保健食品中芦荟苷的测定.doc

保健食品中芦荟苷的测定1 范围本方法适用于以芦荟及其制品为原料的保健食品中芦荟苷含量的测定本方法的最低检出量10ng本方法的最佳线性范围：0～100μg/mL2 原理：用甲醇+水（55+45）作为溶剂，提取试样中的芦荟苷，经高效液相色谱仪C18 柱分离，在紫外293nm 波长下检测，以芦荟苷保留时间定性，峰面积定量3 试剂 除特殊说明，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682-2008一级水要求3.1 甲醇：色谱纯3.2 芦荟苷标准品：纯度≥98%3.3 芦荟苷标准溶液：精确称取芦荟苷标准品10.0mg，加流动相甲醇+水（55+45）溶解并移入100mL容量瓶中，定容至刻度精密移取5mL至10mL容量瓶中，加流动相定容至刻度4 仪器设备4.1 高效液相色谱仪：附二极管阵列或紫外检测器4.2 色谱柱：C 18（以十八烷基键合硅胶填料为填充剂）或具同等性能的色谱柱，150mm×6mm，5μm4.3 超声波清洗器4.4 C18净化富集柱C 18预柱装量0.5g：分配型4.5 离心机：3000r/min5 色谱参考条件5.1 流动相：甲醇+水=55+455.2 流速：1mL/min5.3 柱温：40℃5.4 检测波长：293nm5.5 灵敏度：0.016AUFS5.6 进样量：10μL6 分析步骤6.1 试样制备：将固体试样粉碎成粉末状，混匀，称取适量试样（相当于含芦荟苷2.5mg，精确至0.001g）于50mL容量瓶中，加检测用流动相30mL，混匀，经超声振提5min，加流动相定容50mL，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤，芦荟汁饮料直接经0.45μm 滤膜过滤。

6.2 测定步骤：分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL 注入高效液相色谱仪，依上述色谱条件，以保留时间定性，用外标法计算试样中芦荟苷的含量7 结果计算X = mAVC21式中：X—试样中芦荟苷含量，mg/g（mg/mL）；A1—试样中芦荟苷的峰面积或峰高；C—标准液的质量浓度，mg/mL；A2—标准液中芦荟苷的峰面积或峰高；V—试样定容体积，mL；m—试样的质量，g（mL）计算结果保留三位有效数字。