蛋白质等凝胶图像分析.ppt

仪仪 器器 培培 训训凝胶成像分析凝胶成像分析1UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统•目的与要求目的与要求 了解UVP凝胶成像分析系统的用途，熟悉其操作步骤和注意事项•培训内容培训内容 UVP凝胶成像分析系统的基本原理与实验流程•考核题目考核题目2UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统3用途：用途：凝胶成像系统—UVP是目前最常见的图象拍摄、 分析和处理系统广泛应用于DNA/RNA凝胶，蛋白质凝胶等电泳不同染色（如EB、考马氏亮蓝） ，X-光片 等非化学发光成像的扫描检测和定性定量分析是分子生物学研究、法医DNA鉴定、临床基因诊断、疾病控制等实验室的必备设备UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统RNARNA凝胶凝胶DNADNA凝胶凝胶蛋白质凝胶蛋白质凝胶4•图像采集系统图像采集系统 采用数码摄影将摄取的图象直接输入计算机系统 在暗箱中的紫外灯照射下,通过调节变焦光圈、变焦倍数及焦距使样品清晰及大小适当图象摄取获得以后,通过Labwork软件中图象处理菜单的“亮度”和“优化”项进行亮度调整和图象优化,以降低图象本底噪声一般经过这样处理以后能得到清晰的凝胶图片。

•图像分析系统图像分析系统 采用凝胶成像系统Labwork软件将摄取的图像中的DNA/RNA/蛋白凝胶/胶片进行定性、定量分析定量分析是利用软件灰度/密度扫描的功能，将所得条带用虚线框框住，进行密度/灰度扫描，可以用目的条带密度/标准条带密度的比值来对目的条带进行半定量 •图像打印系统图像打印系统 将摄取的图像通过与计算机相连的打印机生成打印文件UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统5 操作规则操作规则•1、在熟悉仪器的基本性能，向相关老师提出申请，获得允许之后，开机使用 •2、仪器操作规程： 用酒精棉球将暗盒中的透视屏擦拭干净→ 将凝胶置于屏上（蛋白凝胶于白光屏，核酸凝胶于紫外屏）→ 调整CCD位置使凝胶置于视野合适位置后插上电源→ 打开电脑进入Labwork工作状态→ 打开相应的透射光源准备扫描→ 进入摄像状态，调整光圈和焦距扫描→ 用JPG格式文件保存图像→ 关闭光源，CCD电源和电脑→ 取出凝胶并用酒精棉球擦净透视屏→ 盖上防尘盖 •3、DNA/RNA凝胶含有EB，操作时应戴手套。

严禁机箱外及实验室任何地方污染EB•4、请勿随意改动取相参数，如需积分，取完后将积分值回到初始值 •5、使用完后请在记录本上登记•6、插入软盘前，要先查毒，确认无毒后使用，以确保系统的正常工作•7、凝胶成像系统电脑为图像扫描分析专用，不得作其它用途，不得修改电脑设置•8、关机后，将插线板开关及电源都关闭UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统6 溴化乙锭（溴化乙锭（EB），），EB是一种强致癌物，在实验中使用EB时，应遵守以下操作规程：•1、在EB专用实验室进行EB的操作所有EB操作必须戴手套，在特定的区域内完成，严禁将接触过EB的手套等杂物带出其工作区•2、EB粉末应存放在特定的容器内，密封保存容器外用牛皮纸包裹，并标明购买日期及有效期，再放于较大容器内，存放于特定的地方，并由专人保管•3、EB储备液的配制及存放：称取EB粉末应用普通托盘天平称量，不能用电子天平，在称取EB粉末时，应戴手套、口罩，在天平下放张大纸，在两个托盘上放同样大小的较大纸张后，再称量称量后应及时将原容器盖好密封后放回原处EB储备液应存放于固定的容器内，再放于纸盒中，并在盒外显著标明“强致癌物EB”，放在冰箱中固定的地方。

•4、在EB专用实验室进行实验或使用仪器时，接触EB溶液或样品（如载玻片、胶、盛胶板）时必须戴手套，且有EB污染的物品只能接触凝胶图像分析仪的箱内及荧光显微镜的载物台，严禁接触过严禁接触过EB的手套的手套接触仪器的其他操作部分接触仪器的其他操作部分•5、含EB的溶液及接触过EB的手套等杂物应按相关规定进行处理UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统7考核题目考核题目1. UVPUVP凝胶成像分析系统的主要用途是什么？凝胶成像分析系统的主要用途是什么？ 2. UVPUVP凝胶成像分析系统由哪几部分构成？各部分凝胶成像分析系统由哪几部分构成？各部分功能是什么？功能是什么？3. UVP UVP凝胶成像分析系统的操作规程是什么？注凝胶成像分析系统的操作规程是什么？注意事项有哪些？意事项有哪些？4.实验室使用实验室使用EBEB的操作规程有哪些？注意事项是的操作规程有哪些？注意事项是什么？什么？ 89。