
临床检验技师生化检验精华辅导:生化分析仪酶测不准确原因.docx
3页临床检验技师生化检验精华:生化分析仪酶测不准确原因在生化分析测量中,酶的测定比拟简单,要求条件较高,测试比拟困难一般生化分析仪只要酶的测定精确,重复性好,其它工程的测定一般都会没有问题现就生化分析仪酶分析中常见的测试不精确、重复性差的几点缘由进展分析,以供使用者和修理工程师参考 生化分析仪酶的测定一般用动力学法进展测试,其原理是在酶反响的最适条件下,用物理、化学或酶促反响的分析方法,在反响速度恒定期与被测物的活性或浓度成正比计算方法有两种: 1)肯定法: 酶活力(U/L)=ΔA×(反响液体积/样品体积)×(1000/消光系数) 2)相对法: (U/L或mmol/L)=[ΔA(测定)/ΔA(标准)]×标准物的活力或浓度 因此,生化分析仪酶的测定与很多条件有关条件的设置,如:波长、温度、参数、测试方法,延迟和测试时间,吸液量等另外还与厂家的试剂,样品的采集、保存有关,同时与准时进展质控,从一个样品进入另一个样品测试时准时清洗也有很大关系 例如GPT的测试一般选择为:波长为340nm,测定时间为20秒,延迟时间为40秒,吸液量为350μl,温度设定为37℃,试剂空白可任意选择。
因此GPT的测试结果与以下几点有关: 1、340nm为波长低端,能量较低,同时340nm滤光片使用较多,易老化所以波长漂移不准,半宽度变化都会影响测量的精确度和重复性 2、动态法测试有延迟时间,测试时间要求延迟时间在动态法中为预反响时间,测试时间在动态法中为测试的总时间零级动力学法是针对特定时间段而言的,酶反响刚启动时反响比拟简单,杂反响较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反响期,各试剂商对这两段时间有严格规定所以动态法测试一般温度在37℃,延迟时间不少于15秒为好 3、对于参数的输入应按试剂要求输入其给定值,一般试剂商在试剂盒说明书中赐予说明 4、反响温度 5、测试空白要精确 6、吸液量的大小直接影响穿插污染和测量的重复性,建议测试污染性大的物质试剂量应相应增加一般应大于400μl,一般工程为500μl即可 7、测试不精确、重复性差从操作上看主要有:仪器本身缘由如比色杯中有气泡;光源灯老化;光源电压不稳;340nm滤光片性能变差,透射性变小;波长不精确等有关一般检查液路接口是否松动漏气,更换光源灯泡和340nm滤光片即可解决至于电路问题,加热元件损坏,温度不受控的问题只能由工程师解决。
总之酶的测定影响精确度的因素许多,只要仔细操作,综合分析影响测定的各项因素,仔细分析,酶测定的问题不难解决的依据我们的阅历只要试剂、样品精确,保存得当,样品预处理认真,仪器常常维护、保养,仔细操作,问题会自行解决。












