A群脑膜炎球菌多糖疫苗.docx

A 群脑膜炎球菌多糖疫苗A Qun Naomoyanqiujun Duotang YimiaoGroup A Meningococcal Polysaccharide Vaccine本品系用 A 群脑膜炎奈瑟菌培养液，经提取获得的荚膜多糖抗原，纯化后加入适宜稳 定剂后冻干制成用于预防A群脑膜炎球菌引起的流行性脑脊髓膜炎1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求2 制造2.1菌种 生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定2.1.1 名称及来源生产用菌种为A群脑膜炎奈瑟菌CMCC 29201 （A4）菌株2.1.2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定2.1.3 种子批的传代主种子批启开后至工作种子批，传代应不超过 5 代，工作种子批启开后至接种发酵罐 培养，传代应不超过5 代2.1.4 种子批菌种的检定2.1.4.1 培养特性菌种接种于含10%羊血普通琼脂培养基，脑膜炎球菌在25°C不生长于35〜37°C二氧 化碳的环境中培养16〜20小时，长出光滑、湿润、灰白色的菌落，菌苔易取下，在生理氯化 钠溶液中呈现均匀混悬液。

2.1.4.2染色镜检染色镜检应为革兰阴性双球菌、单球菌2.1.4.2生化反应发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气；不发酵乳糖、甘露醇、果糖及蔗糖（附录XW）2.1.4.3血清学试验取经35〜37C培养16〜20小时的菌苔，混悬于含0.5%甲醛的生理氯化钠溶液中，或 56C加热30分钟杀菌以后，使每1ml含菌1.0X109〜2.0X109,与同群参考血清做定量凝 集反应，置35〜37C过夜，次日再置室温2小时观察结果，以肉眼可见清晰凝集现象（+） 之血清最高稀释度为凝集反应效价，必须达到血清原效价之半2.1.5种子批的保存种子批应冻干保存于8C以下2.2 原液2.2.1 生产用种子启开工作种子批菌种，经适当传代，检定培养特性及染色镜检合格后接种培养基经检 定合格后，接种于改良半综合培养基或其他适宜培养，制备数量适宜的生产用种子2.2.2 生产用培养基 采用改良半综合培养基或经批准的其他适宜培养基培养基不应含有与十六烷基三甲基溴化铵能形成沉淀的成分2.2.3 培养 采用培养罐液体培养在培养过程中取样进行纯菌检查，涂片做革兰染色镜检，如发现污染杂菌，应废弃2.2.4 收获及杀菌于对数生长期的后期或静止期的前期中止培养，取样进行菌液浓度测定及纯菌检查， 合格后在收获的培养液中加入甲醛溶液杀菌，或采用加热方法杀。

杀菌条件以确保杀菌完 全又不损伤其多糖抗原为宜2.2.5 纯化2.2.5.1 去核酸将已杀菌的培养液（单批或多批混合）离心后收集上清液，加入十六烷基三甲基溴化 铵，充分混匀，形成沉淀；离心后的沉淀物加入适量氯化钙溶液，其最终浓度为lmol/L，使 多糖与十六烷基三甲基溴化铵解离；加入乙醇至最终浓度为25%, 2〜8°C静置1〜3小时或过 夜，离心收集澄清的上清液2.2.5.2 沉淀多糖 于上述上清液中加入冷乙醇至最终浓度为80%，充分振摇离心收集沉淀，用无水乙醇及丙酮分别洗涤各洗2次以上,沉淀物即为多糖粗制品应保存在-20C以下，待纯化2.2.5.3 多糖纯化将多糖粗制品溶解于1/10饱和中性醋酸钠溶液稀释至适宜浓度”使其浓度达10〜 20mg/ml;按适当比例1 ： 2容量用冷酚（100g结晶酚溶于40ml的1/10饱和醋酸钠溶液 提 取数次，离心收集上清液，并用0.1mol/L氯化钙溶液或其他适宜溶液透析或超滤，加入乙醇 至终浓度为 75%〜80%；离心收集的沉淀物用无水乙醇及丙酮分别洗涤，干燥后用灭菌注射用 水溶解沉淀物，除菌过滤后即为纯化多糖原液提取过程应尽量在15C以下进行2.2.6 原液检定纯化多糖原液除菌过滤后，取按3.1项进行。

2.2.7 保存及有效期于-20C以下保存，自多糖粗制品制造之日起有效期为5年2.3 半成品2.3.1 配制半成品可由单批或多批多糖原液合并后用无菌无热原乳糖和灭菌注射用水稀释原液 每1次人用剂量含多糖应不低于30 “ g,乳糖2.5〜3.0mg2.3.2 半成品检定按 3.2 项进行2.4 成品2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定2.4.2 分装及冻干应符合“生物制品分装和冻干规程”规定冻干过程中制品温度应不高于30°C，真空 或充氮封口2.4.3 规格每瓶含多糖150p g、300p g每1次人用剂量含多糖应不低于30p go2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定3 检定3.1 原液检定3.1.1 鉴别试验采用免疫双扩散法（附录哪C）,本品与A群脑膜炎球菌抗体应形成明显沉淀线3.1.2 化学检定3.1.2.1 固体总量依法测定（附录⑷M）o3.1.2.2 蛋白质含量应小于10mg/g （附录W B第二法）3.1.2.3 核酸含量应小于10mg/g，核酸在波长260nm处的吸收系数（E1%1cm）为200 （附录II A）3.1.2.40-乙酰基含量应不低于2mmol/g （附录W F））3.1.2.5 磷含量应不低于80mg/g （附录⑷A） o3.1.2.6 多糖分子大小测定多糖分子的KD值应不高于0.40, KD值小于0.5的洗脱液多糖回收率应大于65% （附录 W G） o3.1.3 无菌检查依法检查（附录XH A）,应符合规定。

3.1.4 细菌内毒素检查应不高于50100EU/P g （附录XX E凝胶限量试验）；也可采用热原检查法（附录XX D） 检查，应符合规定，注射剂量按家兔体重每1kg注射0 025p g多糖3.2 半成品检定无菌检查依法检查（附录X A），应符合规定3.3 成品检定除水分测定、多糖分子大小测 外，按制品标示量加入灭菌 PBS 复溶后进行其余各项 检定3.3.1 鉴别试验采用免疫双扩散法（附录哪C）,本品应与A群脑膜炎球菌抗体形成明显沉淀线3.3.2 物理检查3.3.2.1 外观应为白色疏松体，按标示量加入PBS应迅速复溶为澄明液体，无异物3.3.2.2装量差异 按附录IA中装量差异项进行，应符合规定3.3.3 化学检定3.3.3.1 水分应不高于3.0% （附录⑷D）3.3.3.2 多糖含量每1次人用剂量多糖含量应不低于30p g0根据WHO规程规定的计算公式（多糖含量： 磷含量为1000 : 75）,先测定磷含量应不低于2.25p g （附录⑷A）,再计算出多糖含量3.3.3.3 多糖分子大小测定每5批疫苗至少抽1批检查多糖分子大小KD值应不高于0.40, KD值小于0.5的洗脱 液多糖回收率应大于65% （附录哪G）。

3.3.4 无菌检查依法检查（附录XH A）,应符合规定3.3.5 异常毒性检查依法检查（附录XX F）,应符合规定每只豚鼠注射剂量为500p g/ml,每只小鼠注射 剂量为 100p g/0 5ml3.3.6 热原检查依法检查（附录XX D）,应符合规定注射剂量按家兔体重每1kg注射0.025m g多糖 3.4 稀释剂检定 稀释剂为无菌无热原 PBS3.4.1pH 值应为6.8〜7.2 （附录V A）3.4.2 无菌检查依法检查（附录X A）,应符合规定3.4.3 异常毒性检查依法检查（附录X F）,应符合规定3.4.4 热原检查依法检查（附录X D）,应符合规定注射剂量按家兔体重每1kg注射1ml4 保存、运输及有效期于2〜8°C避光保存和运输，自生产之日起有效期为2年5 使用说明 应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容A 群脑膜炎球菌多糖疫苗使用说明［药品名称］通用名： A 群脑膜炎球菌多糖疫苗英文名称： Group A Meningococcal Polysaccharide Vaccines 汉语拼音： A Qun Naomoyanqiujun Duotang Yimiao［成分和性状］本品系用A群脑膜炎奈瑟氏菌培养液，经提取获得的荚膜多糖抗原，纯化后加入适宜稳 定剂后冻干制成。

为白色疏松体，复溶后为澄明液体辅料：按批准的执行［接种对象］6个月〜15周岁少年儿童［作用与用途］接种本疫苗后，可使机体产生体液免疫应答用于预防A群脑膜炎球菌引起的流行性脑 脊髓膜炎［规格］每瓶为150p g、300|j g多糖每1次人用剂量含多糖30p go［用法用量］［免疫程序和剂量(1) 按标示量加入所附稀释液PBS复溶，摇匀立即使用2) 于上臂外侧三角肌附着处皮下注射30p go(3) 基础免疫注射2针，从6月龄开始，每针间隔3个月；3岁以上儿童只需注射1次接 种应于流行性脑脊髓膜炎流行季节前完成根据需要每3年复种1次在遇有流行情况下，可扩大年龄组作应急接种［ 不良反应］本疫苗反应轻微，偶有短暂低热，局部稍有压痛感，可自行缓解常见不良反应：⑴ 接种后 24 小时内，在注射部位可能感到疼痛和触痛，注射局部红肿浸润弱、中度反, 应 多数情况下于2~3天内自动消失⑵ 接种者在接种疫苗后7〜2周内，可能出现一过性发热反应其中大多数的发热反应为轻 度发热反应，持续1~2 天后可自行缓解，一般不需处理，必要时适当休息，多喝开水， 注意保暖，防止继发感染；对于中度发热反应或发热时间超4过8小时者，可给予物理或 药物方法进行对症处理。

罕见不良反应：⑴ 严重发热反应，应给予物理及药物方法进行对症处理，以防高热惊厥⑵ 注射局部重度红肿或其它并发症，应给予对症处理可用干净的毛巾热敷，每日数次，每 次 10〜15 分钟极罕见不良反应：⑴过敏性皮疹：个别接种者在接种疫苗后2小时内可能出现皮疹，应及时就诊，给予抗 过敏治疗⑵ 过敏性休克：一般在注射疫苗后7 小时内发生应及时抢救，注射肾上腺素进行治.疗⑶ 过敏性紫癜：极个别接种者可出现过敏性紫癜病例，出现过敏性紫癜反应时应及时就诊 应用皮质固醇类药物给予抗过敏规范治疗，治疗不当或不及时有可能并发紫癜性肾炎⑷ 偶见血管神经性水肿、变态反应性脱髓鞘神经炎［禁忌］(1) 有癫痫、惊厥及过敏史者；(2) 患脑部疾患、肾脏病、心脏病及活动性结核者；(3) 患急性传染病及发热者1)已知对该疫苗的任何组份过敏者2) 患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者3) 对脑病、未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者［注意事项］(1)疫苗溶解后有异物或疫苗瓶有裂纹、瓶塞松动者，均不得使用2)疫苗溶解后，应按规定人份(剂量)一次用完，不得分多次使用，剩余的疫苗应废弃⑴ 以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者、 哺乳期妇女。

⑵ 疫苗瓶有裂纹、标签不清或失效者、疫苗复溶后出现异常浑浊者均不得使用⑶ 疫苗开启后应立即使用，如需放置，应置^8°C于一小时内用完，剩余均应废弃⑷ 应备有肾上腺素等药物，以供偶有发生的严重过敏反应时急救用，接受注射者在注射后 应在现场观察至少30 分钟⑸ 接种本品与注射免疫球蛋白应至少间隔1 个月以上，以免影响免疫效果［贮藏］于2〜8°C避光保存和运输［有效期］2年24个月［执行标准］［批准文号］［生产企业］企业名称：。