微生物标本采集手册.docx

微生物标本采集手册来源：感染管理科  2011-3-24 9:47:16  被阅读2829次 编辑：感染管理科石慧  微生物标本采集手册目录 第一章 血液及骨髓标本的微生物检验.................1第二章 痰标本的微生物检验.........................5第三章 上呼吸道标本的微生物检验...................8第四章 尿液标本的微生物检验......................10第五章 粪便标本的微生物检验......................12第六章 化脓和创伤标本的微生物检验................14第七章 脑脊液标本的微生物检验....................16第八章 胆汁标本的微生物检验......................18第九章 胸水标本的微生物检验......................20第十章 腹水标本的微生物检验......................22第十一章 心包液标本的微生物检验..................24第十二章 关节液标本的微生物检验..................26第十三章 鞘膜积液标本的微生物检验................28第十四章 生殖道标本的微生物检验..................30第十五章 外眼部标本的微生物检验..................33第十六章 感染性疾病相关检测......................35第一节 降钙素原检查.............................35第二节 内毒素检查...............................37第三节1-3-β-D-葡聚糖检查........................39 血液、骨髓液的细菌培养二、标本采集【标本采集前的注意事项】    应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。

标本送检指征】病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养1 发热（≥38℃）或低温（≤36℃）2 寒战3 白细胞增多（＞10×109/L，特别有“核左移”时）4 粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×109/L）5 血小板减少6 皮肤、粘膜出血7 昏迷8 多器官衰竭9 血压降低10 呼吸加快几种特殊情况：1 可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养2老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养标本采集的容器】美国BD公司血培养仪配套血培养瓶(我院)，各种血培养仪配套血培养瓶或手工血培养瓶样本条码粘贴要求】同时打印两份清晰的条形码，分别粘贴在两个血培养瓶上，应沿血培养瓶的长轴粘贴，病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码上涂写，保持条码的完整和清晰标本的采集方法】防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。

1 皮肤消毒程序：严格按以下三步法进行：(1) 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上2) 用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2％碘酊作用30s或聚维酮碘作用60s，从穿刺点向外以1.5～2cm直径画圈进行消毒3) 70％酒精脱碘对碘过敏的病人只能用70%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血2 培养瓶消毒程序(1) 用70％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子2) 酒精作用60s3) 在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液3 培养瓶接种程序抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中标本采集注意事项】1 血培养采集的时间和频率(1) 采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶因为研究已证实，2～3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症2) 入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。

3) 对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集因为发热时血液中可能没有细菌4) 可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2～3份血培养5) 不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2～3份血标本，24～36h后估计体温升高之前，再采集2份以上6) 可疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，选择其它种类的培养瓶，如高渗培养瓶，中和抗生素培养瓶，结核菌培养瓶等，以获得罕见的或苛氧的微生物7) 可疑为细菌性心内膜炎，在1～2h内多部位采集3份血标本，如果24h阴性，再采取3份以上的血标本2 采血量成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为5～10ml，血液和肉汤比为1：5～10（体积：体积）儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～5ml用于血培养血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3～5％人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌的生长骨髓采血量一般为1～2ml标本的送检地点】检验科微生物室，非正常上班时间送检验科急诊化验室。

标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染标本的保存】含血样的培养瓶应立即送往实验室；如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降在运往实验室的途中如果天气寒冷，应采取一定的保温措施第二章 痰标本的微生物检验一、检查项目痰液的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片二、标本采集【标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集标本送检指征】1 咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰  2 咯血：肺结核病人常痰中带血  3 呼吸困难4 发热5 胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛肺部感染的患者有25～50％可能发生菌血症，应同时作血培养标本采集容器】一次性无菌留痰盒样本条码粘贴要求】打印清晰的条码尽量沿着容器的长轴粘贴，病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码上涂写，保持条码的完整和清晰   【标本采集方法】1 自然咳痰法：咳痰前，先用清水或漱口液反复漱口（为减少口腔正常菌群污染标本），然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内。

对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10％NaCL水溶液，使痰液易于排出对咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽2 气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本3 胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养4 管穿刺法：主要用于厌氧菌培养小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上标本采集注意事项】1 采集时间：（1）以晨痰为好多数病人清晨痰较多，易于采集且清晨痰含有的病理成分较多会增加培养的阳性率2）最好在应用抗菌药物之前采集标本2 送检采集后应立即送检，以防止某些细菌在外环境中死亡做结核分支杆菌和真菌培养的标本如不能及时送检，可放4℃保存，以免杂菌生长 【标本的送检地点】检验科微生物室3号楼4楼*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染     第三章上呼吸道标本的微生物检验一、检验项目上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片二、标本采集【标本采集前的注意事项】    应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。

标本送检指征】1病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养2细菌性咽－扁桃体炎：明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39℃以上3 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养标本采集容器】咽拭子或鼻咽拭子样本条码粘贴要求】打印清晰的条码尽量沿着容器的长轴粘贴，病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码上涂写，保持条码的完整和清晰标本的采集方法】嘱患者用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，拭子要避免接触口腔和舌粘膜标本采集注意事项】1 采集时间：应于抗生素应用之前时间上可无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，也应晨起后采集为佳2送检：应立即送检标本的送检地点】检验科微生物室（3号楼4楼）标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染     第四章尿液标本的微生物检验一、检查项目尿液的细菌培养，真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片二、标本采集【标本采集前的注意事项】    应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。

标本送检指征】1 有典型的尿路感染症状；2 肉眼脓尿或血尿；3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性；4 不明原因的发热，无其他局部症状；5 留置导尿管的病人出现发热；6 膀胱排空功能受损；7 泌尿系统疾病手术前标本采集容器】无菌试管或无菌尿液标本留取容器样本条码粘贴要求】打印清晰的条码纵向粘贴在容器上，下端距管底应至少留有2cm病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码帖上涂写，尿量等信息写在条码贴的空白处，保持条码的完整和清晰标本的采集方法】1 清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，插入性接取中段尿约10ml于无菌容器中，立即送检，于一小时内接种该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取2 耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。

3 直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。