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细胞生物学：实验4 feulgen反应显示细胞中的DNA.ppt

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      • 实验四Feulgen 反应显示细胞中反应显示细胞中的的DNA 实验目的•了解Feulgen反应的基本原理•熟悉Feulgen反应的染色方法•掌握生物学绘图方式 实验原理￿￿￿￿DNA可在酸性条件下水解，嘌呤—脱氧核糖之间的糖苷键断开，形成醛基(—CHO)，再用显示醛基的特异性试剂Schiff试剂处理，形成光镜下所见的细胞核内紫红色反应产物 ￿￿￿￿Schiff试剂的主要成分是碱性品红，碱性品红结构中的醌基是一个发色基团，经亚硫酸处理后，则醌基两端的双键打开，形成无色品红-硫酸复合物￿紫红色紫红色 洋葱根尖洋葱根尖Meristem 实验步骤1）取￿0.6cm￿长的洋葱根尖放到离心管中；2）加￿1ml￿1￿mol/L￿HCl￿在￿60℃￿放置8￿min；3）弃去￿HCl，用￿2ml￿蒸馏水浸泡漂洗片刻￿；4）弃去蒸馏水，加￿2ml￿Schiff试剂室温反应￿15-30min￿（可选用20min）￿；5）弃去schiff试剂，用￿1ml￿亚硫酸氢钾洗￿3￿次，每次浸泡￿2-3￿min；6）弃去亚硫酸氢钾，用￿2ml￿左右的蒸馏水漂洗￿2￿遍；7）吸取洋葱根尖置于玻片上，稍微吸取水分；滴加￿1￿滴￿4.5％￿醋酸，然后盖上盖玻片，轻压使根尖散开成单层云雾状；8）观察：在低倍镜下找到分生区细胞，再高倍镜下观察细胞各部位的染色反应。

      细胞膜/壁细胞质核仁细胞核标题染色方法（放大倍数） 作业：用铅笔绘制一个洋葱根尖细胞并注作业：用铅笔绘制一个洋葱根尖细胞并注明各主要部位的颜色明各主要部位的颜色绘图的要求见实验报告绘图的要求见实验报告P16 选取具有普遍性的细胞选取具有普遍性的细胞 线条平滑、点均一、细致线条平滑、点均一、细致 。

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