《ABO正反定型不符的问题分析及解决办法》.doc

精品文章《ABO正反定型不符的问题分析及解决办法》第一篇：abo正反定型不符的问题分析及解决办法abo正反定型不符的问题分析及解决办法abo正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原abo反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一、引起abo正反定型不一致的原因分析1.技术因素例如（1）试剂贮存不当（2）使用技术错误（3）使用错误的试剂（4）使用污染或失效的试剂（5）离心速度不当2.存在igm性质的自身冷抗体由于自身冷抗体（冷凝集病，chd）而导致自身溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型3.抗原表达弱或缺失例如a.白血病b.双胞胎c.h基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人5.混合视野：例如（1）来自近期输注非abo同型红细胞病人的血样（2）骨髓移植后不久（3）tn或a3型红细胞6.缺失或弱抗-a、抗-b例如（1）新生儿血清（2）免疫缺陷、紊乱病人（3）老年人7.前带现象当抗-a或抗-b的效价（如35000）igg太高时，立即离心法与a或b细胞不反应8.多凝集多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集9.不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。

10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体例如抗防腐剂的抗体、抗edta的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除二、abo正反定型不符的解决方法有以下几个（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤rbc且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型4.了解输血史（尤其是o型红细胞输注）来分析混合视野5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离（二）出现弱反应或缺失抗体例如1.年龄新生儿及老人2.低球蛋白血症如白血病人、使用免疫抑止药物、低球蛋白的恶性淋巴瘤病人、骨髓移植后病人3.丙球缺乏血症：如免疫缺陷病人4.双胞胎嵌合体解决方法有1.延长反应时间2.放在室温检查血清中的抗体用a、b、o及自身红细胞进行检查，用酶处理的a、b、o及自身细胞进行检查可能需要在试验前进行冷抗体的自身吸收3.确定病人年龄以及临床诊断（例如新生儿还有免疫病）有关新生儿血型，这是资格证经常考试的题目例如，6个月大新生儿正定性型是o型，反定型是b型，请问新生儿是什么血型。

答案应该是o型，因为婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲获得的血型抗体，所以新生儿不适合用血清做反定型4.确定输血史（例如非abo同型的血浆输注）（三）出现多余抗原（额外抗原）可能情况有1.抗原发生改变：（1）获得性b：肠道疾病患者，细菌作用导致（2）多凝集现象：红细胞被掘大多数人的正常血清凝集2.红细胞已经被抗体包被例如自家免疫溶血性贫血、输血反应及hdn3.非抗－a及抗－b的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集4.混合视野非同型输注，例如o型红细胞给其他型输用，非abo同型的骨髓移植，a3亚型等5.低频率抗原抗体反应定型血清中的存在低频抗原的抗体，与对应的低频抗原产生阳性反应解决方法有1.将红细胞洗涤再进行试验，确定是否是病人或献血员的血清中存在针对abo定型试剂成分的抗体2.用o型及自身红细胞于室温检查病人血清，确定血清中是否有冷自身抗体，如果有，则用2me或dtt处理3.用不同厂家的试剂检查洗涤的红细胞4.了解病人的临床诊断5.如果怀疑是获得性b，则用酸化的抗-b检查6.进行abh分泌型型物质检查7.如果用多克隆抗-a检查结果是混合视野，则用蛋白酶处理rbc试验，考虑是否是多凝集产生未知抗体反应的可能情况有1.蛋白或血浆不正常引起的缗钱状凝集：血清蛋白浓度异常，球蛋白浓度由于疾病而升高（例如多发性骨髓瘤），原发性巨球蛋白血症，纤维蛋白原浓度升高，血浆扩容剂的使用以及何杰金氏淋巴瘤，新生儿脐血中的华通氏胶。

2.冷反应性自身抗体：存在abo系统的意外抗体例如a2或a2b个体血清中可能存在天然抗－a1，顺式ab人群中弱的抗-b，导致反定型试验多出抗体3.被检者血清中存在abo系统以外的特异性冷同种抗体，反定型时出现假阳性反应解决方法有1.在室温及4℃检查，确定是否存在自身抗体或冷同种抗体2.洗涤红细胞再次进行试验，防止血清中有针对试剂红细胞保存液成分的抗体在37℃定型，去除冷自生抗体干扰后定型，血型物质检测（五）混合视野凝集的解决方法有1.确定是否近期怀孕或输血2.确定临床诊断（尤其是白血病）3.是否是骨髓移植受者4.是否是双胞胎5.用细胞分离术将两群细胞分开，分别定型6.abh型物质检查7.了解输血史第二篇：abo血型正反鉴定结果不符的原因分析大连医科大学xx届本科毕业论文abo血型系统是人类发现的第一个血型系统，也是最重要的血型系统，对临床输血意义重大abo血型系统上有a、b、o、ab四种表型，也存在a亚型、b亚型、ab亚型abo系统抗原则有a、b、ab、a1抗原，在胎儿的第9周就可以检测出来，这些抗原随着个体基因变异或疾病的影响而改变abo血型系统有两个特点：一、人红细胞上缺少某个抗原，血清中就存在针对该抗原的抗体，而且是高效价的；二、不仅红细胞上有abo抗原，分泌型者得分泌液中也存在某抗原[1]。

根据这一特性来判断abo血型临床上，当输入abo血型不相合的血液时，会引起溶血性输血反应[2]，严重时会危及生命为了保障临床输血的安全，对abo血型定型规定做正反定型当正反定型一致时，方可准确确定abo血型但实验中，往往会出现abo正反定型不一致的情况导致abo正反定型不符的原因有很多，有试剂、方法、技术等因素的影响，更重要的是血液免疫因素的影响本文就血液免疫因素方面对abo正反定型的影响进行研究现将武汉血液中心xx年1~4月份健康献血者abo正反定型不一致及1~4月份医院送检的正反定型不符的患者标本进行研究，报告如下一、材料与方法1.1标本来源武汉血液中心1~4月份健康献血者abo正反定型不符标本及1~4月份各医院送检的正反定型不符而进行疑难血型鉴定的标本其中健康献血者80例，患者标本35例1.2主要试剂与器材试剂：抗-a、抗-b标准血清、抗-a1、抗-ab、谱细胞、o型试剂红细胞均为上海血液生物医药有限责任公司，人源性抗-a、抗-b，a、b型试剂红细胞为本输血研究室自制离心机（日本久保田ka2200）；恒温水浴箱（hh60）；显微镜（cktv-2）1.3实验方法1.3.1abo正定型实验取两支试管，分别加入两滴抗-a、抗-b试剂，在各加一滴3-5％受检者红细胞悬液，混匀，3500r/min离心15秒，观察结果。

怀疑为亚型时，再加做抗-ab、抗-h试验1.3.2abo反定型实验取四支试管，先各加入两滴受检者血清，再分别加入一滴a、b、o型试剂红细胞和受检者红细胞悬液，混匀，3500r/min离心15秒，观察结果1.3.3吸收放散及唾液血型物质检测吸收放散用生理盐水将3ml受检者压积红细胞洗涤三次，取洗后的压积红细胞2ml，加入对应的人源性抗血清，4℃下吸收1小时，吸收后用4℃生理盐水洗涤5次，再放于56℃放散10min，数次振荡，3500r/min离心1min，取2滴放散液，加入对应的1滴a、b、o试剂红细胞，混匀，3500r/min离心15秒，观察结果唾液血型物质检测：受检者唾液离心去杂质后，煮沸10min，3500r/min离心5min，以2+凝集强度为标准将抗-a、抗-b标准血清和抗-h标化，取1滴液与标化后的1滴抗-a、抗-b标准血清和抗-h中和，然后加入1滴对应的a、b、o试剂红细胞，混匀，大连医科大学xx届本科毕业论文aboab1抗-jkbbabab1amb亚型：a3babbab1a2b有抗-a1oaa1a亚型：aelobb1b亚型：belabaab2缗钱状凝集aabab3缗钱状凝集aoa1缗钱状凝集bob2缗钱状凝集oao1缗钱状凝集aoa2abo以外抗体阳性，谱细胞无法确定其特异性bob1同上aboab2同上abaab3同上aaba1同上abbab1同上obo1同上表-2健康献血者abo正反定型不符原因在血型分布情况血型例数冷抗体抗原减弱或缺乏抗体减弱或缺乏不规则抗体缗钱状凝集a261211111b23710132o8xx1ab235xx5表-1表-2中，献血者标本中引起正反定型不符的原因。

冷抗体占32.5％（26/80），抗原减弱或缺乏占5％（4/80），抗体减弱或缺乏占1.25％（1/80），不规则抗体占50％（40/80），缗钱状凝集占11.25％（9/80）大连医科大学xx届本科毕业论文三、讨论本文研究排除技术因素及试剂因素对abo正反定型不符的影响笔者对80例abo正反定型不符的健康献血者及35例定型不符的疾病患者进行abo定型、吸收放散、抗体鉴定等实验，对结果分析如下：从表-1中可以看出，在健康献血者中，引起abo正反定型不符的主要原因是冷抗体32.5％（26/80）及不规则抗体50％（40/80）的产生对于冷抗体，实验中将反应试管分别放在37℃水浴箱及4℃冰箱，改变反应温度来确认冷抗体[3]，当冷抗体存在时，可以将试管放于37℃下孵育，去除冷抗体后再准确定型在不规则抗体引起的正反定型不符中，最多的是由于抗-m引起不符，占16.25％（13/80），其次是抗-leb占12.5％（10/80），b这些献血者无输血史及妊娠史，这些抗体属于天然抗体抗-m及抗-le都是不规则抗体，都会引起配血的不合，这类抗体如果在37℃盐水介质和抗人球蛋白反应是阳性，输血时则会产生输血反应[4]。

对于此类献血者建议今后不宜献血，已献的血液适合做洗涤红细胞表-1中还有一例是由于a2b产生抗-a1抗体而引起正反定型不符a型抗原有两种，a、a1，a1型人红细胞上两种抗原都有，a2型人红细胞上只有a抗原[5]，在通常输血前检测试验中，患者与献血者的a1、a2型不必加以区分，除非当a2型或a2b型人血清中有抗-a1抗体存在时[6]22％--26％的a2b个体血清中可以检出抗-al[7]，抗-a1抗体在临床上意义不大，多数在25℃以上无活性，也有几例是由于抗-a1引起的溶血性输血反应[8]对于a2b患者血清中存在抗-a1抗体的输血，应选择a2b亚型血，若无可以选择o型洗涤红细胞本文还有11例正反定型标本，abo以外抗体阳性，但上海谱细胞无法确定其特异性，此种情况可以增加谱细胞数，若仍不能确定特异性，可以采用分子生物学的方法来确定抗体的特异性此外还有9例是由于缗钱状凝集导致正反定型不符，可能与标本使用的抗凝剂有关，edta抗凝剂能阻止补体的活化，补体存在时使反定型出现凝集[9]，导致正反定型的不符4例亚型导致正反定型不符，减弱的抗原可以用吸收放散实验检测出来，它可以将抗原浓缩和粗纯化，灵活运用吸收放散实验可以准确定型[10]。

出现亚型时，正定型加做抗-h、抗-ab，亚型红细胞与抗-ab反应是增强的[11]，检测h抗原的量对亚型鉴定是有帮助的从表-2可以看出，本文研究的80例健康献血者中，a型中出现abo定型不符的例数最多，占32.5％（26/80），其次是b型、ab型，出现定型不符最少的血型是o型可能是由于o血型的人体内无a、b抗原，在抗原方面出现的变异情况少[12]在35例患者标本中，从表-3、4。