第二章中药制剂的鉴别.ppt

浙江医药高等专科学校浙江医药高等专科学校第二章 中药制剂的鉴别LOGO目的：目的：检定制剂的真实性检定制剂的真实性•方法：v 1.显微鉴别法v 2.理化鉴别法v 1）一般化学反应法v 2）升华法v 3）荧光法v 4）光谱法v 5）色谱法LOGO第一节第一节 中成药的显微鉴别中成药的显微鉴别v中药制剂的显微鉴别中药制剂的显微鉴别 利用显微镜来观察中药制剂中原药材的组织碎片、细胞或内含物等特征，从而鉴别制剂的处方组成v POSE: 凡以药材粉碎成细粉后直接制成制剂或添加有部分药材粉末的制剂，由于其在制作过程中原药材的显微特征仍保留到制剂中去，因此均可用显微定性鉴别法进行鉴别 第一节第一节 中成药的显微鉴别中成药的显微鉴别制片方法：制片方法：l散剂、胶囊剂：取粉末少量，选用适当的试液处理后直接进行显微观察l片剂：切开，刮取少量样品，观察；粉末及粗则先研细；糖衣片除去糖衣再研细l水丸、颗粒剂：于乳钵内研成粉末后观察l蜜丸：可取1丸从正中切开后，刮取少量样品进行观察 第一节第一节 中成药的显微鉴别中成药的显微鉴别 但但由由于于蜂蜂蜜蜜粘粘结结药药材材粉粉末末的的细细胞胞和和组组织织，，难难于于观观察察，，故故一一般般可可采采用用下下面面几几种种方方法使粘结组织解离后再进行观察：法使粘结组织解离后再进行观察：氢氧化钾法硝铬酸法氯酸钾法水溶法第一节第一节 中成药的显微鉴别中成药的显微鉴别难点提示：难点提示：• 在本法鉴别中，只有药材原有组织结构特征能保留到制剂中，才有意义。

故一般全部由溶剂提取的制剂，不用此法进行鉴别• 不同剂型其制片方法不同• 应选择在该制剂中没有干扰又能表明该味药存在的显微特征作为鉴别依据第一节第一节 中成药的显微鉴别中成药的显微鉴别应用实例应用实例--------六味地黄丸的显微定性鉴别六味地黄丸的显微定性鉴别[ [显微鉴别显微鉴别] ]：： 取本品置显微镜下观察，(1)薄壁组织棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物熟地黄)(2)果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁略连珠状增厚山茱萸）(3)淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24—40um，脐点短缝状或人字状山药) 3a草酸钙针晶束3b淀粉粒(4)草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中(5)不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛溶化；菌丝无色，直径4-6um茯苓)(6)薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法一、般化学反应法一、般化学反应法 中药制剂一般选择有效成分、特征成分作为鉴别的对象 一般化学反应鉴别法多在试管中用湿法反应进行，制剂样品要先制成适宜的供试液一般情形下用50％-70％乙醇回流提取制备供试液。

第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法一般化学反应法应该注意以下几点： (1)慎重使用专属性不好的分析反应，如泡沫生成反应、三氯化铁显色反应等 (2)在分析前对样品进行分离、精制，除去干扰分析反应的物质，借此改善鉴别方法的专属性 (3)采用阴性对照和阳性对照的方式，对拟定的鉴别方法进行反复验证，防止出现假阳性硝铬酸法第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法实例实例 牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反取本品6片(去包衣)，研细，加乙醇10ml，温热10分钟，过滤，滤液作如下反应： (1)取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色黄芩中有大量黄酮） (2)另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，显红色，再加30％过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸或酸性时，红色变为黄色大黄中含有羟基蒽醌）第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法二、显微化学鉴别法二、显微化学鉴别法 (一)取药材的切片、粉末或中成药粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶或沉淀，以及特殊的颜色等，作为鉴别的特征。

例：穿心莲用水湿润，切成横切片，滴加乙醇后加Kedde试液，叶肉组织显紫红色(穿心莲内酯成分的不饱和内酯环反应) 第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法 (二)取药材粗粉加适当的溶剂浸提，将浸提液置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察反应例如： 槟榔粉末0.5g，加水3～4ml及稀盐酸1滴，微热数分钟，过滤，取滤液1滴于载玻片上，加碘化铋钾试液1滴，即发生混浊，放置后可见石榴红球形或方形结晶(槟榔碱)第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法 (三)取药材切片或粉末，滴加各种试剂，直接观察反应现象例如： 钟乳石少许，加浓盐酸数滴，能产生大量气泡(碳酸盐分解产生CO2) 番木鳖胚乳薄片，加1％钒酸铵-硫酸试液1滴，胚乳速显紫色(番木鳖碱)，另取切片加发烟硝酸1滴，即显橙红色(马钱子碱)第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法三、升华法三、升华法 操作方法：取金属片安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上，在金属片上放一小金属圈(内径约1.5cm，高约0.8cm)，对准石棉板上的圆孔，圈内放入预先研细成粉末的中药制剂一薄层，圈上覆盖载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯缓缓加热，至粉末开始变焦，去火待冷，载玻片上有升华物凝集。

将载玻片反转后，置显微镜下观察结晶形状、色泽，或取升华物加试液观察反应第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法实例 牛黄解毒丸微量升华鉴别 取本品进行微量升华，先得白色升华物后（冰片），继得黄色升华物（大黄中蒽醌）将升华物分别置显微镜下观察：白色升华物呈不定形的无色片状结晶，加新制的1％香草醛硫酸溶液，渐显紫红色，黄色升华物呈黄色针状结晶或羽状结晶，遇碱显红色，遇酸变为黄色第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法四、荧光法四、荧光法 有些中药材中含有能产生荧光的化学成分，在可见光、紫外光照射下能发出荧光，或经试剂处理后发出荧光含有这类药材的中药制剂可用荧光法进行鉴别通常的操作方法是取制剂的提取液点在滤纸上或试纸上，置紫外光灯下(365nm)观察，有时则是加一定的试剂后再进行观察 第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法实例l 元胡止痛片的荧光鉴别 取本品适量，去糖衣，研细，取粉末1g，加0.25mol／L硫酸液10ml振摇片刻，滤过，取滤液数滴，点于滤纸上，阴干后置紫外光灯(365nm)下观察，显亮黄色荧光。

第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法五、光谱法五、光谱法u荧光法u可见-紫外分光光度法•最大吸收波长法 （规定吸收波长法）•对照品对比法•规定吸收波长和吸收度法•规定吸收波长和吸收度比值法•多溶剂光谱法u红外分光光度法（4000-400cm-1）•优点：取样量少、快速、简便、准确复方丹参滴丸中丹参的鉴别复方丹参滴丸中丹参的鉴别“取本品取本品1515丸，加少量水，搅拌使溶解后用水稀释至丸，加少量水，搅拌使溶解后用水稀释至100ml100ml，，摇匀，取摇匀，取2ml2ml，，加水至加水至25ml25ml，，摇匀，照分光光度法测定，摇匀，照分光光度法测定，在在283nm283nm的波长处有最大吸收的波长处有最大吸收第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法厂家厂家A批次批次1厂家厂家A批次批次2厂家厂家B不同厂家不同批次清开灵注射液不同厂家不同批次清开灵注射液IRIR图谱比较图谱比较第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法六、色谱法六、色谱法Ø纸色谱法斑点的位置（Rf）、颜色（或荧光），与对照品相比较Ø薄层色谱法•样品供试液的制备（提取、分离纯化） 利用极性、酸碱性等性质的不同，用萃取、过柱等方法将欲测组分提取，减少其他成分和杂质的干扰•薄层色谱法使用的材料 薄层板及吸附剂、涂布器、点样器材、层析缸、显色与检测仪器•操作方法•薄层色谱图的记录与保存第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法薄层色谱法薄层色谱法影响薄层色谱分析的主要因素影响薄层色谱分析的主要因素•样品的预处理及供试液的制备•点样技术•吸附剂的活性与相对湿度•温度对照物选择对照物选择•对照品•对照药材（阳性对照）•阴性对照液第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法实实例例--------首首乌乌丸丸薄薄层层色色谱鉴别谱鉴别提取方法：甲醇提取薄 层 板 ： 硅 胶G+0.5%NaOH展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15:2:1）检测波长：365nm1 大黄素2 大黄素甲醚3-4 何首乌对照药材5-6 首乌丸 1 2 3 4 5 第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法薄层扫描法薄层扫描法实例实例--------冠心苏合丸的薄层扫描鉴别冠心苏合丸的薄层扫描鉴别（苏合香、冰片、乳香（制）、檀香、青木香）乳香鉴别薄层扫描图苏合香鉴别薄层扫描图阴性对照阳性对照供试品第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法气相色谱法气相色谱法 气相色谱法的分离效能高，检测器种类多而且灵敏度高，是混合物鉴别的有效方法。

该法目前主要是用于含挥发油和挥发性成分的制剂分析第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法高效液相色谱法高效液相色谱法 主要是利用化合物在特定的色谱柱上，在一定条件下的保留值，将某一样品与其对照品在同一条件下，进行保留时间的直接比较作为鉴别依据对于复杂未知成分，也可以加入对照品，观察被测峰是否增高，以初步作定性结论对于复杂组分尚可采用联机技术，如本法与质谱联用，先分离后再作定性鉴别 第二节第二节 中药制剂的一般理化鉴别法中药制剂的一般理化鉴别法槲皮素、山奈素、异鼠李素对照品槲皮素、山奈素、异鼠李素对照品供试品供试品LOGO。