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免疫实验-双向琼脂扩散试验.ppt

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卖家[上传人]：飞***

文档编号：49254164

上传时间：2018-07-26

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实验二双向琼脂扩散试验免疫教研室实验目的通过本实验掌握双向琼脂扩散试验的基本原理和方法，了解应用和临床意义实验原理抗原与相应抗体在含有电解质的琼脂内，各自向孔四周琼脂中扩散，在抗原与抗体比例合适处形成可见的白色沉淀线实验材料n抗原：待检血清n抗体：羊抗人IgG诊断血清n15g/L盐水琼脂n玻片、吸管、打孔器、湿盒等实验方法——实验程序热融琼脂→浇板→打孔→加样→扩散实验方法——浇板取融化的5g/L盐水琼脂4~5ml，注加于普通清洁玻片实验方法——打孔待琼脂凝固后，用直径3mm的打孔器打孔，保持孔间距5mm，呈梅花状图案实验方法——加样用微量滴管向孔中加样中央孔加抗体，外周孔加各待测抗原，并设立阳性对照孔实验方法——扩散将加样完毕的琼脂板放入湿盒中37℃ 48h～72h，并于24h、48h、72h各记录一次实验结果在抗原抗体孔间形成沉淀线结果分析n若相邻抗原是同一种抗原a，则出现完全融合的沉淀线n若相邻抗原有相同的抗原成分a，则抗原ab 、ac出现部分融合的沉淀线n若相邻抗原是两种完全不同的抗原a、b，则出现交叉的沉淀线临床意义n用于临床血清学诊断，如已知抗体测抗原n根据沉淀线位置，、形状、数目等，可初步分析抗原抗体的纯度、浓度、扩散速度等理化性状。

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