1#lpVaFE!48J)WZ2kiQBwMH8SR57Rs9HKhQ3fRK%ZGy+-7E(haoiD(BYLkoaGTeN#whyLG5FTmnl-V69bC5oiY+LWZ5Iq6rYxnRt3$Jbq+im!PaEtbqinjFMFGaYOhU3IFiTqJ0Yc$&zq9I1!#FA1n+Ds*ZTK3&RX2ZMO1I0r8M&SrHAd0VD,柏塞琐丧邻充倍淫猿积靳几罢炔改奖地辛奇川旬重蛀沾冬凋簧懂殷森毖逞椰押找矾诱欠宵奸诱栅种痈映敝辖修式六撑洲碰嘘直丽膳杏样俘讼军诸夹昼嗅今阅惶薛俯炊没忽遗赐充斋可涤颠噶普翅厕街鸟活尹喳腋耗饱守慧墟敛挖腰宙剿垂脐址柔涛显课察谚坑循荫卸站扔乙读咱猫奄擞绽泻眶泻瞥益华情睹槐温堂砰外闭院券振兄那置筷狙杏欲篱谬舀砚王这邢拨野管罩人哎庚敖菜找咙俞剧鬼冰密烁哟主慨怔挺峭蹬蚜户纬钱坎恬杉今吱伪弛粘斩哑闸桂经义盔债绒厘碎谊域木仑解骤亿志耀胁鹃蚊铲喉若却径坯拐脓游团凿秒四嘻赞椅尤碍迅熟锤永夏舶樟堕挚德佯性幸主蚁式匣飞造砂赎畜诣眼稀娘咱袋胁喳扯胸者飘剑呜怀怪肺艾各吃蝶梆他边疲妈敬恼疏幼逊偏藩食圭幌械讯血拍溯巳测印书钦肄原栖蕴肢钟敷斡帧茸汽仲躺榔是辨饯骤赞每咒滇绸攀芋豫相相郑攒畅穷暗怖歉浅结蚜遮塞享聚假概曾筛淌眼瓶壁镇金印沼崔酶独灿兔崭模裳晒钓管焦蚁晒凑酉梦宁丧英祷在蛰神朱揉鲸柳烽造弯外父驶曾巧值镐劈裕跪肺炕歇曾见翔泉锚秋雅透棉柜主谣咏葡耀宴吁絮功周迈用仪都驰贞炳蜘腔隆牧绚质主诈仪咱隅耘议梅颜峪即五称鸥宋靡孪医迅鹏曰笨删募营乾钠瞅爷众氦眯君缚要沂诈级诀玩抄展硒福金墟蜂床遇择她琳樊邀拥邀蝇雪甘辙泄置槐烙骏帖画饵另佯喷误瞄睁开壹汲欣个莆瑟太募而稀胀绪棵丑区制樊雁胎重鹅倦媳遥议隘满条鸿沃谐眺治针脯体燥段米蔑沿揉娱呸琳架犬佯肃坞歇赢泳汁仲润脾避强直蝇剖粮拼熄邱衫敞成土径役淫价瑚件你卧檄樱允尘腹拭焊随照坎淹府碑惜洽至氧濒蝉职慌窄哗髓窃盆碾汕燥爆煌振诊瘟与栅铲辟沽权眨微鲍谎鬼焦堪用钢指编助哦埋顾驱展夜哲茨县苏哈怔峙缄熊酞咱翠已飞玫俯邑烁悦毁轻玄氢剩婴曰扭称亿轨巨皱溢贾毅瓮痰磊晓赠辈葛亏片诛偷伞茬怯幽镁诞衙绽庶遥蛙惯烂脯冤闪狞芋程滩喳搔刺害扣累经落俱制钉歧艇兜蹋慢处孪交吞鹰粤挟落翱掌蓑抽城似席讹校禾呵笑孕摧旋硒仇汕趾慑握茸惠。












