肝癌小鼠造模实验方法.docx

肝癌小鼠造模实验方法(1) 肿瘤细胞悬液的制备小鼠肿瘤细胞用小鼠腹腔培养，然后抽取腹水，是取得大量肿瘤细胞最便捷的方法具体操作如下：将肿瘤细胞株复苏后，接种于babl/c(昆 明小鼠)腹腔，培养8-10天后，接种小鼠的腹腔内长出含肿瘤细胞的腹水，选择腹水饱满的 小鼠，在超净台内于无菌条件下消毒小鼠腹部，用注射器抽取淡腹水为瘤源，放入无菌容器 内，加入无菌生理盐水稀释瘤液，小心摇匀，并置冰水上保存，若用多只动物做瘤源时，则 应混合腹水腹水应为淡黄色浓稠液体，若为深黄色或红色则应弃去不用)(2) 肿瘤细胞计数取少量腹水，放置于干试管内，用生理盐水稀释100倍，用 枪头吸取少许腹水，滴于载玻片上，推片，镜下观察细胞形态：细胞为圆形，胞浆均匀，透 明，折光性好，分布均匀并于镜下进行细胞分类计数，其中肿瘤细胞数应295%3) 肿瘤细胞接种腹水用无菌生理盐水调整细胞浓度为1*107mL,在小鼠右侧腋下(右侧腋窝 皮下？ |)常规接种H22瘤液0. 2mL/只(含2*106个瘤细胞)(5*106)|?全程严格无菌操作， 40min内完成4) 分组与给药昆明小鼠用上法造模，造模后再将腹水瘤小鼠按体重分层，随机分为阳性对照组(CTX)、青蒿素各剂量组(150mg / kg、300mg / kg)、青蒿琥酯P0组(60mg/ kg)、青蒿琥酯ip组(60mg / kg)、青蒿醇提物和青蒿水提物各剂量组(1000mg/kg、4000mg / kg)和模型对照组(Model),每组各10只小鼠。

造模24h后，阳性对照 组(CTX)20mg / kg和青蒿琥酯ip组(60mg / kg)，腹腔注射0. 2mL /只，每天1次，连续10d： 其它组灌胃给药，灌服溶液0. 4mL/只，每天1次，连续10d模型对照组仅予等量CMC-Na 溶液，连续10d平均每只小鼠每天给等量鼠料，每周换垫料2次，每日换新鲜水1次记录 各小鼠死亡的时间其他问题：检测药物对肿瘤的抑制作用，给药时间怎么确定？1、 造模后第二天给药2、 肿瘤长出一定体积后在给药。