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癌抗原125操作规程sop癌抗原 125（Cancer Antigen 125，CA125）1．检验目的检测血清CA125主要是用于卵巢上皮细胞的诊断或鉴别诊断，可以动态观察相关疾病 的发生发展过程、疗效及预后评估另外有报道在成人的胸膜、动脉外膜炎、腹膜中也可表 达2．方法原理采用了美国雅培公司的专利技术——微粒子酶免疫分析（MEIA）,即以anti-CA125包被微 粒子（M-Ab）与标本中的CA125形成M-Ab-Ag复合物，当复合物被转移到纤维杯上时， 微粒子就不可逆地结合到纤维杯表面的玻璃纤维上,并与加入的碱性磷酸酶标记anti-CA125 结合，洗去未结合的游离物质，加入底物——四甲基伞形酮磷酸盐，碱性磷酸酶脱去底物的 磷酸基而发出荧光，通过MEIA光路元件检测而得到定量结果3．性能指标MEIA定量检测CA125不精密度CVs为4.9-27.3%,检出限＞2U/m 1,灵敏度2U/m 1,重复性 92-109%,白蛋白、a-1酸性糖蛋白、胆红素等于22种体内相关成份对AFP测定无干扰，携 带污染率0.001%4．标本收集4．1 标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本（抗凝剂可用肝素钠、 枸橼酸钠或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求一一化学纯或分析纯，使用的比例以 厂家推荐为准）；其他体液如羊水、胸水、腹水等体液可以作为检测标本，但加热灭活的血 清和血库的库存血则不宜作为检测标本。

4．2 标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充 分凝固后收集血清），不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，明显溶血的标本不宜采纳,进行抗 凝或血栓溶解治疗的病人采血后宜适当延长凝固时间再进行离心分离血清，羊水中如混有胎 儿红细胞可能会导致较高的AFP结果，因此抽取羊水应尽量不要混入胎儿红细胞4. 3标本保存：留取的标本最好在3小时内检测，不能立即检测的应放置于2-8°C最长达 24小时（可以含有凝块但要密闭以防蒸发），或者-20C最长达12个月（不能反复冻融也不 能含有凝块和红细胞）4. 4 标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性 的不同规格的塑料离心管4. 5标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml塑料离心管）存 放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8C）或干冰（-10C） 由专人运送至指定地点指定接收人4. 6 拒收标本：凡与 4.1-4.5 所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒 收标本的原因，并提出解决的方案或建议5. 分析系统5. 1分析仪器：为美国雅培公司提供的AXSYM全自动免疫分析仪，仪器校准请参见 仪器操作规程。

5. 2分析试剂：为美国雅培公司提供的配套的CA125试剂盒，规格为100test/盒，2-8C 贮存，有效期6个月；在效期内使用试剂5. 3定标试剂：为美国雅培公司提供的配套的CA125试剂盒中所附带，2-8C贮存，有 效期6个月；每换一次不同批号试剂均应进行重新定标5. 4质控试剂：为美国雅培公司提供的配套的质控品，分为高、中、低三个浓度， 2-8C 贮存，有效期 6 个月；每天随常规工作一起检测并保存质控结果，每月一次质控小结，失控 要有记录及纠正的结果5. 5其他耗材：均为美国雅培公司提供，如MUP、Matrix cell液、4号液、探针清洗 液、管道消毒液等，其中MUP为2-8°C贮存，其他均室温存放6. 定标程序6. 1仪器开启后（开机程序参见仪器操作规程），从屏幕主菜单中选择ORDERLIST6. 2 选择 F4（ CAL）6. 3选择要定标的项目—— A1256. 4 输入标本架的位置6. 5 输入标准品的批号和效期（可省略）6. 6选择定标类型——MASTER曲线6. 7选择F6 （ADD）确认定标申请6. 8 返回主菜单，选择 STORED RESULTS6. 9 选择 CALIBRATION REVIEW。

6. 10 选择 F4-NEW LOT6. 11选择：F4-SCAN用条码阅读器扫描主校正曲线，先上后下移动条码；或者用键盘手工 输入条码数据6. 12选择F6-SAVE储存主校正曲线数据6. 13返回主菜单，按RUN键运行即可6. 14查阅定标结果：从主菜单选择STORED RESULTS/CALIBRATION REVIEW，选 择F5 （VIEW ALL），选择项目——AFP,查看定标内容，F6——查看详细内容7. 标本申请操作程序7. 1开机以后检查库存是否足够（包括纤维杯、bulk soIUtions、标本架的有效性）和 垃圾桶是否需要清理7. 2 从主菜单选择 ORDERLIST7. 3 选择 F6——PATIENT7. 4输入标本架的位置编号，如果系统设定自动标本位置定义，则无须此步骤7. 5 输入标本编号，如果系统自动设定标本编号定义，则无须此步骤7. 6 输入以下信息（可选择）：病人编号、病人姓名、病人说明，根据需要可以不输7. 7 选择该标本要检测的项目或项目组合（同时检测多个项目的也可以手工选择），在 此还可选择稀释模式、检测次数和是否急诊7. 8选择F6 ADD,确认病人标本申请。

7. 9如果还有标本需要申请，重复2-7步骤，如无则选择F1——EXIT返回病人项目申 请（这时可以查看申请是否正确）7. 10选择F1-EXIT返回主菜单，按RUN键运行8. 质量控制操作程序8. 1 质控品申请参照7“标本操作”步骤执行，即随常规标本一起申请检测8. 2质控结果登记到本年度的“免疫室定量检测项目室内质控登记表”8. 3每天将测定的质控结果与质控允许范围进行比较：CA125质控血清一共有三个浓 度（30 U/ml、80 U/ml、200 U/ml），质控范围分别为 22.5U/ml-37.5U/ml、64U/ml-96U/ml、 160U/ml-240U/ml8. 4一旦发现失控，应即时查找和分析原因，并在该结果栏作详细的批注和记录解决的 过程；失控情况处理及原因分析详见9“失控处理”8. 5 每月进行质控小结并将原始数据打印和存盘留档9．失控处理操作程序9．1 失控情况处理：操作者在分析质控结果时，如发现质控违背了控制规则，应填写 失控报告单，上交专业室主管（组长），由专业室主管（组长）做出是否发出或重测与质控 品相关的该批次病人标本检验报告的决定9．2 失控原因分析：失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上的失误、 试剂、校准物的存贮条件改变、质控品的失效、仪器维护不良以及采用的质控规则、控制范 围、一次测定的质控标本数等等。

失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的该批病人 标本报告可能作废，此时首先要查明导致失控的原因，是质控品本身的原因还是质控品以外 的原因如是质控品以外的原因则应判为真失控，与质控品相关的同批次病人标本重新检测； 如是质控品本身的原因，则判为假失控，与质控品相关的同批次病人标本不必重测，可以发 出报告当失控信号出现时，可以采取以下步骤去寻找原因：9．2．1 立即重测同一质控品此法主要用于查明人为误差，每一步都应该认真仔细的 操作，以查明失控的原因；另外，这一步还可以查出偶然误差，如是偶然误差，则重测的质 控结果应在允许范围（在控），可以认为该批次的病人标本不必重测如仍不在允许范围则 可以进行下一步9．2．2 新开一瓶质控品，重测失控项目如果新开的质控血清结果正常，那么原来那 瓶质控血清可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者被污染，此时可以认为该批次病人 标本不必重测如仍不在允许范围则可以进行下一步9．2．3 新开另一批质控品，重测失控项目如果结果在控，则说明前一批血清可能都 有问题，检查它们的有效期和贮存环境，以查明问题所在，可以认为该批次病人标本不必重 测如仍不在允许范围则可以进行下一步。

9．2．4 进行仪器维护，重测失控项目检查仪器状态，检查光源是否更换，对仪器进 行清洗维护，然后再测质控品，如在控，则说明是仪器原因，该批次的病人标本应重测如 仍不在允许范围则可以进行下一步9．2．5 更换另一试剂盒，重测失控项目检查试剂是否过期或贮存环境，更换试剂盒 重新检测质控品，如在控则说明试剂存在问题，该批次病人标本应重测如仍不在允许范围 则可以进行下一步9．2．6 重新校准仪器，重测失控项目使用新的校准液校准仪器，重新检测质控品， 在控则说明是校准问题，该批次病人标本应重测如仍不在允许范围则可以进行下一步9．2．7 请专家帮助前6 步都未能得到在控结果，如果其他同类型检验项目在控，则 需要联系试剂厂家寻求技术帮助；如果其他同类型项目也失控，则需要与仪器厂家工程师取 得联系了10．注意事项10．1 血清（浆）中含有颗粒（如红细胞、纤维蛋白丝等）会引起错误的结果，因此离 心收集血清（浆）时应不能将这些颗粒的物质加样品杯中10．2 加样时应避免标本产生气泡，放置试剂时也应避免试剂产生气泡10．3 明显溶血的血清标本或混有胎儿红细胞的羊水标本均会导致错误的结果11．结果计算11. 1 U/ml值表示。

AXSYM免疫分析仪采用Master对CA125定标，每个标准浓度（U/ml） 测双份然后取其平均值存贮电脑中，以后在对病人标本检测时，每次将病人标本的测定值通 过 CA125 标准曲线计算得到12 .参考区间正常人 CA125 在 0-35 U/ml13 .警告值13. 1当CA125检测值在35-45 U/ml之间一般视为低浓度区或灰区，应当进行重复检 测或动态观察13. 2当CA125检测值在〉600 U/ml以上时，则提示CA125浓度超出了仪器和试剂的 检测线性范围，如需要准确报告结果则应稀释重做（分仪器稀释和手工稀释），仪器稀释的 结果不需要再乘以稀释倍数，手工稀释则需要乘以稀释倍数14. 结果解释14. 1标本的CA125值小于35 U/ml时被认为CA125在正常范围内，但是如果与临床 表现或其他影像学不符则应进行动态观察14. 2对CA125轻度增高的标本，应重复检测或进行动态观察14. 3对于假阳性结果的原因可能有：血清标本中含有颗粒性物质（红细胞）或纤维蛋白丝、 前一份血清标本含有高滴度的CA125使得在加样时存在携带污染、羊水中混有胎儿红细胞、 明显的溶血、非特异性反应存在。

14. 4诊断或鉴别诊断卵巢癌等恶性肿瘤必须结合就诊者的自身情况、其他相关影像学检查 及临床表现进行综合性判断14. 5对于其他体液标本和血库库存血的检测结果只能作为参考14. 6对于反复冻融的血标本或含有颗粒性物质的血标本应离心后再进行检测14. 7 抗凝或进行血栓溶解治疗病人的血标本可能由于部分凝固而存在潜在的纤维蛋白 丝，因此可能产生错误的结果15 .安全防护15. 1 对任何一份标本（包括质控品、标准品及检测试剂等）都应视其为具有传染性， 操作人员在工作时应戴乳胶手套、穿工作服15. 2 一旦发生标本容器划破手或身体、液体溅进眼睛等粘膜处，应立即用大量的水冲 洗，同时向上级医师或科领导报告，必要时施以丙种球蛋白预防16. 常见的误差源16. 1 仪器原因：仪器的性能、仪器的校准等16. 2试剂原因：试剂过期、定标液过期等16. 3标本原因：标本处理、收集不符合要求等16. 4人为原因：结果填写错误等17. 参考文献17. 1 Abbott AXSYM AFP MEIA k。