食品中山梨酸苯甲酸的分析检测方法.doc

农业仪器权威门户 　　本标准适用于酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸苯甲酸含量的测定　　最低检出浓度：气相色谱法最低检出量为1μg，用于色谱分析的样品为1g时，最低检出浓度为1mg/kg　　第一篇气相色谱法　　2 原理　　样品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量　　3 试剂　　3.1 乙醚：不含过氧化物　　3.2 石油醚：沸程30～60℃　　3.3 盐酸　　3.4 无水硫酸钠　　3.5 盐酸1＋1：取100mL盐酸，加水稀释至200mL　　3.6 氯化钠酸性溶液40g/L：于氯化钠溶液40g/L中加少量盐酸1＋1酸化　　3.7 山梨酸、苯甲酸标准溶液：准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100mL容量瓶中，用石油醚—乙醚3＋1混合溶剂溶解后并稀释至刻度此溶液每毫升相当于2.0mg山梨酸或苯甲酸　　3.8 山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液，以石油醚－乙醚3＋1混合溶剂稀释至每毫升相当于50，100，150，200，250mg山梨酸或苯甲酸　　4 仪器成都易商（esun-0261）气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。

　　5 分析步骤　　5.1 样品提取　　称取2.50g事先混合均匀的样品，置于25mL带塞量筒中，加0.5mL盐酸1＋1酸化，用15，10mL乙醚提取两次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量筒中合并乙醚提取液用3mL氯化钠酸性溶液40g/L洗涤两次，静止15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中加乙醚至刻度，混匀准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中，置40℃水浴上挥干，加入2mL石油醚－乙醚3＋1混合溶剂溶解残渣，备用　　5.2 色谱参考条件　　5.2.1 色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2m，内装涂以5%m/mDEGS＋1%m/mH3PO4固定液的60～80目Chromosorb W AW　　5.2.2 气流速度：载气为氮气，50mL/min氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件　　5.2.3 温度：进样口230℃；检测器230℃；柱温170℃　　5.3 测定　　进样2μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰高，以浓度为横坐标，相应的峰高值为纵坐标，绘制标准曲线　　同时进样2μL样品溶液。

测得峰高与标准曲线比较定量　　5.4 计算　　式中：X1——样品中山梨酸或苯甲酸的含量，g/kg；　　m1——测定用样品液中山梨酸或苯甲酸的质量，μg；　　V1——加入石油醚－乙醚3＋1混合溶剂的体积，mL；　　V2——测定时进样的体积，μL；　　m2——样品的质量，g；　　5——测定时吸取乙醚提取液的体积，mL；　　25——样品乙醚提取液的总体积，mL　　由测得苯甲酸的量乘以1.18，即为样品中苯甲酸钠的含量　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数　　5.5 允许差　　相对相差≤10%　　5.6 其他　　在色谱图中山梨酸保留时间为2分53秒；苯甲酸保留时间为6分8秒　　(图略)　　第二篇高效液相色谱法　　6 原理　　样品加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量　　7 试剂　　方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液　　7.1 甲醇：经滤膜0.5μm过滤　　7.2 稀氨水1＋1：氨水加水等体积混合　　7.3 乙酸铵溶液0.02mol/L：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经滤膜0.45μm过滤。

　　7.4 碳酸氢钠溶液20g/L：称取2g碳酸氢钠优级纯，加水至100mL，振摇溶解　　7.5 苯甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液20g/L5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量为1mg/mL，作为储备溶液　　7.6 山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山梨酸，加碳酸氢钠溶液20g/L5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸含量为1mg/mL，作为储备溶液　　7.7 苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液：取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度此溶液含苯甲酸、山梨酸各0.1mg/mL经滤膜0.45μm过滤同时测定糖精钠时可加GB/T 5009.28中3.4糖精钠标准储备溶液　　8 仪器　　高效液相色谱仪带紫外检测器　　9 分析步骤　　9.1 样品处理　　9.1.1 汽水：称取5.00～10.0g样品，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水1＋1调pH约7加水定容至10～20mL，经滤膜0.45μm过滤　　9.1.2 果汁类：称取5.00～10.0g样品，用氨水1＋1调pH约7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经滤膜0.45μm过滤。

　　9.1.3 配制酒类：称取10.0g样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水1＋1调pH约7，加水定容至适当体积，经滤膜0.45μm过滤　　9.2 高效液相色谱参考条件　　9.2.1 色谱柱：YWG－C184.6mm×250mm10μm不锈钢柱　　9.2.2 流动相：甲醇：乙酸铵溶液0.02m0l/L5：95　　9.2.3 流速：1mL/min　　9.2.4 进样量：10μL　　9.2.5 检测器：紫外检测器，波长230μm，灵敏度0.2AUFS　　根据保留时间定性，外标峰面积法定量　　9.3 计算　　式中：X2——样品中苯甲酸或山梨酸的含量，g/kg；　　m3——进样体积中苯甲酸或山梨酸的质量，mg；　　V4——进样体积，mL；　　V3——样品稀释液总体积，mL；　　m4——样品质量，g　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数　　9.4 允许差：相对相差≤10%　　9.5 其他　　同GB/T 5009.28的5.6　　注：本方法可同时测定糖精钠　　相关食品检测：食品中山梨酸苯甲酸的测定、食品中合成着色剂的测定、食品中糖精钠的测定、食品中环乙基氨基磺酸钠的测定更多农业仪器信息来自中国农业仪器网 联系：0571-81953317 。