芳氧丙醇胺类药物分析.ppt

芳氧丙醇胺类药物的分析芳氧丙醇胺类药物的分析                                                                          04药剂     朱俊                                    3041909088                                       芳氧丙醇胺类药物是指分子结构中具有芳氧丙醇胺基本骨架的一类药物，主要是β受体阻断剂，如： 普萘洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、氧烯洛尔、卡替洛尔等药物的结构通式药物的结构通式芳氧丙醇胺类β受体阻断剂名称RR’  普萘洛尔   噻吗洛尔    纳多洛尔   美托洛尔  阿替洛尔  比索洛尔    醋丁洛尔  艾司洛尔  倍他洛尔                                         盐酸卡替洛尔的鉴别反应：去本品约，加水5ml使溶解，加硫氰酸铬铵试液5滴，即生成淡红色沉淀氧烯洛尔的鉴别反应：取本品约，加乙醇2ml溶解后，滴加高锰酸钾溶液1ml，振摇数分钟，高锰酸钾颜色消退，并产生棕色沉淀。

鉴别试验鉴别试验（一）化学鉴别反应（一）化学鉴别反应盐酸普萘洛尔甲醇溶液（20μg/ml），在290nm与319nm的波长处有最大吸收阿替洛尔乙醇溶液（10 μg/ml ），在227nm，276nm和283nm的波长处有最大吸收盐酸卡替洛尔水溶液（8 μg/ml ），在215nm和252nm的波长处有最大吸收氧烯洛尔乙醇溶液（40 μg/ml ），在275nm的波长处有最大吸收二）紫外吸收峰特征二）紫外吸收峰特征杂质检查杂质检查盐酸卡替洛尔本品中相关物质检查采用薄层色谱法的高低浓度对比法进行一）有关物质检查（一）有关物质检查取本品20mg，加乙醇和10%氢氧化钠溶液各2ml，振摇使溶解，加重氮苯磺酸试液1ml，摇匀放置3分钟；如显色，与α-萘酚的乙醇溶液（20 μg/ml ）同法制得的对照液相比，不得更深（0.03%）二）盐酸普萘洛尔（二）盐酸普萘洛尔 游离萘酚的检查游离萘酚的检查含量测定含量测定（（一）非水溶液滴定法一）非水溶液滴定法——盐酸卡替洛尔原料药含量测定方法取本品约，精密称定，加冰醋酸30ml，在水浴上加热溶解，放冷，加醋酐70ml，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/l)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml高氯酸滴定液（）相当于的盐酸卡替洛尔  取阿替洛尔约，精密称定，精密加入硫酸20ml使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液3滴用氢氧化钠溶液滴定至溶液为灰紫色并将滴定结果用空白试验校正每1ml的硫酸（）相当于的阿替洛尔二）剩余酸中和法（二）剩余酸中和法——剩余酸中和法测定阿替洛尔的含量取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（ 约相当于盐酸普萘洛20mg),置50ml 量瓶中，加30% 乙醇溶液超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置50ml 量瓶中，用30% 乙醇溶液稀释至刻度照紫外分光光度法，在290nm 波长处测定吸收度三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法——紫外分光光度法测定盐酸普萘洛尔的含量（四）化学发光法（四）化学发光法——流动注射化学发光法测定盐酸普萘洛尔      在酸性介质中KMnO4氧化盐酸普萘洛尔可产生化学发光，Fe2+的存在可增大其化学发光强度，且化学发光强度与盐酸普萘洛尔的质量浓度在一定范围内呈线性关系据此采用流动注射技术建立了一种测定盐酸普萘洛尔的化学发光分析法该法已用于盐酸普萘洛尔片剂中盐酸普萘洛尔的测定实验步骤         准确移取一定量的盐酸普萘洛尔标准溶液或样品溶液于50mL的容量瓶中，加入1.0×104g/mL Fe2+溶液，用水稀释至标线，摇匀，作为试液；以1.0×10-4 rnol/L的KMnO4溶液(含1.5 mol/L的多聚磷酸)为氧化剂。

按图1所示流路进行化学发光强度测定，以峰高定量a-1.0×10-4mol/L KMO4+1.5 mol/L H6 P4O13；b-样品+ 1.0×10-6 g/ml Fe2+；c-水；P-蠕动泵；V-进样阀；F-流通池；PMT-光电倍增管；HV-负高压；COM-计算机；W-废液样品分析             取盐酸普萘洛尔片剂5片(标示量为10 mg/片)，研细，混匀，称取一定量粉末(含盐酸普萘洛尔约10mg)于50mL烧杯中，加适量水溶解，过滤，滤液转移至100mL容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀准确移取一定量的上述溶液于50mL容量瓶中，加入1.0×10-4 g/ml       Fe2+溶液0.5 mL，用水定容按照图1所示流路，进行化学发光强度测定以美托洛尔与单质碘形成的分子缔合物为电活性物的PVC 膜美托洛尔选择电极, 用该电极对美托洛尔片剂的含量进行测定五）离子选择电极法（五）离子选择电极法——美托洛尔片的离子选择电极法测定1.酒石酸美托洛尔标准溶液的配制　精密称取酒石酸美托洛尔0 . 342 4 g ,置25 mL 小烧杯中,以磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液(总浓度为0 . 2 mol ·L - 1 ,pH6.7) 溶解,转移至50mL 量瓶中,并以上述缓冲液定容,摇匀,即得酒石酸美托洛尔标准溶液。

其他浓度的酒石酸美托洛尔标准溶液均由此溶液以上述缓冲液逐级稀释而成2.电活性物的制备　将0.2 mol/L碘的碘化钾溶液50 mL 边搅拌边滴加到50 mL 酒石酸美托洛尔标准溶液中,即有沉淀生成,将沉淀用3号砂芯漏斗抽滤,以纯化水洗涤6～8 次,用干燥剂干燥至恒重,即得3.电极的制备　称取上述电活性物4mg ,加入0.6mL 邻苯二甲酸二丁酯,200 mg PVC 粉和5mL 四氢呋喃,搅拌均匀后倾于水平直径为5cm不锈钢圆环内,使其自然挥发成透明弹性敏感膜,用5% PVC四氢呋喃溶液粘接于塑料电极杆上,以Ag/AgCl作内参比电极酒石酸美托洛尔溶液和0. 2mol/L磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液作内参比溶液电极使用前在酒石酸美托洛尔溶液中活化20min,然后用纯化水洗至电势达到稳定之后即可使用4.电极性能的测试　    将美托洛尔电极与甘汞电极组成如下电池以测试电极的各项性能: PVC 膜美托洛尔选择电极| 待测溶液‖SCE以Ag/AgCl作内参比电极酒石酸美托洛尔溶液和磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液作内参比溶液的美托洛尔电极,在酒石酸美托洛尔溶液中活化20min ,然后用纯化水洗至电势达到稳定之后即可使用,测定方法包括标准曲线法和标准加入法。

5.对酒石酸美托洛尔片的分析　取酒石酸美托洛尔片20 片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于酒石酸美托洛尔30 mg) ,以上述缓冲液溶解并定容至50 mL 备用采用校准曲线法和药典法分别对标示量为每片25 mg 的酒石酸美托洛尔片的含量进行测定色谱条件色谱柱μm；进样口温度200℃；检测器温度300 ℃；柱温从140 ℃以10 ℃/min上升到190 ℃（六）气相色谱法（六）气相色谱法——气相色谱法测定人血浆中阿替洛尔的含量取血浆1ml，加入内标美多心安400ng，NaOH和正丁醇-环己烷（7：3）5ml混合溶剂，振摇3min，离心取出有机相再提取一次，合并有机相加入，振摇3min，提取两次，离心取出水相加入和无水乙醚6ml提取两次取出有机相，在60 ℃下用温和的N2吹干，残渣用无水乙醚溶解，加入三氟乙酸酐，室温放置15min，用N2吹干，加入乙酸乙酯25μl溶解，取2 μl进样，进行气相色谱分析实验步骤标准曲线的建立 取空白血浆1ml各7份，分别置于10ml试管中，加入阿替洛尔标准溶液使成0，5，10，20，50，100，200ng/ml，并分别加入400ng内标美多心安，按“血样处理”项下操作，以浓度C对样品于内标峰面积比Ai/As进行线性回归。

样品测定5例健康受试者，顿服阿替洛尔片25mg×2，口服后分别在0，，1，，2，3，4，5，6，8，12，24，30h取静脉血5ml，离心，取血浆1ml，按“血浆处理”项下操作，测定阿替洛尔的血药浓度其它方法其它方法1.比色法2.二阶导数分光光度法3.荧光分析法4.量热滴定法5.高效液相色谱法参考文献参考文献[1]刘文侠等 流动注射化学发光法测定盐酸普萘洛尔 分析试验室 2004年3月第23卷第3期:41-43[2]国家药典委员会编．中国药典(二部)．北京：化学工业出版社，2005．[3]彭建和等 气相色谱法测定人血浆中阿替洛尔含量 中国药科大学学报 1992，26（6）：344-346[4]张君仁等 盐酸普萘洛尔片的二阶导数分光光度测定 中国医药工业杂志 1996，27（11）：516-518[5]申兰萍，邢上海 盐酸普萘洛尔片含量测定的改进药物检测 2003年第12卷第5 期 ：3-4[6]李东辉 美托洛尔片的离子选择电极法测定中国医院药学杂志 2005 年第25 卷第9 期：822-824。