活化部分凝血活酶时间APTT.doc

活化部分凝血活酶时间（ APTT）测定方法操作规程一.【产品名称】 活化部分凝血活酶时间（APTT）测定试剂盒（鞣花酸）（凝固法）二.【预期用途】 供医疗机构用于体外人血浆中活化部分凝血活酶时间测定,用于辅助诊断三. 【临床意义】 APTT 测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验，也可作为内源性途径凝血因子的定量试验，可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子，特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前激肽释放酶的测定同事，APTT 测定可用于肝素治疗监控APTT 延长：见于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ减低，纤维蛋白原缺乏症，纤溶活力增强，抗凝物质存在（如血内肝素含量增加及口服抗凝剂），是监控肝素治疗的重要指标APTT 缩短：见于高凝状态，血栓性疾病，如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合征等四.【检验原理】 待测血浆加入部分凝血活酶溶液，在 Ca 艹参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆活化部分凝血活酶时间五.【主要组成成分】 1.APTT（鞣花酸）试剂：10 瓶 （含脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂）2. 0.025mol/L CaCl2：1 瓶 （含氯化钙、防腐剂）3.说明书：1 份注：不同批号试剂盒中 0.025mol/L CaCl2 可以互换。

六.【储存条件及有效期】 未开启试剂于+2℃～+8℃保存可稳定至标签所示失效日期； 2.试剂开启后于+2℃～+8 ℃可保存 4天试剂保存应防止冷冻 七.【适用仪器】 血凝分析仪八.【样本要求】 1. 静脉采血，置于含有 1/10 体积 0.109mol/L 枸橼酸酸钠抗凝液（ 1 份抗凝液+9 份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm （或 2500g）离心 15 分钟，收集上层液（血浆，黄色）2.采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管不宜使用普通玻璃器，避免凝血因子活化3.采血时止血带不可束缚过紧，而且不应超过 5 分钟，否则导致凝血及纤溶因子活化4.不宜使用 EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂5.红细胞比容超过 55%或小于 20%时，应调整抗凝剂用量抗凝剂体积（ml）=0.00185x 血液体积（ml） x（100 - 比容）6.样本采集避免溶血及组织液污染7.样本暴露于空气中可是 pH 值升高，因此若不能立即测定，应将样本加塞保存8.样本在不同条件下可保存时间如下：+2℃～+8 ℃保存，不宜超过 6 小时；+22~+24℃保存，不宜超过 2 小时测定。

九.【检验方法】 1. 试剂使用前请振摇均匀2. 半自动血凝仪、手工测定（1） 取待测血浆 0.1ml，加入 37℃预温 APTT 试剂 0.1ml，37 ℃孵育 5 分钟2）加入 37℃预温 0.025mol/L CaCl2 溶液 0.1ml，记录凝固时间3. 全自动血凝仪测定请按仪器提供的参数操作十.【参考值】 22～38 秒（n=200， 2SD 作为参考值范围的上、下限）X临床实验室可建立自己的参考值范围十一. 【检验结果的解释】 1.样本内若有残留细胞，经冻融后细胞膜受破坏可影响结果2.测定温度 36.5~38.5℃，过低或过高温度均使 APTT 延长3. 口服避孕药、雌激素、妊娠、香豆素类药物、肝素、天冬酰胺酶、纳洛酮可影响 APTT4.当测定结果出现异常时，应检查检测系统的每个组成，如试剂、样本、质控、仪器等，必要时重新测定十二. 【检验方法的局限性】凝血过程包括一系列反应，其受到许多测试前因素的影响，包括样本采集及保存、技术人员熟练程度、干扰物质等，必须严格控制这些因素十三. 【产品性能指标】 1.外观：APTT（鞣花酸）试剂为混悬液；0.025mol/L CaCl2 为无色透明液体。

2.装量：不低于规格标示量的 95%3.正常血浆测量值：正常血浆测试均值≤35s4.重复性：质控血浆重复性 CV≤5%5.稳定性：有效期满测定外观、正常血浆测量值、重复性符合要求十四. 【注意事项】 1.本产品仅供体外诊断使2.实验材料不能有去污剂存在，否则测定结果会出现假性延长3.APTT（鞣花酸）试剂预温不可超过 15 分钟半自动血凝仪测定时，预温试剂应按每天实际使用量量取预热，未用完的预热试剂应弃用4.用浊度法测定终点的自动化凝血仪，溶血和较明显的黄疸及脂血会影响测定结果，此时宜用手工法或电子机械式凝血仪测定5.手工操作时，光线要充足，活化部分凝血活酶时间的终点计算以出现混浊的初期凝固为准6.APTT（鞣花酸）试剂与血浆温育时间不宜少于 5 分钟7.APTT（鞣花酸）试剂长期保存后可能会形成黄色沉淀，用前请振摇均匀8.用不同血凝仪测定时所需样本与试剂比例、体积可能会不同，应根据实际所用仪器进行参数调整。