酶的特性实验ppt课件.ppt

实验十：酶的特性实验十：酶的特性§实验目的：加深对酶的性质的认识实验目的：加深对酶的性质的认识§实验内容：实验内容：§温度对酶活力的影响温度对酶活力的影响§pH对酶活力的影响对酶活力的影响§酶的激活及抑制剂酶的激活及抑制剂§酶的专注性酶的专注性温度对酶活力的影响温度对酶活力的影响§一、原理：一、原理：§ 酶的催化作用受温度的影响，在最适温的催化作用受温度的影响，在最适温度下，度下，酶的反响速度最高大多数的反响速度最高大多数动物物酶的的最适温度最适温度为37－－40℃，植物，植物酶的最适温度的最适温度为50－－60℃ § 酶对温度的温度的稳定性与其存在方式有关定性与其存在方式有关有些有些酶的枯燥制的枯燥制剂，，虽加加热到到100℃，其活，其活性并无明性并无明显改改动，但在，但在100℃的溶液中却很的溶液中却很快地完全失去活性快地完全失去活性§ 低温能降低或抑制低温能降低或抑制酶的活性，但不能使的活性，但不能使酶失活§二、器材：二、器材：§试管及试管架试管及试管架§恒温水浴恒温水浴§冰浴冰浴§沸水浴沸水浴§三、试剂和资料：三、试剂和资料：§含含0.2﹪淀粉的淀粉的0.3％％NaCl溶液溶液150ml，需新颖，需新颖配制配制 §稀释稀释200倍的唾液倍的唾液50ml：用蒸馏水漱口，以去：用蒸馏水漱口，以去除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释其流入量筒并稀释200倍，混匀备用。

倍，混匀备用§KI－碘溶液－碘溶液50ml：将：将KI20g及碘及碘10g溶于溶于100ml水中运用前稀释水中运用前稀释10倍§四、操作方法：四、操作方法：§ 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色糊精按淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色最简单的糊精遇碘不呈颜色，褐色或红色最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色在不同温度下，淀麦芽糖遇碘也不呈色在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判别合物遇碘呈现的颜色来判别取三支试管，编号后按下表参与试剂：取三支试管，编号后按下表参与试剂：管号管号123淀粉溶液淀粉溶液（（ml））1.51.51.5稀释唾液稀释唾液（（ml））11－－煮沸过的稀释煮沸过的稀释唾液（唾液（ml））－－－－－－§ 摇匀后，将匀后，将1号、号、3号两号两试管放入管放入37 ℃ 恒恒温水浴中，温水浴中，2号号试管放入冰中，管放入冰中，10min后去后去处，〔将，〔将2号管内液体分号管内液体分为两半〕用两半〕用KI－碘－碘溶液来溶液来检验1、、2、、3管内淀粉被唾液淀粉管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。

水解的程度记录并解并解释结果，将果，将2号管剩号管剩下的一半溶液放入下的一半溶液放入37℃水浴中水浴中继续保温保温10min后，再用碘液后，再用碘液实验，，结果如何？果如何？pH对酶活性的影响对酶活性的影响§一、原理一、原理§ 酶的活力受环境酶的活力受环境pH的影响极为显著不同酶的最适的影响极为显著不同酶的最适pH值不值不同本实验察看同本实验察看pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为约为6.8§二、器材二、器材§试管及试管架试管及试管架§吸管吸管§滴管滴管§50ml锥形瓶锥形瓶§恒温水浴恒温水浴§三、试剂和资料三、试剂和资料§新配制的溶于新配制的溶于0.3％％NaCl的的0.5％淀粉溶液％淀粉溶液 250ml§稀释稀释200倍的新颖唾液倍的新颖唾液 100ml§0.2mol/L磷酸氢二钠溶液磷酸氢二钠溶液 600ml§0.1mol/L柠檬酸溶液柠檬酸溶液 400ml§KI－碘溶液－碘溶液 50ml§pH试纸：试纸： pH=5、、 pH=5.8、、 pH=6.8、、 pH=8四种四种§四、操作方法：四、操作方法：§ 取四个取四个标有号有号码的的50ml锥形瓶。

用吸管按下表形瓶用吸管按下表添加添加0.2mol/L磷酸磷酸氢二二钠溶液和溶液和0.1柠檬酸溶液以制檬酸溶液以制备pH5.0－－8.0的四种的四种缓冲液§ 从四个从四个锥形瓶中各取形瓶中各取缓冲液冲液3ml，分，分别注入注入4支支带有号有号码的的试管中，随后于每个管中，随后于每个试管中添加管中添加0.5％淀％淀粉溶液粉溶液2ml和稀和稀释200倍的唾液倍的唾液2ml向各试管中参与管中参与稀稀释唾液的唾液的时间间隔各隔各为1min将各试管内容物混管内容物混匀，并依次置于匀，并依次置于37 ℃恒温水浴中保温恒温水浴中保温§ 第四管参与唾液第四管参与唾液2min后，每隔后，每隔1min由第由第3管取出管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加一滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴小滴KI－碘溶液，－碘溶液，检验淀粉的水解程度待混和液淀粉的水解程度待混和液变为棕黄色棕黄色时，向，向一切一切试管依次添加管依次添加1－－2滴滴KI－碘溶液添加－碘溶液添加KI－碘－碘溶液的溶液的时间间隔从第一管起，亦均隔从第一管起，亦均为1min§ 察看各察看各试管内容物呈管内容物呈现的的颜色，分析色，分析pH对唾唾液淀粉液淀粉酶活性的影响。

活性的影响锥形瓶锥形瓶号码号码0.2mol/L磷酸氢二磷酸氢二钠（钠（ml））0.1 mol/L柠柠檬酸（檬酸（ml））pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.720.288.0唾液淀粉酶的活化和抑制唾液淀粉酶的活化和抑制§一、原理一、原理§ 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响氯离子为唾液淀酶的活性受活化剂或抑制剂的影响氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂§二、器材：二、器材：§恒温水浴恒温水浴§试管及试管架试管及试管架§三、试剂和资料：三、试剂和资料：§0.1％的淀粉溶液％的淀粉溶液 150ml§稀释稀释200倍的新颖唾液倍的新颖唾液 150ml§1％％NaCl溶液溶液 50ml§1％硫酸铜溶液％硫酸铜溶液 50ml§1％硫酸钠溶液％硫酸钠溶液 50ml§KI－碘溶液－碘溶液 100ml §四、操作方法：四、操作方法：管号管号12340.1％的淀粉溶液（％的淀粉溶液（ml））1.51.51.51.5稀释唾液（稀释唾液（ml））0.50.50.50.51％硫酸铜溶液（％硫酸铜溶液（ml））0.5－－－－－－1％％NaCl溶液（溶液（ml））－－0.5－－－－1％硫酸钠溶液（％硫酸钠溶液（ml））－－－－0.5－－蒸馏水（蒸馏水（ml））－－－－－－0.537 ℃恒温水浴、保温恒温水浴、保温10minKI－碘溶液（滴）－碘溶液（滴）2－－32－－32－－32－－3现象现象注：保温时间可根据各人唾液淀粉酶活力调整解释阐明，阐明本实验第3管的意义酶的专注性酶的专注性§一、原理一、原理§ 酶具有高度的专注性。

本实验以唾液酶具有高度的专注性本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用为例，来阐明酶的淀粉酶和蔗糖酶的作用为例，来阐明酶的专注性§ 淀粉和蔗糖无复原性，唾液淀粉酶水淀粉和蔗糖无复原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成由复原性的麦芽糖，但不能催解淀粉生成由复原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解蔗糖酶能催化蔗糖水解产化蔗糖的水解蔗糖酶能催化蔗糖水解产生复原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉生复原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解用的水解用Benedict试剂检查糖的复原性试剂检查糖的复原性§二、器材：二、器材：§恒温水浴恒温水浴§沸水浴沸水浴§试管及试管架试管及试管架§三、试剂和资料：三、试剂和资料：§2％蔗糖溶液％蔗糖溶液 150ml§溶于溶于0.3％％NaCl的的1％淀粉溶液〔需新颖配制〕％淀粉溶液〔需新颖配制〕 150ml§稀释稀释200倍的新颖唾液倍的新颖唾液 100ml§蔗糖酶溶液蔗糖酶溶液 100ml§ 将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤2－－3次〔离心次〔离心〕，然后放在滤纸上自然枯燥。

取干酵母〕，然后放在滤纸上自然枯燥取干酵母100g，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，用力研磨，提取约用力研磨，提取约1h，再加蒸馏水使总体积约，再加蒸馏水使总体积约为原体积的为原体积的10倍离心，将上清液保管于冰箱倍离心，将上清液保管于冰箱中备用§Benedict氏试剂氏试剂 200ml§ 无水硫酸铜无水硫酸铜1.74g溶于溶于100ml热水中，冷却热水中，冷却后稀释至后稀释至150ml取柠檬酸钠取柠檬酸钠173g，无水碳酸钠，无水碳酸钠100g和和600ml水共热，溶解后冷却并加水至水共热，溶解后冷却并加水至850ml再将冷却的再将冷却的150ml硫酸铜溶液倾入本硫酸铜溶液倾入本试剂可长久保管试剂可长久保管§四、操作方法：四、操作方法：§淀粉酶的专注性：淀粉酶的专注性：管号管号1234561％淀粉溶液（滴）％淀粉溶液（滴）4－－4－－4－－2％蔗糖溶液（滴）％蔗糖溶液（滴）－－4－－4－－4稀释唾液（稀释唾液（ml））－－－－11－－－－煮沸过的稀释唾液煮沸过的稀释唾液（（ml））－－－－－－－－11蒸馏水（蒸馏水（ml））11－－－－－－－－37 ℃恒温水浴恒温水浴15minBenedict试剂（试剂（ml））111111沸水浴沸水浴2－－3min现象现象 解释实验结果〔提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶〕解释实验结果〔提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶〕2.蔗糖酶的专注性：蔗糖酶的专注性：管号管号1234561％淀粉溶液（滴）％淀粉溶液（滴）4－－4－－4－－2％蔗糖溶液（滴）％蔗糖溶液（滴）－－4－－4－－4蔗糖酶溶液（蔗糖酶溶液（ml））－－－－11－－－－煮沸过的蔗糖酶溶液煮沸过的蔗糖酶溶液（（ml））－－－－－－－－11蒸馏水（蒸馏水（ml））11－－－－－－－－37 ℃恒温水浴恒温水浴15minBenedict试剂（试剂（ml））111111沸水浴沸水浴2－－3min现象现象 解释实验结果解释实验结果。