
实验一观察DNA和RNA在真核细胞中的分布.doc
3页实验一 观察DNA和RNA在真核细胞中的分布一、教学目标1、知识与技能:(1)学生分析说明DNA和RNA在结构上的不同点(2)学生回顾显微镜的使用方法2、过程与方法:(1)学生掌握制作装片的方法(2)使用试剂对材料进行染色3、情感态度和价值观:培养学生的动手能力,提升学生积极、乐观的学习态度二、教学重点、难点1、教学重点:实验原理、显微镜的使用2、教学难点:甲基绿使DNA呈绿色,吡罗红使RNA呈红色三、实验原理与解析(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布3)盐酸的作用① 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;② 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合四、实验器材1.材料 人的口腔上皮细胞,洋葱表皮细胞,根尖细胞,蛙或蟾蜍的血细胞,果肉细胞2.用具 400 mL烧杯,250 mL烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜。
3.试剂及配制方法(1)试剂 质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,乙酸钠,乙酸,蒸馏水,吡罗红甲基绿混装粉如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉,可以分别购买甲基绿和吡罗红G,然后按A液的第二种方法配制(见下文) (2)染色剂的配制①染色剂A液的两种配制方法第一种方法:取吡罗红甲基绿粉1 g,加入到100 mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用第二种方法:取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中,即为A液,放入棕色瓶中备用②染色剂B液的配制方法B液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成先取乙酸钠16.4 g,用蒸馏水溶解至1 000 mL备用;再取乙酸12 mL,用蒸馏水稀释至1 000 mL备用取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL,加蒸馏水50 mL,配成pH为4.8的B液(缓冲液)③染色剂的配制染色剂是由A液、B液混合配制而成的取A液20 mL和B液80 mL混合,就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂应该注意的是该试剂应现用现配五、 主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例)1.取材① 滴: 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液;② 刮: 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;③ 涂: 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;④ 烘: 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2.水解① 解: 将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解;② 保: 将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟3.冲洗涂片① 冲: 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟;② 吸: 用吸水纸吸去载玻片上的水分4.染色① 染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟;② 吸: 吸去多余染色剂;③ 盖: 盖上盖玻片5.观察① 低: 在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;② 高: 转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况六、注意事项1.材料的选择① 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察;② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)2.取材要点① 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质;② 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗4.安全要点① 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂;② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。
5.换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋七、实验相关知识1.加入8%盐酸的目是:改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞;使染色剂中的DNA与蛋白质分离;杀死细胞,有利于DNA与染色剂结合2.为什么要进行水解:甲基绿和吡罗红不是活细胞所需要的物质,正常情况下,无法穿过细胞膜进入细胞内,因此实验中使用盐酸破坏细胞膜,增加细胞膜的通透性,以方便染色剂进入细胞,同时,盐酸还能使细胞中染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与甲基绿染色剂结合3.将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在盛有30℃温水的大烧杯中保温五分钟水浴加热的目的时使小烧杯:水浴加热的目的是使小烧杯受热均匀解离的目的是改变膜的通透性,便于染色济进入,且使染色体中的蛋白质和DNA分开,便于染色。












