食品中该酶制剂检验方法的情况说明.doc

二、通用名称、功能分类，用量和使用范围1本文叙述的葡糖淀粉酶 （glucoamylase，简称 GA）制剂是通过李氏木霉发酵生产的，该李氏木霉携带有来自李氏木霉的葡糖淀粉酶gla1 基因编码通用名称： 葡糖淀粉酶 glucoamylase功能分类： 加工助剂 食品工业用酶制剂使用范围： 谷物加工、酒精生产等用量： 按生产需要适量使用来源（生产菌）：李氏木霉 Trichoderma reesei供体： 李氏木霉 Trichoderma reesei系统名称： 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶（ 4-α-D-glucanglucohydrolase）其他使用名称： 葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶 glucan 1,4-α-glucosidase；淀粉葡糖苷酶 amyloglucosidaseCAS 号: 9032-08-0EC 号: 商品名称 : TRG GA Conc. Formulated2三、证明技术上确有必要和使用效果的资料或者文件3该商业化的葡糖淀粉酶制剂（ TrGA ）由经基因工程改造的李氏木霉 (Trichoderma reesei) 通过可控发酵生产李氏木霉产蛋白能力较高，适合作为宿主菌开发并进行 DNA 重组表达。

杰能科公司对宿主李氏木霉的安全性进行了全面的毒理学试验， 证明其不致病、不产毒经过多年的研究， 该李氏木霉生产菌的产酶效率更高， 生产过程更加稳定、可控性强，由于其不产生转葡糖苷酶，提取过程也更简单，从而提高了产品性能，且节约了宝贵的资源，包括原料、能源及水该葡糖淀粉酶的作用与其它葡糖淀粉酶相同， 使用葡糖淀粉酶的目的是将可溶性糊精转化为葡萄糖 在其应用中， 葡糖淀粉酶作为加工助剂使用，在最终产品中并不存在葡糖淀粉酶可从淀粉的非还原性末端开始， 依次水解 1,4-葡萄糖苷键，顺次切下每个 α-D-葡萄糖单位，生成 α-D-葡萄糖水解反应的结果是可溶性糊精被转化为葡萄糖相比传统葡糖淀粉酶（多产自黑曲霉） ，该葡糖淀粉酶 TrGA 的主要性能优点如下：糖化速率提高，缩短糖化时间有更宽泛的 pH 适用范围有更宽泛的温度适用范围酶活力提高在酒精发酵上具体表现为：4发酵速率提高，缩短发酵时间；酒精得率提高；残余 “寡糖 ”含量低；预糖化工艺的效果提高；DDGS （Distillers Dried Grain with Soluble 干全酒糟）中的残淀粉含量低TrGA 受 pH 值的影响及与传统葡糖淀粉酶在不同 pH 下的活力对比：由图 3-1 可见， TrGA 的 pH 适用范围更广，其在高 pH 值下的活力表现可以用于全糖化或预糖化时而不用调节 pH。

反应条件： 60℃， 3 小时， 32%麦芽糊精， 0.5 公斤 TrGA /吨干物质1009080)%(ytivitcaevitaleR706050403020TrGAA.nigerGC1471003.003.504.004.505.005.506.006.50pH图 3-1 TrGA 受 pH 值的影响及与传统葡糖淀粉酶在不同 pH 下的活力对比TrGA 受温度的影响及与传统葡糖淀粉酶在不同温度下的活力对比5由图 3-2 可见， TrGA 的耐热性能优于传统葡糖淀粉酶在酒精生产过程中，糖化和预糖化时，由于糖化温度的原因，在 60℃左右，产生的葡萄糖很容易造成微生物的生长如使用 TrGA 产品，糖化可以在较高温度下进行，如 68℃以上，染菌概率即可大大降低反应条件： pH 5.0，3 小时， 32%麦芽糊精， 0.5 公斤 TrGA/ 吨干物质10090)80%(70yti60vitc50aev40ital30eR2010030405060708090Temperature (℃)GC147TrGAA.niger图 3-2 TrGA 受温度的影响及与传统葡糖淀粉酶在不同温度下的活力对比TrGA 的使用量杰能科产品 DISTILLASE ASP （由 TrGA 与普鲁兰酶混合而成）的常用添加量为 0.5-0.75 g/kg 淀粉干基。

实际的添加量需要根据工厂糖化和发酵过程的实际情况， 如温度、反应时间和 pH 以及所要达到的结果来决定应用实例6表 3-1 为 TrGA 与传统葡糖淀粉酶在特定条件下的糖化结果对比，在该过程中，液化后不调节 pH，温度只降至 70℃，很快进入糖化过程表 3-1 TrGA 与传统葡糖淀粉酶在 70℃糖化条件下的反应结果对比酶制剂时间DP(%)温度（ kg/t DS）(h)（℃） pH传统DP1DP2DP3DP4+DE(%)TrGAGA液化液3.0986.21610.75379.93318.334705.50.6364.32816.0831.21918.37077.444468.86213.3831.24516.51080.088705.50.6364.74615.7551.24918.25077.662469.96113.1961.25115.59280.915705.50.6345.50222.5696.57425.35465.753445.60922.6326.29325.46665.805705.50.6345.50222.5696.57425.35465.753445.60922.6326.29325.46665.805注： DP1：葡萄糖； DP2：麦芽糖； DP3：麦芽三糖； DP4＋：四糖以上从表 3-1 中可以看出，在 70℃时， TrGA 比传统葡糖淀粉酶有效的多，3 h 时 DE 值达到 77，4 h 时 DE 超过 80，而传统葡糖淀粉酶从 3 h 到 4 h 之间已经没有什么变化，只达到 DE65，说明其到 3 h 已基本失活。

另外如果比较 HPLC 糖谱，可以看出， TrGA 产生的葡萄糖DP1 大大高于传统葡糖淀粉酶， 而同时传统葡糖淀粉酶催化的反应体系中出现了相对较高的 DP2（麦芽糖）、DP3（麦芽三糖）及 DP4+（四糖以上），这说明传统的葡糖淀粉酶作为葡糖淀粉酶的构形已发生变化，不适合在 70℃高温使用除了在高温下糖化可以减少染菌的机会外，液化以后不需调整7pH 也为实际操作节省了时间，使进入发酵罐前的时间缩短从而节约了时间及能耗等，提高单位产出TrGA 的灭活：在发酵法生产酒精工艺中， 糖化与发酵之间有高温灭菌过程， 在此过程中 TrGA 因高温而失活，在最终产品中没有该酶的存在8四、质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验方法或者相关情况说明94.1 质量规格要求和检验方法名称：葡糖淀粉酶 glucoamylase来源：李氏木霉 Trichoderma reesei供体：李氏木霉 Trichoderma reesei葡糖淀粉酶为食品工业用酶制剂，其质量规格要求和检验方法符合 GB 25594-2010《食品安全国家标准 食品工业用酶制剂》及 GB 827。