探讨EBV-DNA定量检测在鼻咽癌放疗后复发转移患者中的临床意义.docx

    探讨EBV-DNA定量检测在鼻咽癌放疗后复发转移患者中的临床意义    王海兰 谭洪文 杨志龙 李彩花 余双[摘要]目的 探討EBV-DNA定量检测在鼻咽癌放疗后复发转移患者中的临床意义方法 选取吉安市中心人民医院2019年1～11月就诊并经治疗后临床缓解的60例鼻咽癌患者作为研究对象，按照放疗后疗效分为持续缓解组38例、局部复发组13例、远处转移组9例所有患者均采用EB病毒核酸扩增（PCR）荧光定量检测全血中EBV-DNA基因拷贝数，比较三组患者的EBV-DNA阳性检出率和EBV-DNA拷贝数，进一步比较复发或转移者二次治疗前后EBV-DNA拷贝数的变化情况结果 局部复发组和远处转移组EBV-DNA阳性检出率及EBV-DNA拷贝数均高于持续缓解组，差异有统计学意义（P0.05）;局部复发组和远处转移组治疗后EBV-DNA拷贝数均低于治疗前，差异有统计学意义（P0.05）结论 不同放疗预后患者血浆EBV-DNA定量检测结果存在显著差异，血浆EBV-DNA定量检测能够作为监测鼻咽癌放疗后复发转移的可靠肿瘤标志物[关键词]鼻咽癌;放疗;复发;转移;EBV-DNA定量检测[] R739.63          [] A          [] 1674-4721（2020）7（b）-0106-04Exploration on the clinical significance of EBV-DNA quantitative detection in patients with recurrence and metastasis of nasopharyngeal carcinoma after radiotherapyWANG Hai-lan1   TAN Hong-wen1   YANG Zhi-long2   LI Cai-hua1   YU Shuang31. Department of Oncology， Ji′an Central People′s Hospital， Jiangxi Province， Ji′an   343000， China; 2. Intensive Care Unit， Ji′an Hospital of Shanghai Oriental Hospital， Jiangxi Province， Ji′an   343000， China; 3. Department of Oncology， Yichun People′s Hospital， Jiangxi Province， Yichun   336000， China[Abstract] Objective To explore the clinical significance of EBV-DNA quantitative detection in patients with recurrence and metastasis of nasopharyngeal carcinoma after radiotherapy. Methods A total of 60 patients with nasopharyngeal carcinoma treated in Ji′an Central People′s Hospital from January to November 2019 were selected as the research objects. According to the curative effect after radiotherapy， they were divided into three groups： continuous remission group （38 cases）， local recurrence group （13 cases） and distant metastasis group （9 cases）. EBV-DNA gene copies in whole blood were detected by PCR in all patients. The positive detection rate of EBV-DNA and the copy number of EBV-DNA were compared among the three groups， and the changes of EBV-DNA copies before and after the second treatment were further compared. Results The positive detection rate of EBV-DNA and the copy number of EBV-DNA in the local recurrence group and the distant metastasis group were higher than those in the continuous remission group， and the differences were statistically significant （P0.05）; the copy number of EBV-DNA in the local recurrence group and the distant metastasis group after treatment were lower than those before treatment， the difference was statistically significant （P0.05）. Conclusion There are significant differences in the results of quantitative detection of plasma EBV-DNA in patients with different radiotherapy prognosis. Quantitative detection of plasma EBV-DNA can be used as a reliable tumor marker to monitor the recurrence and metastasis of nasopharyngeal carcinoma after radiotherapy.[Key words] Nasopharyngeal carcinoma; Radiotherapy; Recurrence; Metastasis; Quantitative detection of EBV-DNA[基金项目]江西省吉安市科学技术局项目（吉市科计字[2019]8号（19））鼻咽癌是临床发病率较高的一种头颈部恶性肿瘤，其发病具有明显的地域特色，中国南方、东南亚和北非等国家和地区是该病的高发区域[1]。

放疗是临床治疗鼻咽癌的主要手段，能有效控制患者病情进展，但复发率仍较高调查研究显示，40%～50%的鼻咽癌完全缓解者放疗后仍会出现复发或转移的情况，导致治疗失败[2]如何早期监测复发和转移是采取治疗干预、延长患者生存时间的关键影像学检查是判断鼻咽癌复发或转移的常规手段，但检查费用较高，敏感性也略显不足[3]近几年，越来越多的研究报道指出，采用EB病毒核酸扩增（PCR）荧光定量技术进行血浆EBV-DNA定量检测在鼻咽癌的诊断和病情评估中具有一定指导价值，可作为预测患者放疗预后的生化指标[4-5]部分专家也指出，血浆EBV-DNA定量检测能够较临床或影像学检查早3.5～6.0个月发现肿瘤转移，敏感性和可靠性均较好[6]本研究即对不同放疗预后患者EBV-DNA定量检测结果的差异进行比较分析，以期为及早发现肿瘤复发或转移、开展治疗干预提供指导，现报道如下1资料与方法1.1一般资料选取吉安市中心人民医院2019年1～11月就诊并经治疗后临床缓解的60例鼻咽癌患者作为研究对象所有患者中，男47例，女13例，年龄25～64岁，平均（50.22±5.45）岁放疗后按照治疗预后分为持续缓解组38例、局部复发组13例、远处转移组9例。

其中，持续缓解组男30例，女8例，年龄25～61岁，平均（49.52±5.61）岁;局部复发组男10例，女3例，年龄26～63岁，平均（54.15±5.75）岁;远处转移组男7例，女2例，年龄26～64岁，平均（55.05±5.80）岁三组患者的性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性所有患者均知情同意，本研究经吉安市中心人民医院医学伦理委员会审核批准1.2纳入及排除标准纳入标准：经手术病理检查明确诊断为鼻咽癌低分化鳞癌或非角化性癌;临床分期为cT1-4N0-3M0;调强适形放疗前血浆EBV-DNA拷贝数较高，放疗后血浆EBV-DNA拷贝数为0 copies/ml;影像学检查证实临床缓解;签署知情同意书排除标准：合并其他恶性肿瘤者;有免疫系统或血液系统疾病者;随访失访或因个人原因中途退出本研究者1.3方法所有患者均抽取外周静脉血2 ml外送至广州金域第三方检测中心，采用EB病毒PCR荧光定量检测全血中EBV-DNA基因拷贝数，所用试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司，操作步骤按照试剂盒说明书进行结果判定：增长曲线不呈S型或Ct值=30时，判断为EBV-DNA阴性，其余情况为阳性。

局部复发者经鼻咽镜检查结合病理活检证实，颈部淋巴结复发经包块穿刺活检证实，远处转移经影像学检查判定复发或转移者视情况选择局部姑息放疗、姑息化疗或靶向治疗，并继续监测血浆EBV-DNA拷贝数1.4观察指标比较三组患者的EBV-DNA阳性检出率和EBV-DNA拷贝数，进一步比较复发或转移者二次治疗前后EBV-DNA拷贝数变化情况1.5统计学方法采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义2结果2.1三组EBV-DNA阳性检出率及EBV-DNA拷贝数的比较局部复发组和远处转移组患者的EBV-DNA阳性检出率及EBV-DNA拷贝数均高于持续缓解组，差异有统计学意义（P0.05）（表1）2.2复发转移者二次治疗前后EBV-DNA拷贝数的比较局部复发组和远处转移组患者治疗后的EBV-DNA拷贝数均低于治療前，差异有统计学意义（P0.05）（表2）3讨论鼻咽癌是我国发病率较高的一种恶性肿瘤，局部侵袭力和淋巴转移能力较强，由于其病理特征较为特殊，因此放疗十分敏感，临床上也多采取放疗进行治疗。

但调查研究显示，鼻咽癌患者放疗临床缓解后容易出现局部复发和远处转移等不良情况，严重影响患者的预后效果[7]有专家指出，若能早期发现局部复发或远处转移，并及时予以个体化二次治疗则能够进一步改善患者的预后[8]因此，对鼻咽癌放疗后复发和转移的监测工作十分重要影像学方法是监测鼻咽癌放疗后复发和转移的传统手段，临床开展也较为广泛，但频繁的影像检查会给患者带来沉重的经济负担，同时在诊断复发转移方面敏感性也稍显不足，漏诊率难以令人满意分析原因主要为：CT、MRI等影像手段属于局部显像技术，无法完全检测到所有可能发生转移的部位;CT、MRI等影像手段在放疗后肿瘤浸润与纤维化鉴别、发现较小的转移灶、残存肿瘤性质判断等方面存在一定局限性[9]EBV-DNA在初诊鼻咽癌患者中的重要性已得到国内外专家的一致认可，国外大量研究报道指出，血浆中EBV-DNA拷贝数与鼻咽癌TNM临床分期呈正相关，即随着鼻咽癌TNM临床分期的升高血浆EBV-DNA拷贝数水平越高[1。