【最新word论文】α-抑制素CD99联合应用在卵巢性索间质肿瘤表达意义的研究【临床医学专业论文】.doc

1α-抑制素 CD99 联合应用在卵巢性索间质肿瘤表达意义的研究作者：任永昌 甄宏伟 朱素玲 李守村 叶涛 董正 肖成涛 【关键词】 α-抑制素摘 要：目的：探讨 α-抑制素、CD99、EMA 在卵巢性索间质肿瘤中的表达情况及在该类肿瘤的诊断、鉴别诊断及预后等方面的意义，为临床病理诊断和鉴别诊断提供科学依据方法：收集我院病理确诊的卵巢性索间质肿瘤 41 例，其中颗粒细胞瘤 21 例，卵泡膜纤维瘤 11 例，环状小管性索瘤 4 例, 支持间质细胞瘤 3 例，卵巢支持细胞瘤 2 例同时选择 10 例卵巢上皮性肿瘤作为对照进行对比观察（见附表） 所有标本均经中性福尔马林固定，4um 切片，用 SP 法免疫组化标记，α- 抑制素、CD99、EMA 均为鼠抗单克隆抗体DAB 显色后，苏木素复染、中性树胶封固以正常一抗动物血清代替一抗做阴性对照，抗体由北京中山生物技术公司提供结果判定:α-抑制素阳性在核或浆，CD99 阳性表达在细胞膜或浆结果：颗粒细胞瘤 21 例中，α-抑制素 19 例阳性,阳性率为90.5%,CD99 有 17 例阳性,阳性率 80.9%；卵泡膜纤维瘤 11 例中，α-抑制素 9例阳性,CD99 均为阳性；环状小管性索瘤 4 例，α- 抑制素均为阳性,CD99 3 例阳性；支持间质细胞瘤 3 例、支持细胞腺瘤 2 例，α-抑制素、CD99 均为阳性,幼年性颗粒细胞瘤复发者 1 例两次均为阳性。

结论：α-抑制素、CD99 联合应用标记性索间质肿瘤有很高的敏感性和特异性，对区分性索间质肿瘤类型、判定复发、预后、转移有重要意义，其效果明显优于单纯应用 CD99、苗勒抑制物、Melan- A 等标记物关键词： 卵巢性索间质肿瘤； 免疫组化； α- 抑制素； CD99Investigate the Expression of α-inhibin、CD99 in Ovarian Sex Gonad Stromal TumorsAbstract： Objective： To investigate the expression of α-inhibin, CD99, EMA in ovarian sex gonad stromal tumors and the significance in diagnosis, differential diagnosis and prognosis of these tumors. To provide more scientific bases for clinical pathologic diagnosis and differential diagnosis.Method： 41 specimens and clinical history were collected including 21 cases of granulosa cell tumor, 11 cases of ovarian fibroma, 4 cases of sex cord tumor with annular tubules, 3 cases of sertoli-leydig cell tumor and 2 cases of ovarian sertoli cell tumor.And 10 cases of ovarian epithelial tumor are selected as controls (see the attached table). All these specimens are processed neutral formaldehyde solution fixation, 4um section; 2then labeling with SP immunohistochemistry, α-inhibin, CD99, EMA are murine monoclonal antibody, after DAB ,neutral gum mounting at last. Instead of primary anti, we use normal primary anti animal blood serum as the negative contrast, the antibody is provided by Beijing zhongshan biotechnology company. Result： Determination:α-inhibin positive occurs on cell nucleus or cell plasm, CD99 positive occurs on cell membrance or plasm. In the 21 cases of granulosa cell tumor, 19 cases are α-inhibin positive, positive rate is 90.5%; 17 cases are CD99 positive, positive rate is 80.9%; In the 11 cases of ovarian fibroma, 9 cases are α- inhibin positive, all these cases are CD99 positive;In 4 cases of sex cord tumor with annular tubules, all of them are α-inhibin positive and 3 cases CD99 positive. In 3 cases of sertolileying cell tumor and 2 cases of ovarian sertoli cell adeoma,all of them are both α-inhibin positive and CD99 positive. In 1 case of repea childhood granulosa cell tumor both are positive in primary and relapse. Conclusion： High sensibitity and specificity can be obtained by labelling sex gonad stromal tumors with the combination of α-inhibin and CD99. It has important significance in distinguishing the types of sex gonad stromal tumors, determining relapes, prognosis and metastasis. It is superior to use CD99,mullenian inhibiting substance ,Melan- A purely and proper to wide usage.Key words: Ovarian sex gonad stromal tumor; Immunohistochemistry; α- inhibin; CD991 资料与方法1.1 资料来源：全部病例均为我院 1993 年 7 月至 2004 年 4 月妇科住院手术病例,经光镜病理确诊的性索间质肿瘤,筛选无出血、坏死的 41 例的蜡块标本,其中颗粒细胞瘤 21 例,卵泡膜纤维瘤 11 例,环状小管性索瘤 4 例,支持间质细胞瘤 3 例, 支持细胞腺瘤 2 例。

1.2 方法:所选蜡块标本均经中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，4um 切片，分别做 HE 染色和免疫组化：α-抑制素、CD99、EMA 均为鼠抗单克隆抗体、枸缘酸钠缓冲液（0.01mol/l、PH 值 6.0）处理,微波 92～98℃，10～15min 修复，一抗 4℃冰箱过夜，经 DAB 显色后，苏木素复染，中性树胶封固，PBS 缓冲液代替一抗做阴性对照，抗体由北京中山生物技术公司提供结果判定 α- 抑制素阳性在核/浆，CD99 阳性表达在胞膜/浆上，定量计数标准:1%～10%（+） 、10%～50%（++） 、＞50%（+++） 、＜1%（―） 2 结 果2.1 临床资料:41 例病例中, 病人年龄 12～68 岁，平均年龄 39.1 岁,高峰3年龄为 30～45 岁，其中双侧者 4 例，单侧 32 例，转移 1 例临床症状：下腹包块 26 例，阴道流血 3 例，经期延长伴月经量增多 3 例，闭经伴毛发增多 4 例，其中一例幼年性颗粒细胞瘤出现性早熟现象肿物最大 D：30.5cm，最小D：3.4cm，D>16cm 巨大肿物 6 例，切面呈囊实性 7 例，实性 34 例复发 1例，转移 2 例，颗粒细胞瘤行双侧卵巢子宫全切 12 例，其中 2 例伴子宫内膜样癌行子宫根治术,1 例为幼年行肿物单纯切除术后一年复发;卵泡膜纤维瘤瘤单纯切除 11 例。

2.2 免疫组化结果:颗粒细胞瘤 21 例中 α-抑制素 19 例阳性,阳性率为 90.5%、CD99 有 17 例阳性,阳性率 80.9%、EMA 均为阴性；卵泡膜纤维瘤 11例中 α-抑制素 9 例阳性、CD99 均为阳性、EMA 均为阴性；环状小管性索瘤 4 例，α-抑制素均为阳性、CD99 3 例阳性、EMA 均为阴性；支持间质细胞瘤 3 例，α-抑制素、CD99 均为阳性、EMA 均为阴性；支持细胞腺瘤 2 例 α-抑制素、CD99、EMA 均为阳性,幼年性颗粒细胞瘤复发者 1 例,两次均为阳性见表 1表 1 α- 抑制素、CD99 与 EMA 与卵巢肿瘤类型的关系比较表（略）3 讨 论卵巢肿瘤种类繁多，而性索间质类肿瘤相对少见，约占卵巢肿瘤的 5%［1］ ，主要包括向女性间叶分化的颗粒细胞瘤、卵胞膜细胞瘤、硬化性间质瘤、纤维瘤和向男性间叶分化的支持- 间质细胞瘤等，此外还包括向两性分化的两性母细胞瘤和未分类的伴环状小管性索瘤等约 2/3 该类肿瘤病人临床常常有内分泌症状在以上肿瘤中，颗粒细胞瘤约占肿瘤的一半；我们知道，颗粒细胞瘤容易远期复发和转移，为恶性或低度恶性肿瘤；而高分化-支持间质细胞为良性肿瘤，但部分中度分化和低分化支持- 间质细胞瘤又常常表现为恶性生物学行为，其他大部肿瘤均为良性。

因此，正确区分其组织类型对指导临床治疗和判断预后，就显得尤为重要大多数卵巢性索间质肿瘤，都能通过普通 HE 染色，光镜检查得以确诊；但当肿瘤分化较低、形态结构不典型时，往往诊断较为困难，这就需要借助免疫组化进行区分；以往由于缺乏特异性较强的标志物，使免疫组化在性索间质肿瘤中的应用价值作用不大，虽有人用 Calretinin、苗勒抑制物、Melan- A 等作为性索间质肿瘤的有效抗体，但不敏感［2］ 后来人们研究发现：尤文氏肉瘤的特异性标志物 CD99 在性索间质肿瘤中有高达 94.5%［6］的表达率，且临床有内分泌症状时表达率更高，原因不明［3～5］ 近来有人发现：卵巢颗粒细胞能分泌一种激素叫抑制素,是一种二聚体蛋白激素，由 α、β 亚单位组成，其生理功能是抑制垂体分泌滤泡生成素，是卵巢滤泡生长发育的调节因子；现已明确：几乎所有的卵巢性索间质肿瘤细胞都能分泌抑制素，尤其是颗粒细胞瘤细胞最为明显其分泌的抑制素为 α 和 βA、βB 亚单位，而卵巢上皮性肿瘤只能分泌βA 亚单位，因此，α- 抑制素可作为卵巢性索间质肿瘤的有效敏感的标记物我们把 α- 抑制素和 CD99 联合应用于性索间质肿瘤的诊断和鉴别诊断，结果发现：a-抑制素和 CD99 在各种性索间质肿瘤中均有很高的表达率：本组资料中 a-抑制素在颗粒细胞瘤、卵泡膜纤维瘤的表达率分别为 90.5%和 81.8%,在支持间质细胞瘤、伴环状小管性索瘤、支持细胞瘤中均显示 100%表达，。