作物根系活力诊断法.doc

作物根系活力诊断法 diagnosis method of crop root vigour 字体 [大] [中] [小]调查观察作物根系形态和生理生化变化以判断其生活力的强弱根是作物吸收水分、养分的主要器官，是作物营生的根本作物产量与根系休戚相关作物“早衰” ，常与根系活力过早下降或衰竭有关对于生育于淹水环境中的水稻更是如此 根系脱氢酶活性诊断法——TTC 法 作物根系有氧呼吸过程中，在脱氢酶作用下，释放氢并产生能量供作物代谢和吸收养料需要作物长势与根系脱氢酶有密切关系，脱氢酶活性大小可以大致判断根系活力的强弱TTC(三苯基氯化四氮唑)可被根系有氧呼吸中由脱氢酶作用产生的氢还原成红色的 TPF(三苯基甲䐶) ，红色深浅反映脱氢酶活力强弱测定方法是：取代表性植株，尽量不伤其根并仔细洗净，称根样 1～2 克放入试管，加 10 毫升 0.4%的 TTC 和0.1 摩尔/ 升磷酸盐缓冲液(Na 2HPO4 14.196 克、KH 2PO4 13.609 克，分别加蒸馏水 1 升，分取 620 毫升和 380 毫升混合)，37℃恒温作用 3 小时，TTC 被脱氢酶还原成红色TPF，加 1 摩尔/ 升硫酸 2 毫升，停止酶作用。

取出根移入研钵与 3～5 毫升乙酸乙酯和少量石英砂共研，使红色 TPF 溶出，转入 50 毫升量瓶，继续多次洗涤残渣至无色滤液转入量瓶，用乙酸乙酯定容，分光光度计上 485 微米比色，制备标准曲线用 TPF 浓度系列为 0，2.5，5.0 ，7.5，10.0 ，12.5，20.0微克/毫升，比色读取光密度，绘成曲线试样比色读得光密度，查曲线得 TPF 浓度，乘以样品稀释倍数(比色液总体积毫升/克鲜根重) 即为脱氢酶活性(TPF 微克/克鲜根 3 小时) 伤流量诊断法 作物伤流液多寡与根系活力密切相关测定一定时间内的伤流液量可以作为根系活力的指标伤流量大，根的活性强测定时选用直径适中(根据作物不同使刚能套紧切口为度) ，长2～ 3 厘米一端封闭的薄塑料套管，内装少量脱脂棉以吸收伤流液称重后，把套管套在植株切断伤口上，使脱脂棉紧密接触切口，经一定时间(根据伤流量多少决定时间长短) ，取下套管再次称重两次重量的差数代表一定时间的伤流量： 水稻根系氧化力诊断法——α- 萘胺法 水稻生育于淹水环境下，其根系具有一特殊的乙醇酸氧化途径，能向根外泌氧使根系周围形成氧化圈，以抵抗土壤中还原物质如H2S、Fe 2+、Mn 2+、有机酸的侵害，水稻根系氧化力是水稻根系活力的指标。

α-萘胺为一还原剂，能被水稻根氧化成红色的羟基萘胺，颜色深浅反映根系氧化力的强弱约测法：取水稻鲜根，尽量避免损伤，吸干附着水，剪下根尖 2 厘米根段，称1 克，放在三角瓶中，并加 25 毫升 40 毫克/千克的 α-萘胺和25 毫升 0.1 摩尔/ 升的磷酸缓冲液，作用数小时后，从根表染色深浅作大致判断，红色由浅而深氧化力由弱到强标准色阶比色测定法：由于直接测定被根氧化的 α-萘胺困难，实际测定中是测定氧化后的剩余 α-萘胺量，以对氨基苯磺酸和亚硝酸钠与 α-萘胺一起作用生成偶氮染料显紫红色，进行比色定量制作标准曲线的 α-萘胺系列浓度可用0，10，20，30，40，50 ，60 微克/毫升，比色，读取光密度，绘成工作曲线 水稻根系氧化力——二价铁氧化力测定法 水稻根系分泌的氧能使二价铁氧化成三价铁，使溶液 Eh 值提高，测定溶液 Eh值变化大小可以粗略判断根系氧化力的强弱方法是取水稻根系，仔细洗净，吸干表面水分，沿根基切下，剪下 1 厘米左右根段用烧杯盛 75 毫升 15 毫克/千克的硫酸亚铁液(FeSO4·7H2O74.7 毫克，加水 1 升，调 pH 值为 6.2)，以pH 值计(可测 Eh 值)先测定硫酸亚铁液 Eh 值并记录，再称取样根 3 克，放入亚铁溶液中，在不断摇动搅拌下每隔 1 或 2 分钟一次连续测计 Eh 值，至 30 分钟止。

测定结果以 Eh 值为纵坐标，时间为横坐标，绘出 Eh 值曲线，该曲线可能有两种形式( 见图)曲线 2 的初始 Eh 值下降是因根表存在的氧化铁膜所致，故其氧化力的起始值(Eh 值)应从最低值算起，曲线上升速度指示根系氧化力大小，同一时间内，Eh 值差异越大，曲线上升越快，即陡度越大时氧化力越强。