公共场所浴盆脸脚盆微生物检测方法细菌总数测定.doc

公共场所浴盆脸脚盆微生物检测方法细菌总数测定 GB /T 18204.11- 20001 范围本标准规定了公共场所浴盆、脸(脚)盆中细菌总数的测定方法本标准适用于公共场所浴盆、脸(脚)盆细菌总数的测定2 引用标准GB /T 18204.11- 2000公共场所浴盆、脸(脚)盆微生物检验方法细菌总数测定3 定义细菌总数：指公共场所浴盆、脸(脚)盆经过采样处理，在一定条件下培养后(培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等)，25 c㎡表面上所含菌落的总数本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌落总数细菌总数可作为判定公共场所浴盆、脸(脚)盆被污染程度的标志，也可以为公共场所浴盆、脸(脚)盆消毒效果的判定和评价提供依据4 仪器见GB/T 18204.2-2000中第4章5 培养基和试剂5.1 营养琼脂培养基见 GB/T 18204.1 -2000中4.105.2 无菌生理盐水:分装125 mL/瓶供浴盆采样，50 mL/瓶供脸(脚)盆采样6 采样6.1 采样必须在无菌操作下进行，采样用具应高压灭菌121℃20min6.2 采样部位，选择在盆内侧壁二分之一至三分之一高度采样。

6.3 采样布点，浴盆可在四壁及盆底呈梅花布点，脸(脚)盆可在相对两侧壁布点6.4 采样方法6.4.1 涂抹法:用浸有无菌生理盐水的棉拭子在规格板(5cmX5cm)内来回均匀涂满整个方格，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将涂抹浴盆的5个棉拭子一并放入125 mL生理盐水烧瓶中，涂抹脸(脚)盆的2个棉拭子一并放人50 mL生理盐水三角烧瓶中，充分振摇或在旋涡振荡器上振荡1 min,每毫升的菌浓度相当于1 cm,的菌量6.4.2 斑贴法:将5 cmX5 cm无菌滤纸片放人灭菌平皿中，注人灭菌生理盐水工mL/片(吸满为止)，以无菌操作将滤纸片贴到采样部位，1 min后按序取下，将贴浴盆的5片滤纸一并放人125 mL生理盐水瓶中，贴脸(脚)盆的2片滤纸一并放人50 mL生理盐水瓶中，充分振摇或在旋涡振荡器上振荡1 min，每毫升的菌浓度相当于1 cm,的菌量7 检验方法7.1 用1 mL灭菌吸管吸取样品1 mL，加到灭菌平皿内，同样再吸I mL加到另一平皿内7.2 如污染严重，可做10倍递增稀释，每递增稀释一次，换一支无菌吸管，每个稀释度接种两个平皿7.3 稀释液移人平皿后，应及时将冷却至46℃的营养琼脂培养基(可放置46℃士1℃水浴保温)注人平皿约15 mL，并转动平皿使混合均匀。

待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃士1℃温箱内培养48 h,8 菌落计数方法见GB/T 18204. 2-2000中第8章浴盆、脸(脚)盆的细菌数按式(1)计算:m = 5k n …………(1)式中:m— 细菌总数，cfu/25 c㎡k— 稀 释 倍数;n一平均菌落数。