组织切片染色技术(PPT46页).ppt

组织切片染色技术组织切片染色技术学习目标掌握：染色、常规染色的概念；掌握：染色、常规染色的概念；HE染色的基本步骤染色的基本步骤 熟悉：染色的目的、原理；常用染色熟悉：染色的目的、原理；常用染色术语；染色前后的处理；苏木素术语；染色前后的处理；苏木素- -伊伊红染色液的配制红染色液的配制 了解：染色的注意事项了解：染色的注意事项 染色概述第一节一、染色的概念n n就是利用染料在组织切片上给予颜色，使其与组织或细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分 n n染色是制片过程中的一个重要环节 二、染色的目的n n将染料配制成溶液n n将组织切片浸入染色剂内n n经一定的时间，组织或细胞及其他异常的成分被染上不同深浅的颜色n n对光产生不同的折射率n n便于在光镜下观察 u 染色的物理作用uu(1(1）毛细管作用及渗透作用）毛细管作用及渗透作用uu染色剂与组织细胞没有牢固的结合染色剂与组织细胞没有牢固的结合uu(2)(2)吸收作用：又称溶解学说吸收作用：又称溶解学说uu组织吸收染色剂，牢固的结合。

组织吸收染色剂，牢固的结合uu组织的着色与溶液的颜色相同组织的着色与溶液的颜色相同三、染色原理uu( (3)3)吸附作用吸附作用 n n是固体物质的特性，即较大的物体能从周围溶液是固体物质的特性，即较大的物体能从周围溶液( (染染液液) )中吸附一些小颗粒中吸附一些小颗粒( (化合物或离子化合物或离子) )到自身的特性到自身的特性n n细胞中各种蛋白质或胶体有不同的吸附面，因此能选细胞中各种蛋白质或胶体有不同的吸附面，因此能选择性地吸收不同的离子，即某种蛋白质对某种染色剂择性地吸收不同的离子，即某种蛋白质对某种染色剂有吸附作用有吸附作用, ,而对别种染色剂无吸附作用，这就可以解而对别种染色剂无吸附作用，这就可以解释鉴别染色现象释鉴别染色现象 三、染色原理三、染色原理uu 染色的化学作用n n染色剂按性质可分为酸性、碱性和中性染色染色剂按性质可分为酸性、碱性和中性染色剂，而动、植物的细胞内一般也可区分为酸性剂，而动、植物的细胞内一般也可区分为酸性( (阴离子阴离子) )和碱性和碱性( (阳离子阳离子) )部分n n当碱性染色剂溶液中的有色部分成为阳离子当碱性染色剂溶液中的有色部分成为阳离子时，就能与细胞的阴离子时，就能与细胞的阴离子( (酸件部分酸件部分) )较牢固地较牢固地结合，当酸性染色剂溶液中的有色部分成为阴结合，当酸性染色剂溶液中的有色部分成为阴离子时，就能与细胞内的阳离子离子时，就能与细胞内的阳离子( (碱性部分碱性部分) )较较牢固地结合。

牢固地结合 三、染色原理 例如，细胞核（尤其是核内的染色质）主要由核酸组成，是酸性的组成成分，故和碱性染色剂(苏木精)的亲和力很强，易于着色细胞质含碱性物质，故和酸性染色剂(伊红)的亲和力很大，易于着色n n进行性染色和退行性染色 n n进行性染色：组织成分着色由浅至深，当达到所进行性染色：组织成分着色由浅至深，当达到所需要的强度时，终止染色需要的强度时，终止染色n n此种方法无需此种方法无需“ “分化分化” ”，例如，卡红染色例如，卡红染色 n n退行性染色：是先把组织浓染过度，超过所需的退行性染色：是先把组织浓染过度，超过所需的程度，然后再用某些溶液脱去多余的染色剂，以程度，然后再用某些溶液脱去多余的染色剂，以达到适当的深度，并使不应着色的组织细胞脱色达到适当的深度，并使不应着色的组织细胞脱色n n这个步骤称为这个步骤称为“ “分化分化” ” 三、染色原理n n直接染色，间接染色和媒染剂 n n直接染色：染色无需第三种物质参加，染色剂和组织直接染色：染色无需第三种物质参加，染色剂和组织即可直接结合着色即可直接结合着色 n n间接染色：单独染料本身的水溶液或酒精溶液，几乎间接染色：单独染料本身的水溶液或酒精溶液，几乎不能与组织细胞结合或结合的能力很弱，必须有第三不能与组织细胞结合或结合的能力很弱，必须有第三种成分种成分————媒染剂参与，才能使染色剂与组织细胞有媒染剂参与，才能使染色剂与组织细胞有效地结合起来。

效地结合起来n n媒染剂：通常是双价或三价金属如铝、铁的硫酸盐或媒染剂：通常是双价或三价金属如铝、铁的硫酸盐或氧化物媒染剂在染色中起着架桥作用，既能与染料氧化物媒染剂在染色中起着架桥作用，既能与染料结合又能与组织相结合，达到了促进染色的效果结合又能与组织相结合，达到了促进染色的效果 三、染色原理n n促染剂 n n用以加强染料和组织细胞结合能力的物质称为促染剂用以加强染料和组织细胞结合能力的物质称为促染剂n n促染剂如化学反应中的催化剂，少量存在就有明显的促染剂如化学反应中的催化剂，少量存在就有明显的促染作用它们的作用机制也许是降低表面张力或是促染作用它们的作用机制也许是降低表面张力或是改变了染液的改变了染液的pHpH值 三、染色原理n n分化剂 n n在退行性染色中，附在组织细胞上多余的染色剂需用在退行性染色中，附在组织细胞上多余的染色剂需用某些特定的溶液把目的物以外的部分脱去，从而使目某些特定的溶液把目的物以外的部分脱去，从而使目的物与周围组织形成鲜明的对比，同时使目的物本身的物与周围组织形成鲜明的对比，同时使目的物本身的色泽也深浅适当的色泽也深浅适当n n这种选择性地除去多余染色剂的过程称为这种选择性地除去多余染色剂的过程称为“ “分化分化” ”，，所使用的溶液即所使用的溶液即“ “分化剂分化剂” ”。

有酸性分化剂有酸性分化剂 、氧化分、氧化分化剂化剂 、媒染分化剂、媒染分化剂 三、染色原理n n变色反应和正色反应 n n变色反应：染色反应最后目的物所呈现的颜色和染色变色反应：染色反应最后目的物所呈现的颜色和染色剂当初的颜色不同如：黏液用甲苯胺蓝可染成红色，剂当初的颜色不同如：黏液用甲苯胺蓝可染成红色，而其余组织则染成不同色调的蓝色而其余组织则染成不同色调的蓝色n n正色反应：染色反应最后目的物所呈现的颜色和染色正色反应：染色反应最后目的物所呈现的颜色和染色剂的颜色相同如：酸性品红总是将组织染成不同色剂的颜色相同如：酸性品红总是将组织染成不同色调的红色；淡绿染成不同色调的绿色调的红色；淡绿染成不同色调的绿色三、染色原理四、染色剂n n（一）染色剂染色的化学基础n n染色剂分子能够显示颜色的基因，称为染色剂分子能够显示颜色的基因，称为发色团发色团 主要的主要的发色团发色团有：有： －N=N， －N=O， C=O， C=C 偶氮基偶氮基偶氮基偶氮基 亚硝基亚硝基亚硝基亚硝基 羰基羰基羰基羰基 烯基烯基烯基烯基n n含有发色团的苯环化合物，称为含有发色团的苯环化合物，称为色原色原。

苯苯+ +发色团发色团= =色原色原n n染色剂分子中还需具备促使染色剂与组织细胞相结合染色剂分子中还需具备促使染色剂与组织细胞相结合的基因，这样基因又称为的基因，这样基因又称为助色团助色团如如—NH—NH2 2 —COOH —OH —SO —COOH —OH —SO3 3H H 氨基氨基 羧基羧基 羟基羟基 磺酸基磺酸基四、染色剂n n（二）染色剂的分类n n1 1．按来源分．按来源分 n n2 2．按主要用途分．按主要用途分 n n3 3．按染色剂分子中的发色团分．按染色剂分子中的发色团分 n n4 4．按染色剂的化学性质分．按染色剂的化学性质分 四、染色剂n n1．按来源分n n（（1 1）天然染色剂：）天然染色剂：苏木素、胭脂红、地衣红和番红花苏木素、胭脂红、地衣红和番红花n n（（2 2）合成染色剂：）合成染色剂：从煤焦油中提取的苯衍生物。

从煤焦油中提取的苯衍生物无机化合物，如硝酸银、氯化金、磺、锇酸和高锰酸钾等无机化合物，如硝酸银、氯化金、磺、锇酸和高锰酸钾等四、染色剂n n2．按主要用途分n n（（1 1）胞核染色剂：）胞核染色剂：苏木素、胭脂红、甲苯胺蓝、美蓝和孔雀绿等苏木素、胭脂红、甲苯胺蓝、美蓝和孔雀绿等n n（（2 2）胞质染色剂：）胞质染色剂：伊红、淡绿、橘黄伊红、淡绿、橘黄G G、酸性品红和苦味酸等酸性品红和苦味酸等n n（（3 3）脂质染色剂：）脂质染色剂：苏丹苏丹ⅢⅢ、苏丹、苏丹ⅣⅣ、苏丹黑、硫酸尼罗蓝和油红等苏丹黑、硫酸尼罗蓝和油红等四、染色剂n n3 3．按染色剂分子中的发色团分．按染色剂分子中的发色团分n n（（1 1）亚硝基类：发色团为亚硝基（）亚硝基类：发色团为亚硝基（-NO)-NO)，如萘酚缘，如萘酚缘-B-Bn n（（2 2）硝基染料：发色团是硝基（）硝基染料：发色团是硝基（-NO-NO2 2），如苦味酸如苦味酸n n（（3 3）偶氮类：发色团为偶氮基（）偶氮类：发色团为偶氮基（-N=N--N=N-），属于这一类的染色剂），属于这一类的染色剂 有橘黄有橘黄G G、刚果红、俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂。

刚果红、俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂n n（（4 4）醌亚胺类：含有两个发色团，一个是印胺基（）醌亚胺类：含有两个发色团，一个是印胺基（-N=-N=）、一个）、一个是醌型苯环，如硫堇、美蓝、甲苯胺蓝是醌型苯环，如硫堇、美蓝、甲苯胺蓝O O、硫酸尼罗蓝、中性红和、硫酸尼罗蓝、中性红和碱性藏红花碱性藏红花O O、焦油紫等焦油紫等n n（（5 5）苯甲烷染料：发色团是醌型苯环，如孔雀缘、浅绿、碱性品）苯甲烷染料：发色团是醌型苯环，如孔雀缘、浅绿、碱性品红、酸性品红、结晶紫和甲基缘等红、酸性品红、结晶紫和甲基缘等n n（（6 6）山叮染料：发色团是醌型苯环，如派罗宁和伊红）山叮染料：发色团是醌型苯环，如派罗宁和伊红Y Y等n n（（7 7）蒽醌染料：此类染色剂含有色原蒽醌，如茜素和胭脂虫酸蒽醌染料：此类染色剂含有色原蒽醌，如茜素和胭脂虫酸n n（（8 8）噻唑类）噻唑类n n（（9 9）喹啉类）喹啉类使用极少使用极少 四、染色剂n n4．按染色剂的化学性质分n n（（1 1）酸性染色剂：）酸性染色剂： 色原色原- -助色团助色团-Na→[-Na→[色原色原- -助色团助色团]+Na]+Na+ +。

常用的如伊红、酸性品常用的如伊红、酸性品红、苦味酸、橘黄红、苦味酸、橘黄G G、刚果红、水溶性苯胺蓝和淡绿等酸性染、刚果红、水溶性苯胺蓝和淡绿等酸性染料常用以染细胞质等碱性成份料常用以染细胞质等碱性成份n n（（2 2）碱性染色剂：）碱性染色剂： 色原色原- -助色团助色团- -ClCl→[→[色原色原- -助色团助色团] ]+ ++Cl+Cl常用的如苏木素、卡红、常用的如苏木素、卡红、次甲基蓝、甲苯胺蓝、硫堇和美蓝等碱性染料常用以染细胞核次甲基蓝、甲苯胺蓝、硫堇和美蓝等碱性染料常用以染细胞核等酸性成份等酸性成份五、常用染色术语 n n1 1．普通染色．普通染色n n在组织制片技术中，常规制片最广泛应用的是苏木精和伊红染色，在组织制片技术中，常规制片最广泛应用的是苏木精和伊红染色，又称为常规染色（又称为常规染色（HEHE染色）n n2 2．特殊染色．特殊染色n n特殊染色就是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分，是常特殊染色就是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分，是常规染色的必要补充，也是染色技术中不可缺少的部分它在病理规染色的必要补充，也是染色技术中不可缺少的部分它在病理诊断中起到辅助作用。

诊断中起到辅助作用n n3 3．单一染色．单一染色n n选用一种染料进行的染色，如用铁苏木素染睾丸生精细胞等选用一种染料进行的染色，如用铁苏木素染睾丸生精细胞等n n4 4．复染色．复染色n n用两种不同性质的染料进行染色的方法，如用苏木素和伊红分别用两种不同性质的染料进行染色的方法，如用苏木素和伊红分别使细胞核及胞质染成两种颜色使细胞核及胞质染成两种颜色n n5 5．多种染色．多种染色n n选用两种以上的染料的染色，如选用两种以上的染料的染色，如MossonMosson三色染色法三色染色法六、染色前后处理 n n（一）染色前处理n n1．脱蜡至水 n n二甲苯二甲苯Ⅰ10minⅠ10min，，37℃37℃n n二甲苯二甲苯Ⅱ10minⅡ10min，，37℃37℃n n无水乙醇无水乙醇 2min2min n n无水乙醇无水乙醇 2min2min n n9595％乙醇％乙醇 2min2min n n8585％乙醇％乙醇 2min 2min n n7575％乙醇％乙醇 2min2min n n流水冲洗流水冲洗六、染色前后处理n n2．除去汞盐沉淀物 n n对于用升汞固定或含有升汞混合固定液的切片，切片对于用升汞固定或含有升汞混合固定液的切片，切片脱腊后需脱汞（浸入脱腊后需脱汞（浸入5%5%碘酒精碘酒精1010minmin），脱碘（），脱碘（5%5%硫代硫代硫酸钠）硫酸钠）→→流水洗流水洗→→染色。

染色 六、染色前后处理n n3．脱甲醛色素 n n（（1 1）浓氨水）浓氨水1ml1ml，，75%75%乙醇乙醇200ml200ml切片脱蜡后置溶液切片脱蜡后置溶液中中30min30min或较久或较久→→流水洗流水洗→→染色n n（（2 2））1%1%氢氧化钾氢氧化钾1ml1ml，，80%80%乙醇乙醇100ml100ml切片脱蜡后置切片脱蜡后置溶液中溶液中10min→10min→流水洗流水洗5min→80%5min→80%乙醇乙醇5min→5min→蒸馏水洗蒸馏水洗→→染色 六、染色前后处理n n4．除铬沉着物 n n组织用含铬的组织用含铬的ZenkerZenker氏液等固定的，有铬沉淀物除铬氏液等固定的，有铬沉淀物除铬沉着物可应用盐酸乙醇溶液，或用沉着物可应用盐酸乙醇溶液，或用5%5%碘酒和碘酒和5%5%硫代硫硫代硫酸钠水溶液处理酸钠水溶液处理 六、染色前后处理n n（二）染色后的处理 n n1 1．脱水．脱水 95%95%乙醇乙醇Ⅰ Ⅰ、、Ⅱ Ⅱ各各5min→100%5min→100%乙醇乙醇Ⅰ Ⅰ、、Ⅱ Ⅱ各各5min5minn n2 2．透明．透明 二甲苯二甲苯Ⅰ Ⅰ、、Ⅱ Ⅱ各各5min5min透明。

透明n n3 3．封固．封固 通常用中性树胶或加拿大树胶加盖玻片封固通常用中性树胶或加拿大树胶加盖玻片封固 七、染色的注意事项 n n1 1．切片脱蜡应彻底．切片脱蜡应彻底．切片脱蜡应彻底．切片脱蜡应彻底 n n2 2．常规染色、特殊染色等，组织要进行固定处理，做酶．常规染色、特殊染色等，组织要进行固定处理，做酶．常规染色、特殊染色等，组织要进行固定处理，做酶．常规染色、特殊染色等，组织要进行固定处理，做酶反应的组织固定更应严格凡用含升汞固定液固定的组织，反应的组织固定更应严格凡用含升汞固定液固定的组织，反应的组织固定更应严格凡用含升汞固定液固定的组织，反应的组织固定更应严格凡用含升汞固定液固定的组织，切片脱蜡后，应经脱汞处理，同时要慎防切片脱落切片脱蜡后，应经脱汞处理，同时要慎防切片脱落切片脱蜡后，应经脱汞处理，同时要慎防切片脱落切片脱蜡后，应经脱汞处理，同时要慎防切片脱落n n3 3．各种染料试剂一般选用化学纯各种染料启用新品时．各种染料试剂一般选用化学纯各种染料启用新品时．各种染料试剂一般选用化学纯各种染料启用新品时．各种染料试剂一般选用化学纯各种染料启用新品时应先试染。

配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内，瓶签应先试染配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内，瓶签应先试染配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内，瓶签应先试染配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内，瓶签应写明名称、含量、配制年月日，顺序保存于避光橱中，应写明名称、含量、配制年月日，顺序保存于避光橱中，应写明名称、含量、配制年月日，顺序保存于避光橱中，应写明名称、含量、配制年月日，顺序保存于避光橱中，必要者放冰箱内凡须临用时配制者，配量应适当必要者放冰箱内凡须临用时配制者，配量应适当必要者放冰箱内凡须临用时配制者，配量应适当必要者放冰箱内凡须临用时配制者，配量应适当 n n4 4．染色各步骤所需的时间，常受温度、切片厚度等影响，．染色各步骤所需的时间，常受温度、切片厚度等影响，．染色各步骤所需的时间，常受温度、切片厚度等影响，．染色各步骤所需的时间，常受温度、切片厚度等影响，可根据镜下观察所见酌情予以调整可根据镜下观察所见酌情予以调整可根据镜下观察所见酌情予以调整可根据镜下观察所见酌情予以调整n n5 5．染色过程中，勿使切片干燥染色完毕后用显微镜检．染色过程中，勿使切片干燥染色完毕后用显微镜检．染色过程中，勿使切片干燥。

染色完毕后用显微镜检．染色过程中，勿使切片干燥染色完毕后用显微镜检查染色结果是否符合要求，并核对标本种类、号码、数量查染色结果是否符合要求，并核对标本种类、号码、数量查染色结果是否符合要求，并核对标本种类、号码、数量查染色结果是否符合要求，并核对标本种类、号码、数量是否无误是否无误是否无误是否无误常规染色第二节一、常规染色的概念 n n在组织制片技术中，常规制片最广泛应用的是苏木精和伊红染色，称为常规染色（HE染色），又称普通染色 二、苏木素-伊红染色液的配制 n n（一）苏木素染液的配制方法常用的有：（一）苏木素染液的配制方法常用的有：（一）苏木素染液的配制方法常用的有：（一）苏木素染液的配制方法常用的有： n n1. 1.哈瑞氏（哈瑞氏（哈瑞氏（哈瑞氏（harrisharris）苏木素染液）苏木素染液）苏木素染液）苏木素染液最常应用染色时间为最常应用染色时间为最常应用染色时间为最常应用染色时间为5min5min∽ ∽ ∽ ∽10min10min配制配制配制配制 ①①①① 蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水 1000ml 1000ml ②②②② 苏木素苏木素苏木素苏木素 3g3g∽ ∽ ∽ ∽5g5g ③③③③ 碘酸钠碘酸钠碘酸钠碘酸钠 1g1g ④④④④ 钾明矾钾明矾钾明矾钾明矾 50g50g∽ ∽ ∽ ∽80g80g ⑤⑤⑤⑤ 水醋酸水醋酸水醋酸水醋酸 20ml20ml其优点是：配后即可应用染色力较强。

其优点是：配后即可应用染色力较强其优点是：配后即可应用染色力较强其优点是：配后即可应用染色力较强其缺点是：极易产生金属膜沉淀其缺点是：极易产生金属膜沉淀其缺点是：极易产生金属膜沉淀其缺点是：极易产生金属膜沉淀二、苏木素-伊红染色液的配制n n2. 2.埃利希（埃利希（埃利希（埃利希（EhrlichEhrlich），苏木素染液），苏木素染液），苏木素染液），苏木素染液 配制配制配制配制 ①①①①无水乙醇无水乙醇无水乙醇无水乙醇 100ml100ml ②②②②甘油甘油甘油甘油 100ml100ml ③③③③苏木精苏木精苏木精苏木精 2g2g ④④④④钾明矾钾明矾钾明矾钾明矾 2g2g∽∽∽∽3g3g ⑤⑤⑤⑤醋酸醋酸醋酸醋酸 5ml5ml∽∽∽∽10ml10ml置于阳光下自然氧化置于阳光下自然氧化置于阳光下自然氧化置于阳光下自然氧化3 3个月左右成熟。

个月左右成熟个月左右成熟个月左右成熟其优点是：其优点是：其优点是：其优点是： 染色结果甚佳，贮存愈久染色愈强，而且不需染色结果甚佳，贮存愈久染色愈强，而且不需染色结果甚佳，贮存愈久染色愈强，而且不需染色结果甚佳，贮存愈久染色愈强，而且不需分色二、苏木素-伊红染色液的配制n n（二）分化液 1 1％盐酸酒精，是最常用的分化液％盐酸酒精，是最常用的分化液％盐酸酒精，是最常用的分化液％盐酸酒精，是最常用的分化液 配方：配方：配方：配方：7070％酒精％酒精％酒精％酒精 99ml99ml 浓盐酸浓盐酸浓盐酸浓盐酸 1ml1ml二、苏木素-伊红染色液的配制n n（三）还原液 1 1．氢氧化氨液：．氢氧化氨液：．氢氧化氨液：．氢氧化氨液： 配方：浓氨水配方：浓氨水配方：浓氨水配方：浓氨水 1ml 1ml 蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水 99ml99ml 2 2．饱和碳酸锂液：．饱和碳酸锂液：．饱和碳酸锂液：．饱和碳酸锂液： 配制：碳酸锂配制：碳酸锂配制：碳酸锂配制：碳酸锂 1g1g 蒸馏水（冷）蒸馏水（冷）蒸馏水（冷）蒸馏水（冷） 78ml78ml 3 3．流水冲洗还原。

．流水冲洗还原．流水冲洗还原．流水冲洗还原二、苏木素-伊红染色液的配制n n（四）伊红染液 配方：伊红配方：伊红配方：伊红配方：伊红Y Y（水溶）（水溶）（水溶）（水溶） 0.5g0.5g∽ ∽ ∽ ∽lglg 蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水 99ml99ml 若取用伊红若取用伊红若取用伊红若取用伊红Y Y（醇溶性）应溶于（醇溶性）应溶于（醇溶性）应溶于（醇溶性）应溶于99ml 7599ml 75％或％或％或％或9595％的％的％的％的乙醇中 若在伊红液中加入若在伊红液中加入若在伊红液中加入若在伊红液中加入0.50.5毫升冰醋酸，可加速其染色过毫升冰醋酸，可加速其染色过毫升冰醋酸，可加速其染色过毫升冰醋酸，可加速其染色过程，并使胞质的色泽更为艳丽程，并使胞质的色泽更为艳丽程，并使胞质的色泽更为艳丽程，并使胞质的色泽更为艳丽三、染色方法苏木精苏木精伊伊 红红嗜碱性结构：嗜碱性结构：细胞核粗面内质网游离核糖体等嗜酸性结构：嗜酸性结构：细胞质基质溶酶体、线粒体等细胞器胶原纤维等常常规规脱脱蜡蜡苏苏木木素素染染色色（（ 5-15min ）），，水水洗洗盐盐酸酸乙乙醇醇溶溶液液分分化化（（ 30s ）），，水水洗洗伊伊红红染染色色（（ 1-3min ）），，水水洗洗氨氨水水反反蓝蓝（（ 30s ）），，水水洗洗90%乙乙醇醇（（ 5min ））80%乙乙醇醇（（ 30s ））100%乙乙醇醇（（ 2次次×10min ））二二甲甲苯苯（（ 3次次×5min ））封封片片染色脱水透明封片脱蜡 染色的时间，应根据室温，及组织的具体情况来确定，染色的时间，应根据室温，及组织的具体情况来确定，做之前做预实验。

做之前做预实验 在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶中性树胶封片封片，以便长期保存以便长期保存 * 切片切片: : 固定固定→→梯度酒精上行梯度酒精上行→→二甲苯二甲苯→→石蜡 * 染色染色: : 石蜡石蜡→→二甲苯二甲苯→→梯度酒精下行梯度酒精下行→→水 * 保存保存: : 水水→→梯度酒精梯度酒精→→二甲苯二甲苯→→中性树胶中性树胶* 苏木素是苏木素是碱性碱性染料，染料，蓝紫色蓝紫色，可以使细胞核等着色被苏木，可以使细胞核等着色被苏木素着色的结构本身为素着色的结构本身为酸性酸性，具有，具有嗜碱性嗜碱性* 伊红是伊红是酸性染料酸性染料，，粉红色粉红色可以将大多数细胞的细胞质染成可以将大多数细胞的细胞质染成红色被伊红着色的结构本身为被伊红着色的结构本身为碱性碱性，具有，具有嗜酸性嗜酸性 不易被苏木素和伊红着色的结构具有不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性嗜中性石蜡切片石蜡切片&HE染色染色四、染色注意事项四、染色注意事项n n1．组织切片的脱蜡应彻底n n2．苏木素染液使用一段时间后应及时更换新液n n3．染色时间的长短需依据染色剂对组织的染色作用、室温条件、切片厚薄、固定液类别和染液的新旧而进行相应调节。

n n4．分化十分重要n n5．还原液不宜过浓 n n6．伊红宜淡染，复染过深胞核会不清晰，影响镜检n n7．脱水、透明宜彻底 n n8．要将组织四周的污染物去掉n n9．封固剂要适量 n n10．染好的切片标签贴牢，编号清楚，避光保存9、静夜四无邻，荒居旧业贫2024/9/162024/9/16Monday, September 16, 202410、雨中黄叶树，灯下白头人2024/9/162024/9/162024/9/169/16/2024 5:53:46 AM11、以我独沈久，愧君相见频2024/9/162024/9/162024/9/16Sep-2416-Sep-2412、故人江海别，几度隔山川2024/9/162024/9/162024/9/16Monday, September 16, 202413、乍见翻疑梦，相悲各问年2024/9/162024/9/162024/9/162024/9/169/16/202414、他乡生白发，旧国见青山16 九月 20242024/9/162024/9/162024/9/1615、比不了得就不比，得不到的就不要九月 242024/9/162024/9/162024/9/169/16/202416、行动出成果，工作出财富。

2024/9/162024/9/1616 September 202417、做前，能够环视四周；做时，你只能或者最好沿着以脚为起点的射线向前2024/9/162024/9/162024/9/162024/9/169、没有失败，只有暂时停止成功！2024/9/162024/9/16Monday, September 16, 202410、很多事情努力了未必有结果，但是不努力却什么改变也没有2024/9/162024/9/162024/9/169/16/2024 5:53:46 AM11、成功就是日复一日那一点点小小努力的积累2024/9/162024/9/162024/9/16Sep-2416-Sep-2412、世间成事，不求其绝对圆满，留一份不足，可得无限完美2024/9/162024/9/162024/9/16Monday, September 16, 202413、不知香积寺，数里入云峰2024/9/162024/9/162024/9/162024/9/169/16/202414、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏16 九月 20242024/9/162024/9/162024/9/1615、楚塞三湘接，荆门九派通。

九月 242024/9/162024/9/162024/9/169/16/202416、少年十五二十时，步行夺得胡马骑2024/9/162024/9/1616 September 202417、空山新雨后，天气晚来秋2024/9/162024/9/162024/9/162024/9/169、杨柳散和风，青山澹吾虑2024/9/162024/9/16Monday, September 16, 202410、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话2024/9/162024/9/162024/9/169/16/2024 5:53:46 AM11、越是没有本领的就越加自命不凡2024/9/162024/9/162024/9/16Sep-2416-Sep-2412、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿2024/9/162024/9/162024/9/16Monday, September 16, 202413、知人者智，自知者明胜人者有力，自胜者强2024/9/162024/9/162024/9/162024/9/169/16/202414、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏16 九月 20242024/9/162024/9/162024/9/1615、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。

九月 242024/9/162024/9/162024/9/169/16/202416、业余生活要有意义，不要越轨2024/9/162024/9/1616 September 202417、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息2024/9/162024/9/162024/9/162024/9/16MOMODA POWERPOINTLorem ipsum dolor sit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blanditut cursus. 感感谢谢您您的的下下载载观观看看专家告诉。