大环内酯类药物的非抗菌效应.ppt

大环内酯类药物的￿非￿抗菌效应主要内容w大环内酯类药物概述大环内酯类药物概述w大环内酯类药物的抗炎与免疫调节作用大环内酯类药物的抗炎与免疫调节作用w大环内酯类药物对生物被膜的作用大环内酯类药物对生物被膜的作用Azithromycin阿奇霉素大环内酯类药物概述Macrolide AntibioticsMacrolide Antibiotics14-membered-ring12-membered-ring15-membered-ring16-membered-ring17-membered-ringMethymycin酒霉素Neomethymicin新酒霉素YC-17LitorinLankacidin兰卡杀菌素complexnaturalcompoundsSemi-syntheticderivativesnaturalcompoundsSemi-syntheticderivativesErythromycin￿A￿to￿F红霉素Oleandomycin竹桃霉素SporeamicinJosamycin交沙霉素Kitasamycin吉他霉素Spiramycin螺旋霉素Midecamycin麦迪霉素Rokitamycin罗他霉素Miokamycin米卡霉素Roxithromycin罗红霉素Dirithromycin地红霉素Flurithromycin氟红霉素Clarithromycin克拉霉素Davercin大环内酯类抗生素的特点w19491949年从菲律宾土壤中红霉素链霉菌中提取到代谢产年从菲律宾土壤中红霉素链霉菌中提取到代谢产物物——红霉素（碱性亲脂化合物）红霉素（碱性亲脂化合物）w19521952年丙酸红霉素应用于商业中年丙酸红霉素应用于商业中w19701970年日本发明年日本发明6-6-甲基红霉素（克拉霉素）甲基红霉素（克拉霉素）w抗菌谱：需氧革兰阳性菌、阴性球菌、支原体、衣原抗菌谱：需氧革兰阳性菌、阴性球菌、支原体、衣原体、军团菌、厌氧菌等体、军团菌、厌氧菌等w无严重不良反应，主要为胃肠道反应无严重不良反应，主要为胃肠道反应阿 奇 霉 素w阿奇霉素是红霉素的衍生物，阿奇霉素是红霉素的衍生物，19801980年被发现，年被发现，19811981年年推出。

推出w口服生物利用度口服生物利用度37%37%w蛋白结合率低（蛋白结合率低（7-23%7-23%））w血药半衰期血药半衰期35-4835-48小时，组织半衰期小时，组织半衰期68-7668-76小时，持续小时，持续应用应用3 3天，可维持有效浓度天，可维持有效浓度8-108-10天天阿奇霉素（希舒美）的肺组织浓度￿单剂口服500mg￿阿奇霉素肺组织中的浓度高而持久The American Journal of Medicine Volume 91(suppl 3A)血清支气管黏膜痰肺泡巨噬细胞5.0103040500.010.10.20.51.01224487296(小时)2.0阿奇霉素的浓度(mg/l)化脓性链球菌金葡菌军团菌MIC90 (mg/l)流感嗜血杆菌肺炎衣原体肺炎链球菌卡他莫拉菌肺炎支原体200.020.05希舒美在血液中各细胞中的浓度(N=6)￿Values￿are￿means￿￿standard￿deviations阿奇霉素每天500￿mg￿/天，连续￿3￿天￿志愿者Day￿3Day￿5Day￿6Day￿7Day￿14浓度￿(mg/L)150130110907050301036812244896120288￿h￿after￿last￿dose72多形核白细胞单核细胞红血球血清A.￿Wildfeuer￿et￿al.￿Antimicrob￿Agents￿Chemother.￿1996;40:75-79中性粒细胞内高浓度阿奇霉素给药1小时后人多型核中性粒细胞对抗生素摄取率比较多型核中性粒细胞阿奇霉素摄取率远高于其他大环内酯抗生素Hand￿WL,et￿al.Int￿J￿Antimicrob￿Agents￿2001,18:419Hand￿WL,et￿al.Antimicrob￿Agents￿Chemother￿1993,37:2557阿奇霉素的“特洛伊木马现象”特殊的靶向释药：吞噬细胞特殊的靶向释药：吞噬细胞/ /白细胞摄取和炎症部位转运白细胞摄取和炎症部位转运吞噬细胞内高浓度AZM的放大效应：l吞噬细胞将递送药物至感染部位l被吞噬病原体（胞内菌和胞外菌）暴露于吞噬细胞内高药物浓度作用下l药物释放至细胞外，在病灶局部间质液的药物浓度明显高于血清药物浓度，使胞外菌仍然暴露在高药物浓度作用下对胞内菌和胞外菌都发挥抗菌作用Foulds￿G:￿J￿Antimicrob￿Chemother￿1990;￿25(Suppl￿A):73-82Lynch￿JP￿Ⅲ.CID2002;34(suppl￿1);S27-46希舒美具有高而稳定的组织浓度吸收后快速分布到组织中阿奇霉素在肺、扁桃体、中耳、子宫以及前列腺等组织中具有很高的浓度弥散到细胞外，回到组织间液和血流在组织细胞内蓄积细胞、组织间液和血流之间的动态平衡使得组织内保持高而稳定的浓度Foulds￿G￿et￿al.J￿Antimicrob￿Chemother.1993；31（suppl）：39-50.大环内酯类药物治疗DPB研究存活率存活率 (%)1985年以后年以后 (n=87)1980 - 1984 (n=221)1970 - 1979 (n=190)采用大环内酯药物治疗前采用大环内酯药物治疗前: 63%采用大环内酯药物治疗后采用大环内酯药物治疗后: 91%DPB的的5年生存率年生存率：：Kudoh Kudoh et alet al (1984) (1984) 报道，报道，EMEM低剂量长期疗法对弥漫性泛细支气低剂量长期疗法对弥漫性泛细支气管炎管炎(diffuse panbronchiolitis, DPB)(diffuse panbronchiolitis, DPB)有显著效果有显著效果DPBDPB：：弥漫性全细支气管炎弥漫性全细支气管炎(diffuse panbronchiolitis)(diffuse panbronchiolitis)大环内酯类药物的临床应用 大量临床实践证明，大环内酯类抗生素大量临床实践证明，大环内酯类抗生素(MA)(MA)可显著改善弥可显著改善弥漫性泛细支气管炎漫性泛细支气管炎(DPB)(DPB)的预后。

同时对慢性副鼻窦炎、绿脓杆的预后同时对慢性副鼻窦炎、绿脓杆菌感染菌感染 等均产生显著疗效，提示等均产生显著疗效，提示MAMA具备有别于其他抗生素的抗具备有别于其他抗生素的抗菌外效应，这种抗菌外效应不仅对宿主，对致病菌本身也发挥着菌外效应，这种抗菌外效应不仅对宿主，对致病菌本身也发挥着重要作用重要作用 近年来逐渐认识到近年来逐渐认识到 MAMA对社区获得性肺炎（对社区获得性肺炎（CAPCAP）、慢性阻）、慢性阻塞性肺疾病塞性肺疾病(COPD)(COPD)、哮喘、流感病毒感染等常见病也发挥了显、哮喘、流感病毒感染等常见病也发挥了显著疗效，减缓了疾病的进展及抑制了病情的加重著疗效，减缓了疾病的进展及抑制了病情的加重 MAMA的的抗菌外效应抗菌外效应值得我们关注值得我们关注…………主要内容w大环内酯类药物概述大环内酯类药物概述w大环内酯类药物的抗炎与免疫调节作用大环内酯类药物的抗炎与免疫调节作用w大环内酯类药物对生物被膜的作用大环内酯类药物对生物被膜的作用常见的呼吸道慢性炎症(非细菌感染性非细菌感染性)Ø 弥慢性泛支气管炎弥慢性泛支气管炎弥慢性泛支气管炎弥慢性泛支气管炎Ø 慢性支气管炎慢性支气管炎慢性支气管炎慢性支气管炎Ø 慢性阻塞性肺病慢性阻塞性肺病慢性阻塞性肺病慢性阻塞性肺病Ø 慢性咽炎慢性咽炎慢性咽炎慢性咽炎Ø 慢性喉炎慢性喉炎慢性喉炎慢性喉炎Ø 放射治疗后黏膜慢性炎症放射治疗后黏膜慢性炎症放射治疗后黏膜慢性炎症放射治疗后黏膜慢性炎症上上- -下呼吸道黏膜炎症性疾病的相关性下呼吸道黏膜炎症性疾病的相关性感染感染: : 细菌植入、定植、繁殖细菌植入、定植、繁殖炎症炎症: :炎症细胞因子介导的炎症反应炎症细胞因子介导的炎症反应感感 染染炎炎 症症粘膜感染与炎症的区别炎症本质的同一性炎症本质的同一性鼻黏膜炎症是体液与细胞免疫机制的表达鼻黏膜炎症是体液与细胞免疫机制的表达 -- --姜泗长姜泗长发病机制的同一性发病机制的同一性炎症发生、发展的两个恶性循环炎症发生、发展的两个恶性循环 -- --顾之燕顾之燕内源性、外源性因素（生物性、机械性）鼻黏膜上皮形态与功能损伤鼻黏膜炎症黏膜功能损伤通气与引流障碍致病微生物入侵与定植炎症类型的特殊性炎症类型的特殊性根根据据致致病病因因素素的的不不同同，，炎炎性性细细胞胞的的成成分分不不同同。

细胞毒性神经毒性嗜酸细胞产生细胞因子释放（IL-4,5GM-CSF，ECP，￿BP…）MC脱颗粒嗜酸细胞与细胞因子进一步产生与释放Steinke￿JW,et￿al.￿Cysteinyl￿leukotriece￿expression￿in￿chronic￿hyperplastic￿sinusitis-nasal￿polyposis:￿importance￿to￿eosinophils￿and￿asthma.￿J￿Allergy￿Clin￿Immunol￿2003;111:342-349组织病理的同一性组织病理的同一性炎细胞浸润、血管充血、粘膜肿胀、组织间隙水肿炎细胞浸润、血管充血、粘膜肿胀、组织间隙水肿呼吸道粘膜炎症的同一性和特殊性急性鼻窦炎急性鼻窦炎( (感染感染) )慢性鼻窦炎慢性鼻窦炎( (炎症炎症) )炎症反应过程一致炎症反应过程一致治疗目标治疗目标: 抗菌抗菌治疗目标治疗目标:抗炎抗炎炎性细胞及上皮细胞通过炎性细胞及上皮细胞通过NF-Kb活化活化,上调炎性细胞因子的表达上调炎性细胞因子的表达,促进嗜酸细胞促进嗜酸细胞的趋化与活化的趋化与活化肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子,IFN(干扰干扰素素), ECP IL-1,6,8, TGF-b, CSF(集落细胞刺激因集落细胞刺激因子）等子）等内源性、外源性因素内源性、外源性因素（生物性、机械性）（生物性、机械性）Bishai￿WR￿et￿al.￿Expert￿Rev￿Anti￿Infect￿Ther,￿2006;4(3):405-16.白细胞介素白细胞介素1,6,8(IL-1,6,8), 1,6,8(IL-1,6,8), 转化生长因子转化生长因子(TGF-b)(TGF-b)是气道炎症主要炎症因子是气道炎症主要炎症因子NFNF B B( (炎性反应中枢炎性反应中枢, ,核转录子核转录子) )可调解可调解500500余种前炎或炎性因子的表达余种前炎或炎性因子的表达Nf-kb大环内酯类药物抗炎机制大环内酯类药物免疫调节作用细菌感染细菌感染 刺激刺激 分化分化 活化活化 巨噬细胞巨噬细胞上皮细胞上皮细胞内皮细胞内皮细胞中性粒细胞的聚集中性粒细胞的聚集弹性酶弹性酶氧自由基氧自由基内皮细胞的损害内皮细胞的损害中性粒细胞的移行中性粒细胞的移行中性粒细胞的吸附中性粒细胞的吸附红霉素红霉素大环内酯类作用机制大环内酯类作用机制Tamaoki￿J￿et￿al.￿Am￿J￿Med.￿2004;117(9A)5s-11s.调节调节调节调节调节调节调节调节w降低中性粒细胞的化学趋化性和呼吸道上皮的浸润降低中性粒细胞的化学趋化性和呼吸道上皮的浸润w抑制转录因子导致前炎细胞因子减少抑制转录因子导致前炎细胞因子减少w下调粘附分子的表达下调粘附分子的表达w改善肺泡巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬功能改善肺泡巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬功能w抑制微生物的致病因子，包括抑制微生物的致病因子，包括–生物被膜形成生物被膜形成–减少氧自由基生成减少氧自由基生成–细胞凋亡增加细胞凋亡增加–抑制粘液高分泌改善粘液纤毛清除功能抑制粘液高分泌改善粘液纤毛清除功能–。

Maimon￿N,￿et￿al.￿Bone￿Marrow￿Transplantation￿(2009)￿44,￿69–73大环内酯类药物免疫调节机制对中性粒细胞活性和功能的影响w促进肺泡巨噬细胞对凋亡中性粒细胞的吞噬，抑制中性粒细胞趋化所致的慢性炎症反应w下调β-2-整联蛋白如 CD11b/CD18的表达，减少细胞内 H2O2 和IL-8 的产生w减少中性粒细胞弹性酶和白三烯B4 的释放Labro￿et￿al,￿JAC￿1989;￿Umeki￿S,￿Chest￿1993;￿Gorrini￿et￿al,￿ARRD￿2001;￿Li￿et￿al,￿Chest￿2002Yamaryo￿et￿al,￿AAC￿2003;￿Lin￿H￿et￿al,￿Resp￿Med￿2000对中性粒细胞活性和功能的影响w通过抑制中性粒细胞NADPH(还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)氧化酶活性，减少活性氧的产生w通过抑制VCAM-1 mRNA(血管细胞粘附分子-1)生成， 减少中性粒细胞向气道迁移w通过减少人支气管上皮细胞 ICAM-1(细胞间粘附分子-1)的表达，抑制中性粒细胞对上皮细胞的粘附大环内酯类抗生素对单核细胞吞噬作用的影响大环内酯类抗生素对单核细胞吞噬作用的影响Gao￿XG,￿et￿al.￿Pulmonary￿Pharmacology￿&￿Therapeutics￿23￿(2010)￿97–106SM-Sulfur mustard大环内酯类抗生素抑制单核细胞炎性因子释放大环内酯类抗生素抑制单核细胞炎性因子释放Gao￿XG,￿et￿al.￿Pulmonary￿Pharmacology￿&￿Therapeutics￿23￿(2010)￿97–106大环内酯类抗生素降低单核细胞内大环内酯类抗生素降低单核细胞内NONO活性活性Gao￿XG,￿et￿al.￿Pulmonary￿Pharmacology￿&￿Therapeutics￿23￿(2010)￿97–106甘露糖受体w甘露糖受体属于C型凝集素超家族成员，广泛分布于巨噬细胞，可通过胞外区识别和结合特定的糖类分子(如酵母甘露聚糖、细菌荚膜、LPS和脂质阿拉伯甘露聚糖等)，在识别病原体、递呈抗原和保持内环境稳定中发挥作用。

吞噬作用吞噬作用甘露糖受体甘露糖受体阿奇霉素能够提高阿奇霉素能够提高COPDCOPD患者巨噬细胞的吞噬作用及甘露糖受体的表达患者巨噬细胞的吞噬作用及甘露糖受体的表达COPDCOPD患患者者使使用用阿阿奇奇霉霉素素治治疗疗后后，，作作者者观观察察到到肺肺泡泡巨巨噬噬细细胞胞（（AMAM））的的吞吞噬噬能能力力显显著著升升高高（（治治疗疗前前：：9.9%9.9%；；治治疗疗后后：：15.1%15.1%）），，支支气气管管上上皮皮细细胞胞凋凋亡亡减减少少（（治治疗疗前前：：30.0%30.0%；；治治疗疗后后：：19.7%19.7%）），，外外周周血血中中的的甘甘露露糖糖受体（受体（MRMR）升高，炎症标志物减少升高，炎症标志物减少细胞凋亡细胞凋亡对细胞因子的影响w通过抑制NF-kB表达，减少肺泡巨噬细胞、离体人嗜酸性粒细胞和腺样成纤维细胞产生 IL-8w减少IL-6和G-CSF(粒细胞集落刺激因子)的生成w通过抑制一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达降低NO的生成w抑制T淋巴细胞释放TNF- α 和IL-2Ichiyama￿et￿al,￿Jpn￿J￿Anti￿2001;Morikawa￿et￿al,￿Int￿J￿AA￿2002对其它介质和功能的影响w通过抑制人白细胞前列腺素合酶如磷脂酶A2, COX-1 和COX-2 mRNA的表达，抑制前列腺素E2 的生成w抑制肥大细胞活化和介质的释放w通过抑制嗜酸性粒细胞浸润从而抑制支气管的高反应性w体内研究显示可抑制血管生成和肿瘤生长Miyazaki￿et￿al,￿Pros￿L￿E￿F￿A￿2003Tatsunami￿et￿al,￿Anticancer￿Res￿2001对纤毛和粘膜纤毛清除率的影响w通过前列腺素和c-AMP(环腺苷酸)相关调节途径增加纤毛摆动频率w提高体内粘膜纤毛清除率w对人纤毛上皮细胞具有保护作用，为膜稳定剂w减少细菌在人纤毛上皮上的粘附Takeyama￿et￿al,￿JPP￿1993;￿Tamaoki￿et￿al,￿Kokyu￿TJ￿1991;Nishi￿et￿al,￿NKSGZ￿1993;Cervin￿et￿al,￿Otol￿HNS￿2002Feldman￿et￿al,￿Inflamm￿1997w大环内酯类抑制DPB(弥漫性泛支气管炎)实验模型过度产生的粘液核蛋白（气道分泌粘蛋白中的主要核心蛋白）w大环内酯类还可减少人支气管上皮细胞粘液的表达和产量w大环内酯类抑制IL-8介导的杯状细胞高分泌和调节氯化物分泌w大环内酯类改变慢性鼻窦炎患者鼻粘液和COPD患者气道粘液的流变特性Kaneko￿et￿al,￿Am￿J￿Physiol￿Lung￿Cell￿MP￿2003;￿Takeyama￿et￿al,￿Jpn￿J￿Antib￿2001;￿Tamaoki￿et￿al,KZ￿1996;￿Rhee￿et￿al,￿Ann￿Otol￿RL￿2000对粘液的影响对哮喘导致气道黏液高分泌的作用肺炎衣原体诱导MUC5AC合成和基因表达粘液分泌ERK-NF B途径途径大环内酯类大环内酯类减少减少何新,周向东.大环内酯类抗生素对气道黏液高分泌作用研究进展.国际呼吸杂志,2011,31(1),69-71.对粘液的影响(细胞外调节蛋白激酶)主要内容w大环内酯类药物概述大环内酯类药物概述w大环内酯类药物的抗炎与免疫调节作用大环内酯类药物的抗炎与免疫调节作用w大环内酯类药物对生物被膜的作用大环内酯类药物对生物被膜的作用新型大环内酯药物——他克莫司（Tacrolimus,FK-506)本药是具有高度免疫抑制的药物，主要抑制移植排斥作用之细胞毒性淋巴球的生成；抑制T细胞的活化作用以及T辅助细胞依赖B细胞的增生作用。

同时抑制如白介素-2、白介素-3及γ-干扰素等淋巴因子的生成与白介素-2受体的表达在分子水平，其效应是结合到细胞性蛋白质（FKBP）所产生，在体内试验中发现，本药显示出对肝脏及肾脏移植有效 生物被膜细菌生物被膜的形成1.自由移动有机体(细菌等)对固相表面最初的可逆性粘附2.￿持久性的化学粘附(分泌粘蛋白)，有机体开始形成单一层面的粘液￿3.￿早期的垂直发展(发芽,增殖,易黏附)￿4.形成多个塔形，菌落之间有通道(横向发展),￿然后形成成熟的生物膜5.￿成熟的生物膜能够播种/散布更多自由活动的微生物￿1.1.藻酸盐聚合体藻酸盐聚合体2.2.IVIV型菌毛型菌毛绿脓杆菌生绿脓杆菌生物膜初期所含的成份物膜初期所含的成份：：恶性循环恶性循环Stoodley PAnnu Rev Microbiol 2002大环内酯类与细菌菌膜w 细菌菌膜是细菌在不利于其生长的环境下，产生藻酸盐多细菌菌膜是细菌在不利于其生长的环境下，产生藻酸盐多糖使细菌相互粘连形成膜状物附着于病灶的表面或导管内糖使细菌相互粘连形成膜状物附着于病灶的表面或导管内菌膜病（菌膜病（biofilm disease)biofilm disease)的致病性：的致病性：–菌膜释放浮游菌造成慢性感染急性发作；菌膜释放浮游菌造成慢性感染急性发作；–藻酸盐会导致变态反应性免疫性疾病；藻酸盐会导致变态反应性免疫性疾病；l 大环内酯类作用机制：ü大环内酯类本身具有抗藻酸盐作用大环内酯类本身具有抗藻酸盐作用; ;ü大环内酯类有效抑制由藻酸盐介导的抗原抗体反应；大环内酯类有效抑制由藻酸盐介导的抗原抗体反应；大环内酯药物抗藻酸盐作用w以碱性磷酸盐基质培养铜绿假单胞菌14天后，培养基非常粘稠w培养基粘稠度的显著增加源于藻酸盐的产生w相反，如果培养基中添加10 µg/mL阿奇霉素，则粘稠度不增加Kobayashi￿H,￿Am￿J￿Med￿1995EM (-)EM (+) 琼脂中的铜绿假单胞菌菌群琼脂中的铜绿假单胞菌菌群500毫升培养液中藻酸毫升培养液中藻酸盐的含量盐的含量↓↓30.92 ± 2.41 毫克毫克500毫升培养液中藻毫升培养液中藻酸酸盐的含量的含量↓↓4.91 ± 0.78 毫克毫克生物膜生物膜生成最初阶段需要生成最初阶段需要藻酸盐粘液藻酸盐粘液 大环内酯药物能减少绿脓杆菌藻酸盐粘液大环内酯药物能减少绿脓杆菌藻酸盐粘液在在37℃中中含有含有EM (2.5 mg/ml)或不含有或不含有EM的培养皿中继续培养的培养皿中继续培养18小时小时大环内酯药物抗藻酸盐作用EM 的次级最小抑制浓度的次级最小抑制浓度有效减少有效减少绿脓杆菌绿脓杆菌的蹭的蹭动蹭动蹭动区域区域有有 EM的条件下的条件下 (0.05 MIC)没有没有EM的条件下的条件下I型菌毛型菌毛IV 型菌毛型菌毛蹭动蹭动- -细菌生物膜垂直发展的必要条件细菌生物膜垂直发展的必要条件大环内酯药物能减少IV型菌毛引起的“蹭动”外周边缘（+）外周边缘（-）希舒美希舒美在不同浓度抑制细菌鞭毛在不同浓度抑制细菌鞭毛/IV型菌毛蹭行运动的结果型菌毛蹭行运动的结果11.Wozniak￿DJ￿et￿al.￿Chest.￿2004;125:62s-69s.希舒美希舒美希舒美希舒美MICMIC值值值值5 53 31 1铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌0 00.1250.1250.250.250.50.50 00.1250.1250.250.250.50.5蹭行运动能力蹭行运动能力蹭行运动能力蹭行运动能力(cm)(cm)希舒美能减少IV型菌毛引起的“蹭动”大环内酯药物可改变铜绿假单胞菌生物膜结构减少生物膜基质相关物质(Wozniak￿et￿al.￿Chest￿2004)大环内酯药物大环内酯药物抑制小鼠肺中由绿脓杆菌诱导的生物被膜抑制小鼠肺中由绿脓杆菌诱导的生物被膜赋形剂对照赋形剂对照明显的多明显的多形核白细形核白细胞浸润胞浸润5天后天后: 形成生物被膜形成生物被膜克拉霉素（克拉霉素（5mg／／Kg／天），／天），3天天多形核白细胞聚集多形核白细胞聚集,量少量少　　　　5天后天后: 生物被膜形成量明显少于对照组生物被膜形成量明显少于对照组大环内酯药物可有效抑制生物被膜的形成Takada H, et al. J.J.A.Inter.D,1993,66:1454肺炎链球菌生物膜肺炎链球菌生物膜CAM 10ug/ml, 1天天3天天5天天长期应用大环内酯抗生素降低痰中绿脓菌素的浓度(PYO产生绿色脓痰并具有微生物活性)大环内酯药物大环内酯药物对已经形成的生物被膜有直接拮抗作用对已经形成的生物被膜有直接拮抗作用大环内酯药物可有效抑制生物被膜希舒美希舒美在在4848小时内完全抑制生物被膜的生成小时内完全抑制生物被膜的生成1 1希舒美可有效抑制生物被膜的形成1.￿Gillis￿RJ￿et￿al.￿J￿Clin￿Microbiol.￿2004;42:5842-5845.对照组对照组对照组对照组2525252020201515151010105 550 002424244848487272720 0242448487272希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组时间时间时间时间(h)(h)BFBF菌量总数菌量总数菌量总数菌量总数( (µmµm2 2 /µm/µm3 3) )0 002424244848487272722525252020201515151010105 55(h)(h)(h)希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组(h)(h)(h)0 00242424484848727272对照组对照组对照组对照组对照组对照组2.02.02.01.41.41.40.40.40.40.20.20.20.60.60.60.80.80.81.01.01.01.21.21.21.61.61.6希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组希舒美组对照组对照组对照组对照组对照组对照组时间时间时间时间时间时间时间时间1. Gillis RJ et al. J Clin Microbiol. 2004;42:5842-5845.1. Gillis RJ et al. J Clin Microbiol. 2004;42:5842-5845.希舒美希舒美在在4848小时内完全抑制细菌生物被膜的形成小时内完全抑制细菌生物被膜的形成1 1BFBF平均厚度平均厚度平均厚度平均厚度( (µ µm)m)BFBF表面光滑度表面光滑度表面光滑度表面光滑度希舒美可有效抑制细菌生物被膜形成Condoh K,et al. J Jpn Soc ORL, 1998,101:25在含有不同浓度的在含有不同浓度的EM(红霉素红霉素), CAM(克拉霉素克拉霉素), MDM( 麦迪霉素麦迪霉素)以及空白对照组以及空白对照组的培养基中连续的培养基中连续7天培养天培养,绿脓杆菌生物膜形成量的变化绿脓杆菌生物膜形成量的变化, 结果表明了浓度的差异显结果表明了浓度的差异显著性著性. P<0.01,0.001大环内酯药物可有效抑制生物被膜的形成红霉素红霉素红霉素红霉素红霉素红霉素希舒美希舒美较红霉素影响生物被膜形成的能力更强较红霉素影响生物被膜形成的能力更强1 11515151010105 550 002020对照组对照组对照组对照组对照组对照组希舒美希舒美希舒美希舒美希舒美希舒美0.5ug/mL0.5ug/mL0.5ug/mL2.0ug/mL2.0ug/mL2.0ug/mL8.0ug/mL8.0ug/mL8.0ug/mL大大大大环环环环内内内内酯酯酯酯类类类类可可可可通通通通过过过过干干干干扰扰扰扰甘甘甘甘露露露露糖糖糖糖脱脱脱脱氢氢氢氢酶酶酶酶合合合合成成成成等等等等方方方方式式式式，，，，减减减减少少少少藻藻藻藻酸酸酸酸盐盐盐盐的的的的合合合合成成成成，，，，破破破破坏藻酸盐多糖蛋白复合物的结构坏藻酸盐多糖蛋白复合物的结构坏藻酸盐多糖蛋白复合物的结构坏藻酸盐多糖蛋白复合物的结构1.￿Kobayashi￿H￿et￿al.￿Am￿J￿Med.1995;99:26s-30s.藻酸盐藻酸盐藻酸盐藻酸盐含量含量含量含量(ug/mL)(ug/mL)大环内酯药物可有效抑制生物被膜的形成(美国蒙大拿州立大学细胞被膜工程中心)细菌生物膜的生长和成熟一个生物膜内的细胞一个生物膜内的细胞通过化学信号通过化学信号互相互相进行沟通进行沟通以形成微菌落并保持水通道开放与细菌的活性以形成微菌落并保持水通道开放与细菌的活性 这一沟通是利用化学信号进行的这一沟通是利用化学信号进行的, ,在这一过程中细菌利用细胞密度在这一过程中细菌利用细胞密度 依赖性调节系统，所以被称为依赖性调节系统，所以被称为“群体感应群体感应群体感应群体感应”Stoodley PAnnu Rev Microbiol 2002w铜绿假单胞菌的致病因子受一种被称为群体感应的，涉及细胞－细胞间复杂信号交流的环路所控制w两种体系–lasR/lasI lasR/lasI 系统系统由由 (Hormone-sensitive lipase,(Hormone-sensitive lipase,激素敏感性激素敏感性脂肪酶脂肪酶) HSL) HSL激活并确定产生弹性酶，外毒素激活并确定产生弹性酶，外毒素A A，碱性蛋白，碱性蛋白酶，并通过分泌途径产生蛋白酶，并通过分泌途径产生蛋白–rhl rhl 系统系统( (产生鼠李糖脂产生鼠李糖脂) ) 确定弹性酶，蛋白酶，绿脓菌素确定弹性酶，蛋白酶，绿脓菌素以及溶血素的产生以及溶血素的产生w大环内酯类可抑制铜绿假单胞菌群体感应的信号环路Tateda￿et￿al,￿AAC￿2001;￿Lesprit￿et￿al,￿ARRD￿2002;群体感应LasB / LasA 弹性酶弹性酶, 外毒素外毒素A, 碱性蛋白酶碱性蛋白酶, Xcp 分泌途径分泌途径鼠李糖脂鼠李糖脂 LasB 和和 LasA 弹性酶弹性酶 碱性蛋白酶碱性蛋白酶, 绿脓菌素绿脓菌素, 氰化物氰化物, Xcp 分泌途径分泌途径,稳定稳定σ因子因子(RpoS)生物膜分化生物膜分化免疫调节活性免疫调节活性自身诱导合酶自身诱导合酶: LasILasR3-oxo-C12-HSL自身诱导合酶自身诱导合酶: RhlIC4-HSLRhlR铜绿假单胞菌群体感应环路转录调节转录调节转录调节转录调节las 系统系统rhl 系统系统细胞外信号因子(N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯)细胞信号因子(N-丁酰-L-同型丝氨酸内酯)喹诺酮信号系统051015202530354045Miller units(x1000)阿奇霉素减少￿Las I 和和 rhl I的表达的表达 lasIAz 0Az +Az 0Az +rhlI0.00.20.40.60.81.01.21.41.6高丝氨酸内酯高丝氨酸内酯 ( M) 阿奇霉素对铜绿假单胞菌自身诱导产物的影响Az 0Az 0Az +Az +Az 0Az 0Az +Az + C12 C4020406080100 % of expression% of expressionrhlABrhlAB外源性自动感应补充rhlAB￿表达和弹性酶产生量Az +Az +C4 0C4 0Az +Az +C12 0C12 0Az +Az +C4 +C4 +Az 0 Az 0 C12 0C12 0Az 0Az 0C4 0C4 0Az +Az +C12 +C12 +弹性酶产生量弹性酶产生量弹性酶产生量弹性酶产生量小 结•大环内酯类药物的概述大环内酯类药物的概述•大环内酯类药物的抗炎和免疫调节作用大环内酯类药物的抗炎和免疫调节作用–免疫调节炎症细胞及细胞因子免疫调节炎症细胞及细胞因子–间接抑制炎症细胞趋化因子的合成间接抑制炎症细胞趋化因子的合成–抑制粘附分子的表达抑制粘附分子的表达–抑制粘液过度分泌，促进纤毛摆动抑制粘液过度分泌，促进纤毛摆动•大环内酯类药物对细菌生物被膜的作用大环内酯类药物对细菌生物被膜的作用–抑制细菌生物膜的形成抑制细菌生物膜的形成–对生物膜群体感应的干扰对生物膜群体感应的干扰–降低定植菌的毒力降低定植菌的毒力临床应用临床应用……•1.囊性肺纤维化囊性肺纤维化 McArdle JR,et al Clin Chest Med28(2007)347-360 •2.慢性副鼻窦炎慢性副鼻窦炎 Haryey RJ et,al Immunol Allergy clin N Am29(2009)689- 703 Haryey RJ et,al Immunol Allergy clin N Am29(2009)689- 703 •3.支气管哮喘支气管哮喘 Johnston,et al N Engl J Med 2006;354:1589-1600Johnston,et al N Engl J Med 2006;354:1589-1600•4.COPD Seemungal TAR,et al Am J Respir Crit Care Med Vol 178.pp1139-1147,2008Seemungal TAR,et al Am J Respir Crit Care Med Vol 178.pp1139-1147,2008•5.支气管扩张支气管扩张 Tsang KWT,et al Eur Respir J 1999;13:361-364Tsang KWT,et al Eur Respir J 1999;13:361-364•6.重症肺炎重症肺炎-脓毒症脓毒症 Restrepo MI et al Eur Respir J 2009;33:153-159Restrepo MI et al Eur Respir J 2009;33:153-159• ………..THANK YOU ! 。