新三大素测定方法.docx

三大素测量方法1、 测量原理：用72%的浓硫酸和4%的稀硫酸两步水解试样，使木质纤维素中的 组分水解成易定量物质其中，纤维素和半纤维素水解为单糖，用 高效液相色谱法进行定量，而木质素采用灼烧法定量2. 具体操作步骤：(1) 将物料烘干至固形物含量大于90%,物料粉碎至粒径＜2ninio(2) 称取300± lO.Omg样品，小心放入压力管底部，记为Mo (注：操作时尽量避免样品粘壁)3) 加入3.00mL 72%浓硫酸到试管中，使用玻璃棒充分搅拌， 确保所有的样品都被浸湿4 )将压力管放在30 C的水浴锅中反应60inin,每5・10min用玻 璃棒搅拌一次，同时保证试管浸在水浴中5 )水解60 niin后，将压力管从水浴中取出，加入纯水84mL, 使硫酸稀释至4%,将盖子盖好，翻转充分混匀6 )准备SRS样品，用来校正单糖被稀酸水解引起的损失将10mL 的SRS溶液加到压力管里，再加348.4UL 72%的H2SO4SRS溶液配制：葡萄糖:3g/L^Mf:0.8g/L,阿拉伯糖：0.4g/Lo(7)将含有样品和SRS的试管放入灭菌锅中，121°C下，处理lh8 )使水解后的样品慢慢冷却至接近室温。

9 )用真空泵过滤水解产物，得到过滤后的水解液和滤渣10)残渣:用热蒸馅水洗涤至洗液呈中性后，105°C烘干，称重 Mi后，在550°C下灰化，得灰分与漏斗总重计算木质素含量11 )吸取5mL水解液，将液体过0.2um针孔膜，进HPLC测定 根据色谱结果计算纤维素、半纤维素含量，对于葡萄糖等六碳糖转化为纤维素需乘以系数0.9,木糖等五碳糖转化至木聚糖需乘以系数 0.88标准单糖平均回收率R=SRS水解后HPLC检测得到的糖浓度未经过水解处理HPLC检测得到的糖浓度单糖浓度O = C HPLC'XR纤维素百分含量=Cgkx87xl0"x0.9xi（）（）% MqMo 木质素百分含量=M1~M2x100% M半纤维素百分含量=（S + 5M7xEx0.88 Xi％式中：m（）为取样量；L为试液体积；由于玉米、甘蔗、稻谷等草本类植物中木糖、阿拉伯糖 是形成半纤维素的主要单糖因此以木糖和阿拉伯糖之和来 计算半纤维素含量。