输血前传染性疾病指标临床运用.pptx

术前 输血前传染性疾病 指标的临床运用 l 按照卫生部 临床输血技术规范 相关规定 要求对输血前和 手术前 包括产前 患者进行血液传播性疾病的血清指标检测 即乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒抗体 抗HCV 人类免疫缺 陷病毒 型 型 抗体 抗HIV l 2 梅毒抗体 TP 四项传 染性指标 l 我国2012年发布的 中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南 中要求 进行外科手术及侵入性诊疗操作 所有涉及外科操 作的内科 内镜以及妇科 产科 牙科等的常规医疗操作 患 者在进行操作前筛查丙肝病毒抗体 血液透析患者首次血液 透析前应进行丙肝病毒抗体检测 丙肝病毒抗体阴性者在血 透中建议定期 半年 进行丙型病毒性肝炎的筛查 l 这对于避免医源性感染 预防医务人员的职业感染 防止出 现医疗纠纷有积极意义 l 为保障广大人民群众的身体健康 提高人口素质 有效控制病毒性 肝炎 HBV HCV 艾滋病和梅毒等传染性疾病的传播 加强肝 炎 艾滋和梅毒等传染病的预防与控制工作 国家制定了 中华人 民共和国传染病防治法 艾滋病防治条例 及最新的 中国预 防与控制梅毒规划 2010 2020年 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 HBsAg Prevalence 8 High 2 7 Intermediate 2 Low HBVHBV是全球卫生问题 约有是全球卫生问题 约有2020亿人曾感染过乙肝亿人曾感染过乙肝 慢性慢性HBVHBV感染者约有感染者约有3 53 5亿亿 感染率最高的区域在亚洲感染率最高的区域在亚洲 非洲非洲 乙肝全球流行分布图 HBV感染的转归 慢性HBV感染 成年期感染 5 10 肝硬化 肝功能衰竭肝细胞癌 慢性乙型肝炎 5年发生率12 25 5年发生率5 15 5年发生率20 23 肝移植 婴儿期感染85 95 急性HBV 三部曲 慢性乙型肝炎防治指南 2015年版 血清学检测 HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb HBcAb IgM 病原学检测 HBV DNA HBV基因型和变异 指南推荐HBsAg作为HBV感染的标志物 阳性表示HBV 感染 同时明确指出 血清HBsAg定量检测可用于预测 疾病进展 抗病毒疗效和预后 慢性乙型肝炎治疗终点 慢性乙型肝炎防治指南 2015年版 ELISA检测HBsAg的问题 l 定量及溯源性 国产ELISA试剂为定性检测 无法溯源到 WHO国际标准 不能对病人进行动态定量监测 l 精密度 ELISA试剂通过批批检的精密度要求为 CV 15 实验室实际HBsAg测定结果的批间CV一般为25 左右 l 敏感性 目前发现献血员中所发现的HBsAg 携带者最低 含量为0 2 ng ml 国产ELISA试剂的敏感性水平多为 0 5ng ml左右 对极低含量的HBsAg携带者可能出现漏检 ELISA检测HBsAg的问题 l 突变株 S基因发生突变可导致HBsAg的抗原决定簇发生 改变 可影响与相应抗体的结合 从而出现HBsAg假阴性 结果 l 特异性 ELISA影响因素多 采用400nm波长比色 出现 假阳性结果的可能性较大 在弱反应性的标本中更为常见 HBsAg化学发光定量检测 优秀的突变检测能力 混合单克隆抗体 小分子标记物 仪器自动化检测 发光物质稳定 精密度高 10 敏感性高 0 03 0 05IU ml 表面抗原的定量检测是评定乙肝治疗效果的显著预测因素 血清HBsAg定量与cccDNA水平有较好的相关性 判断理 想的治疗终点 HBV cccDNA与HBsAg相关性 cccDNA是乙肝病毒前基因组 RNA复制的原始模板 只有清 除了细胞核内的cccDNA 才 能彻底消除乙肝患者病毒携带 状态 是抗病毒治疗的目标 慢乙肝患者外周血中几乎检测 不到cccDNA 血清HBsAg浓度与cccDNA相 关 New insight on hepatitis B virus persistence from the study of intrahepatic viral cccDNA Journal of Hepatology Volume 42 Issue 3 March 2005 Pages 302 308 最常见的HBsAg突变位点 评估13种常见变异株 ELISA只能检测其中的3种 高敏发光 常见突变位点全部检出 HBsAg定量检测 优势和价值 优势价值 两步法检测 避免HOOK效应结果可靠 减少纠纷 定量检测 单位IU mL抗病毒疗效监测及预测 改善患者预后 W H O 标准品溯源 结果可比 减少重复检查 减轻患者负 担 高灵敏度 0 03 0 05 IU mL 缩短窗口期 改善患者预后及临床满意度 优异的突变检测能力避免漏检 减少纠纷 多基因型检测能力防止漏检 减少纠纷 抗 HBs定性检测 有无应答标志 l机体对乙肝病毒产生抵抗力的标志 l疫苗注射后免疫成功的标志 抗 HBs定量检测 疫苗接种完成后1个月抗体浓度达到高峰 l 无应答者 无抗体产生 5 加强剂量复种 l 低应答者 100 IU L 20 无须复种 乙肝疫苗注射效果评价 定量是应答水平评价标准 血清HBsAb定量可用于评价乙肝疫苗接种的效果 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 HCV 沉默的杀手 全球感染率2 8 中国感染率0 43 慢性化比例高达70 2004 HCV audio web conference Dr ER Schiff Miami University Florida Symptoms Time after Exposure Titer anti HCV ALT Normal 01234561234 YearsMonths HCV RNA HCV Core Ag Symptoms Time after Exposure Titer anti HCV ALT Normal 01234561234 YearsMonths HCV RNA HCV Core Ag Persistent Case 70 Cured Case 30 HCV 感染的典型血清学模式 急性HCV感染被完全治愈急性HCV感染转为慢性感染 急性HCV感染的两种临床结果 血清学模式 2015年版中国丙型肝炎防治指南推荐以 抗 HCV作为HCV感染者的筛查 抗 HCV检测检测的窗口期 3rd generation HCV antibody tests HCV感染 3rd gen 二代试剂82天 一代试剂140 150天 3代试剂70天 强生第三代 Roche Sysmex Abbott Siemens等均为第二代 化学发光与ELISA检测敏感度比较 几种丙肝抗体检测的临床应用评价 现代检验医学杂志 2012 本试验中所有初筛阳 性及三种方法检测不 一致标本均以HCV RNA进行确认 结果 仅有1例HCV RNA为 阴性 其余均为阳性 可能是由于窗口期 导致发光法漏检 无 误诊 而两种ELISA 方法漏检隶属分别为 14例和12例 两例 误诊 RF强阳性 较 严重溶血 高危人群筛查 血透患者 血透患者感染 丙肝屡见报道 为什么血透患者为丙肝高危人群 长期血液透析病人多为慢性肾功能衰竭病人 机体免疫 力低下 免疫系统较难发生免疫应答产生抗体 导致 HCV抗体检测的窗口期延长 对于血透人群只用HCV抗体筛查 会导致大量漏检 增加血透病人感染风险 丙肝血清学图谱 核心抗原检测 12 15天 抗体检测 70天 明显缩短窗口期 有条件建议对高风险人群开展HCV核心抗原检测 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 中国HIV的流行分布 l 截至2013年9月 联合 国艾滋病规划署 UNAIDS 公布中国HIV 感染人数850 000 l 中国艾滋病每天死 8000人 每天新患1 5 万 0 20 30 40 50 60 70 80 90 100 IgG HIV1IgG HIV1 病毒裂解病毒裂解产产产产物物 敏感性敏感性 特异性特异性 无无 IgM IgM 无无 HIV 2HIV 2 1983 85 Sensitivity 2002 P24 IgG IgM HIV1 HIV2 重组抗原 合成多肽 敏感性 99 9 特异性 99 9 第4代 IgG IgM HIV1 HIV2 重组抗原 合成多肽 1994 P24 抗原 IgG HIV1 HIV2 重组抗原 敏感性 特异性 无 IgM 1987 90 第3代 第2代 第1代 敏感性 特异性 HIV 1 O 组组 血清学检测 HIV 技术的进展 01020405060708090100 365 30 1代抗体检测 3代抗体检测 P24抗原检测 4代 Ag Ab检测 17 22 31 窗口期 3 5天 灵敏的 联检 3代HIV抗体EIA HIV p24 Ag p24 Ag EIA 抗HIV抗体 1代 HIV抗体EIA HIV Ag Ab 联合检测缩短窗口期 Adapted from Fiebig et al AIDS 17 1871 1879 2003 感染早期 在HIV抗体产生之前就可以检出HIV p24抗原 HIV抗原抗体 Ag Ab 联检检出HIV感染的时间比HIV抗体检测早3 5天 化学发光与ELISA检测敏感度比较 CLIA ECLIA ELISA 三种不同技术原理的第4代HIV诊断试剂的临床检测性能比较研究 中华检验医学杂志 2013年 雅培 罗氏 佰乐 注 血清转换盘来源于已经确诊HIV感染 且已知感染HIV的时间 编号血清盘结果 ABBOTT 结果 ROCHE 结果Sysmex结果 SIMENS 结果 2R702 25R374 9R361 157R 50R 3R887 257R1834R 500 000R 50R 5R35 387R44 17R49 821R 50R 6R100 847R78 74R59 879R3 96R 8R57 587R35 69R69 446R 50R 9R435 559R247 1R 500 000R0 08N 10N0 101N0 264N0 019N0 08N 11R57 321R18 07R61 642R500 000R0 27N 15R36 643R18 76R104 201R0 11N 17R160 909R89 34R419 387R14 71R 19R87 388R37 41R166 591R0 09N 20N0 107N0 282N0 043N0 15N 21R27 169R9 42R61 493R 50R 22R7 243R3 52R16 17R1 23R 23R3 329R2 3R6 998R 0 05N 25R2 569R1 35R7 094R0 07N 血清转换盘检测结果 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 l 诊察临床症状 初期硬结 硬性下疳 扁平湿疣等 l 病原学检查 原理 一期 二期梅毒时 取硬下疳 扁平 湿疣 黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿 刺术得到的组织液 在暗视野显微镜下 光 线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋 体而发出亮光 从而根据其特殊形态和运动 方式进行检测 方法 1 暗视显微镜检查 2 镀银染 色法 3 核酸检测 l 血清学检查 梅毒螺旋体抗体 TP 检测法 脂质抗体检测法 梅毒诊断方法 l 感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体 即使经足量抗梅治疗 梅毒螺旋 体抗原消失后很长时间 IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生 甚至终生在 血清中可测出 l 另一种具有抗体性质的物质叫反应素 reagin 是梅毒螺旋体破坏人体组织过程 中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体 反应素一般在感染后5 7周 或下疳出现后2 3周 产生 经正规治疗后可逐渐消失 l 感染梅毒后 首先 产生IgM型抗梅毒螺 旋体抗体 感染2周 后即可测出 早期 梅。